研究发现，为心梗患者注射适量t-PA蛋白会诱发颅内出血，但若将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成为心梗和脑血栓的急救药。下图所示，通过基因工程大量制备改良药物t-PA蛋白，下列说法错误 的是（ ）
| A．制备改良t-PA蛋白的过程属于蛋白质工程 |
| B．利用重组pCLY11质粒可获得牛乳腺生物反应器 |
| C．选用限制酶XmaI和BglⅡ切割质粒pCLY11，构建重组质粒 |
| D．成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色 |
更新时间：2024-03-09 10:26:00
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【推荐1】从红豆杉细胞中提取的紫杉醇是目前最好的抗肿瘤药物之一。为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因Bapt的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。相关说法正确的是（ ）
| A．过程①和②使用的酶均为DNA聚合酶 |
| B．p1303载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列 |
| C．检测过程⑤是否成功可使用过Bapt基因制成的探针 |
| D．改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取 |
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【推荐2】为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界中的其他植物中，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中。其原因是（ ）
| A．叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中 |
| B．受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞 |
| C．转基因植物与其他植物间不能通过花粉发生基因交流 |
| D．叶绿体基因一定会遗传给下一代 |
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【推荐3】人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作，EcoRI、BamHI为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有关叙述正确的是（ ）
| 限制酶 | 识别序列及切割位点 |
| EcoRI | G↓AATTC |
| BamHI | G↓GATCC |
| A．过程①所需的两种引物中分别加上GAATTC和GGATCC序列有利于后续操作 |
| B．构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行复制 |
| C．过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中 |
| D．过程④需利用液体培养基进行培养，可通过PCR技术检测干扰素基因是否表达 |
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【推荐1】下列技术依据DNA分子杂交原理的是（ ）
①用DNA分子探针诊断疾病
②重组DNA导入受体细胞
③亲子鉴定
④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子
①用DNA分子探针诊断疾病
②重组DNA导入受体细胞
③亲子鉴定
④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子
| A．②③ | B．①③ | C．③④ | D．①④ |
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【推荐2】下列关于基因工程技术的叙述，正确的是
| A．切割质粒的限制酶均只能特异性的识别3—6个核苷酸序列 |
| B．PCR反应中两种引物的碱基间相互补以保证与模板链的正常结合 |
| C．载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 |
| D．目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 |
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解题方法
【推荐3】马铃薯 Y病毒（PVY）在世界范围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害，每年均造成严重的经济损失。选育高品质马铃薯的流程如图所示（PVYN-CP 是马铃薯Y 病毒坏死株系的衣壳蛋白基因）。下列叙述正确的是（ ）
| A．过程①和过程③依据的原理均为植物细胞的全能性 |
| B．方法一中，甲常选用茎尖，原因是其具有抗病毒的特性 |
| C．对外植体进行消毒通常用酒精处理后直接用次氯酸钠溶液处理 |
| D．过程②中构建基因表达载体过程中，需要限制酶和DNA 聚合酶的参与 |
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【推荐1】结缕草是一种耐旱性强的草坪草种。研究人员将含有结缕草抗旱基因X的重组质粒导入拟南芥细胞中，以培育转基因抗旱拟南芥，培育流程如图所示。野生型拟南芥对草甘膦（一种除草剂）没有抗性，研究人员对转基因抗旱拟南芥喷施一定浓度的草甘膦后，筛选出了成功转化的转基因抗旱拟南芥。下列叙述错误的是（ ）
| A．步骤①②需要用到限制酶和DNA连接酶 |
| B．通过农杆菌的转化作用，可以将抗旱基因X导入拟南芥细胞 |
| C．草甘膦抗性基因是图中重组质粒中所含有的标记基因 |
| D．可以将转基因抗旱拟南芥培养在水分适宜的环境中进行筛选 |
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【推荐2】研究人员将编码甜菜红素合成酶的四个基因BvCYP，BvDOD、cDOPA和ADH与绿色荧光蛋白基因eGFP连接，搭载到农杆菌Ti质粒的T-DNA片段上构建多基因表达载体，利用农杆菌转化法使其在烟草细胞中表达，并能观察到甜菜红素的合成与绿色荧光。下列说法错误的是（ ）
| A．构建多基因表达载体时需用到限制酶和DNA连接酶 |
| B．可用PCR技术检测五个基因是否成功导入烟草细胞 |
| C．图中五个基因转录时均以DNA的同一条单链为模板 |
| D．应选用含潮霉素的培养基筛选转化成功的烟草细胞 |
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【推荐1】如图所示为单克隆抗体的结构，其中抗体的VH区 和VL区共同构成与抗原特异结合的部位。科学家利用蛋白质工程对A 抗原的单克隆抗体结构进行改造，获得了一种只含 A 单抗VHH区的抗体，称为A 纳米抗体。该抗体虽结构简单，但具有比A 单抗更强的特异性结合A 抗原的能力。下列说法错误的是（ ）
| A．注射病原体可能引起动物产生多种抗体 |
| B．可利用纳米抗体偶联药物进行靶向运输 |
| C．设计纳米抗体过程中，首先要做的是筛选具有优良活性的单克隆抗体 |
| D．纳米抗体与A 抗原特异性结合力更强，原因可能是与抗原接触面积更大 |
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【推荐2】下列有关现代生物技术叙述正确的是（ ）
| A．外源DNA需位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达 |
| B．进行动物细胞培养时定期更换培养液的目的是防止杂菌污染 |
| C．生产中通常取囊胚的内细胞团细胞做DNA分析进行性别鉴定 |
| D．利用蛋白质工程不可能合成自然界中不存在的蛋白质 |
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【推荐3】乳酸菌无氧呼吸过程产生的丙酮酸会在LDH酶的催化下产生乳酸，如图所示。由于工业需求，需要利用苯丙酮来生产①处基团体积更大的苯乳酸。因此科研人员拟改造原有的LDH，使其第52位的酪氨酸替换为亮氨酸。使其成为能生产苯乳酸的mLDH。下列说法错误的是（ ）
| A．上述改造过程属于蛋白质工程技术，mLDH编码基因原本不存在于自然界中 |
| B．蛋白质工程的操作是在蛋白质分子水平上进行氨基酸的增减、替换等 |
| C．改造后的mLDH可能因空间结构发生改变导致其催化活性提高 |
| D．编码mLDH的基因必须插入到启动子和终止子之间才能有机会表达 |
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