表观遗传调节异常是肿瘤发生发展的重要因素之一，N6一甲基腺苷(m6A)是真核生物 mRNA上最常见的一种修饰。研究发现，胃癌细胞中存在 m6A 去甲基化酶(ALKBH5)过表达和 STC2(癌症相关基因)mRNA的m6A修饰水平降低的异常现象。科研人员利用基因工程技术实现ALKBH5 基因沉默和STC2 基因的过表达，以研究 ALKBH5 介导的m6A 甲基化修饰对胃癌细胞迁移的影响(其中STC2基因的α链为转录的模板链)。研究人员分别用不同方式处理胃癌细胞，并测得胃癌细胞迁移标志蛋白含量如图3所示。下列说法正确的是（ ）
注:a、b、c、d为四种引物序列;BamHⅠ、Hind Ⅲ、SacⅠ为限制酶。
注:a、b、c、d为四种引物序列;BamHⅠ、Hind Ⅲ、SacⅠ为限制酶。
| A．PCR 反应体系需要加入耐高温的 DNA 聚合酶，该酶主要在延伸过程起作用 |
| B．利用PCR扩增目的基因时，需要在引物b的5'端添加BamHI识别序列和强启动子序列 |
| C．为确保目的基因正确插入质粒；需要选择限制酶BamHI和HindⅢ切割质粒 |
| D．据图3可知，ALKBH5 基因过表达导致STC2基因表达的mRNA去甲基化 |
更新时间：2024-04-08 20:11:15
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【推荐1】荧光定量PCR可定量检测样本中DNA含量，其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针并生成荧光分子，即DNA每扩增一次，就有一个荧光分子光生成（如图），荧光监测系统随时接收荧光信号变化。下列叙述错误 的有（ ）
| A．图示引物与胞内DNA复制所用引物的化学本质相同 |
| B．耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸的方向均为5'→3' |
| C．一段待扩增的DNA经过4次循环后，等长目标片段所占比例为1/2 |
| D．反应管内荧光信号到达设定阈值所经历的循环数，与样本DNA浓度呈正相关 |
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【推荐2】通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列叙述正确的是（ ）
| A．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体 |
| B．PCR的过程主要包括变性→延伸→复性（退火），温度逐渐降低 |
| C．第3轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 |
| D．每一轮PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充 |
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【推荐3】为了构建可以直接利用纤维素发酵的酿酒酵母工程菌，研究人员构建基因表达载体（如图所示），并导入不能合成尿嘧啶的酵母菌。下列相关分析正确的是（ ）
| A．尿嘧啶合成基因可以作为表达载体上的标记基因 |
| B．该方法需利用限制酶和DNA连接酶实现目的基因与载体的连接 |
| C．扩增目的基因时应在引物的5'端添加与线性化载体两端相同的DNA序列 |
| D．在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中检测酒精含量确定工程菌发酵效果 |
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【推荐1】如图表示生物工程中常用的部分技术流程图，据图分析错误 的是（ ）
| A．若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2通常要用相同方法处理 |
| B．若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建3中需要用到3种工具酶 |
| C．若图表示哺乳动物体外受精过程，1、2中的细胞均已完成减数分裂 |
| D．若图表示动物细胞核移植部分流程，3的各种性状由供体核来决定 |
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解题方法
【推荐2】终末期心脏病患者需要进行心脏移植，但移植过程中往往会发生缺血再灌注损伤（IRI），导致心脏坏死。研究发现，IRI通过促进Caspase8等一系列凋亡基因的表达，导致细胞凋亡最终引起器官坏死。根据Caspase8基因合成的小干扰RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官损伤，如图所示。下列说法正确的是（ ）
| A．供者与受者的主要组织相容性抗原一半以上相同，方可进行器官移植 |
| B．重组质粒除了包含目的基因、标记基因外，还必须有启动子和终止子 |
| C．细胞凋亡中会发生Caspase8DNA→siRNA→Caspase8蛋白的过程 |
| D．基因沉默复合物，抑制遗传信息的翻译过程，使Caspase8基因沉默 |
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【推荐1】拟南芥开花过程受多种途径的调控。在光周期途径中，叶片中的光敏色素作为光受体接受光信号，经过信号转导，激活成花素基因的表达。成花素合成后经韧皮部运输至茎尖分生组织，发挥促进开花的作用。FLC基因产物是一种植物开花的负向调控因子。春化作用可通过低温诱导FLC基因所在染色体片段的组蛋白发生甲基化修饰，这种修饰在减数分裂时会被擦除。下列相关叙述正确的是（ ）
| A．在芽中成花素的运输方向与生长素的运输方向一致，都是主动运输 |
| B．光敏色素主要吸收红光和远红光，平均分布在植物体的各个部位 |
| C．春化作用的原理可能是低温通过抑制FLC基因的表达，解除对开花过程的抑制 |
| D．春化作用不改变FLC基因的碱基序列，但影响了基因表达和表型 |
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【推荐2】蛋白D是某种小鼠正常发育所必需的，缺乏时表现为侏儒鼠。A基因能控制蛋白D的合成，a基因则不能。A基因的表达受P序列(一段DNA序列)的调控，如图所示。P序列在精子中是非甲基化状态，传给子代则A基因正常表达；P序列在卵细胞中是甲基化状态，传给子代则A基因不能正常表达。下列有关叙述正确的是（ ）
| A．P序列甲基化不改变碱基序列，引起的变异属于表观遗传 |
| B．基因型为AA的是正常鼠，基因型为Aa的个体是侏儒鼠 |
| C．纯合的正常雄鼠与侏儒雌鼠随机杂交，子代都是正常鼠 |
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