木质素是一类复杂的有机聚合物,在细胞壁的形成中特别重要,赋予木材和树皮刚性且不容易腐烂的特性。科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌,实验流程如下图所示。已知木质素能与苯胺蓝结合形成蓝色复合物。回答下列问题:___________ ,配制好的培养基通常可以使用___________ 法灭菌。
(2)用图⑤的方法对微生物进行分离和计数时,统计的菌落数往往比活菌数要___________ (填“偏高”或“偏低”),原因是______________________ 。
(3)平板冷却后,需要倒置,目的是___________ 。
(4)采用苯胺蓝培养基筛选木质素降解菌时,得到了如图所示的菌落,应从中挑选___________ 菌株进行培养。
(1)在微生物的实验培养中,获得纯净培养物的关键是
(2)用图⑤的方法对微生物进行分离和计数时,统计的菌落数往往比活菌数要
(3)平板冷却后,需要倒置,目的是
(4)采用苯胺蓝培养基筛选木质素降解菌时,得到了如图所示的菌落,应从中挑选
更新时间:2024-04-21 17:52:45
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解题方法
【推荐1】酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:
(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的________ ,及时对培养基进行分装,并进行____________ 灭菌,培养基按照用途分为______________ 和______________ 。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约_____ (在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有____________ 。
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和________ 供应。为监测酵母的活细胞密度,经等体积台盼蓝染液染色,理论上应统计________ 色细胞的个数。
(5)步骤④分离纯化酵母菌,采用的方法是______________ ,该操作按该图中所示一共需要灼烧接种环______ 次,该步骤中每次划线从上一次划线的末端开始,其目的是________ 。
(6)若在步骤②中,取最后一个试管中的菌液0.1ml分别涂布在3个平板上,适宜条件下培养一段时间,观察到菌落数分别为140、150和160个,则第一个试管中菌的浓度为____________ 个/ml。
(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约
(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和
(5)步骤④分离纯化酵母菌,采用的方法是
(6)若在步骤②中,取最后一个试管中的菌液0.1ml分别涂布在3个平板上,适宜条件下培养一段时间,观察到菌落数分别为140、150和160个,则第一个试管中菌的浓度为
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【推荐2】【生物-选修1:生物技术实践】
下图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程,回答下列问题:
(1)将土壤表层泥土稀释液煮沸15min后获得的样品中,仍然含有一些活的菌种,原因是_____________ 。
(2)图中将菌种接种到平板1的方法是_______ ;将菌种接种到平板2之前,接种工具常用_______ 法进行灭菌。为了逐步分离、纯化得到目的菌种,平板1和平板2中的培养类型都应该属于______ 培养基。对于使用频繁的菌种可接种到上图试管中的______ 培养基上临时保藏。
(3)用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1mL,培养一段时间后,平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190,据此推测,每mL样品液中的细菌数量为__________ 个。稀释涂布平板法能够通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数目,原因是_____________ 。
下图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程,回答下列问题:
(1)将土壤表层泥土稀释液煮沸15min后获得的样品中,仍然含有一些活的菌种,原因是
(2)图中将菌种接种到平板1的方法是
(3)用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1mL,培养一段时间后,平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190,据此推测,每mL样品液中的细菌数量为
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【推荐3】尿素是一种重要的农业氮肥,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们尝试从土壤中筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。他们设计的实验步骤如下图所示,下表是培养基成分。
1.此培养基按物理状态属于____________ 培养基。
2.培养基中加入尿素的作用是_____________
3.图中稀释步骤的目的是_________________________________
4.此实验操作过程中,接种前应对培养基进行_________________ 灭菌,灭菌温度为_________ ;接种时应无菌操作,这两个步骤的目的是为了使培养基接种培养后,培养基中________
A.无杂菌 B.只有目的菌 C.无菌 D.有土壤中的固氮菌
KH2PO4 | 1.4g |
Na2HPO4 | 2.1g |
MgSO4.7H2O | 0.2g |
葡萄糖 | 10g |
尿素[CO(NH2)2] | 1g |
琼脂 | 15g |
将上述物质溶解后,用自来水定容到1000mL |
1.此培养基按物理状态属于
2.培养基中加入尿素的作用是_____________
A.筛选目的菌 | B.作为氮源 | C.作为碳源 | D.杀死杂菌 |
4.此实验操作过程中,接种前应对培养基进行
A.无杂菌 B.只有目的菌 C.无菌 D.有土壤中的固氮菌
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【推荐1】微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题:
(1)实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是________ 、________ 、________ 。
(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________ 。
(3)图示是利用________ 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步________ 分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因是________ 。
(4)关于图示的操作方法和结果,叙述正确的是 。
(5)若要培养具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌,制备选择培养基时在基本培养的基础上,注意________ 和________ ,其目的________ 。
(1)实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是
(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是
(3)图示是利用
(4)关于图示的操作方法和结果,叙述正确的是 。
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌。 |
B.划线操作须在火焰上进行。 |
C.在5区域中才可以提到所需菌落。 |
D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌。 |
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解题方法
【推荐2】硒(Se)是人体必需的微量元素之一,具有抗氧化,抗癌、抗菌、增强免疫力等功能。乳酸菌可以将无机硒代谢产生有机硒和红色单质硒,由此提高了人体对硒的吸收率。科研人员通过分离纯化得到不同的乳酸菌,经富硒培养后筛选出优势菌株,并以此将牛奶发酵成富硒酸奶。回答下列相关问题:
(1)用于制作酸奶的微生物主要有乳酸杆菌、乳酸链球菌等,其中用于培养乳酸杆菌的培养基中除加入水、碳源、氮源、无机盐外,还要添加___________ ,才能确保乳酸杆菌正常生长;用于制作酸奶的牛奶通常采用___________ 法对其进行消毒。接种操作应在酒精灯火焰附近进行,原因是_____________________ 。
(2)为获得富硒乳酸菌,须在培养基上加入___________ ,根据菌落周围是否出现___________ (填“无色”或“红色”)区域进行筛选。
(3)为检测酸奶中的乳酸菌含量,科研人员吸取1mL酸奶样品加入含有9mL无菌水的试管中,振荡混匀成10倍稀释的样品稀释液;按照梯度稀释法依次将样品稀释至106倍,取0.1mL已稀释好的菌液使用________ 接种至已灭菌的培养基中。在稀释度足够高时,聚集在一起的乳酸菌将被分散成___________ ,由此繁殖出单个菌落,对菌落数在__________ 的平板进行计数,则可推算酸奶样品中的乳酸菌数。
(1)用于制作酸奶的微生物主要有乳酸杆菌、乳酸链球菌等,其中用于培养乳酸杆菌的培养基中除加入水、碳源、氮源、无机盐外,还要添加
(2)为获得富硒乳酸菌,须在培养基上加入
(3)为检测酸奶中的乳酸菌含量,科研人员吸取1mL酸奶样品加入含有9mL无菌水的试管中,振荡混匀成10倍稀释的样品稀释液;按照梯度稀释法依次将样品稀释至106倍,取0.1mL已稀释好的菌液使用
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【推荐3】为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行下图A所示的实验。回答下列问题:
(1)步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是__________ 。配制好的培养基通常可以使用高压蒸汽灭菌法灭菌,在使用该方法时,为了达到良好的灭菌效果,需要注意的事项有__________ (答出1点即可)。
(2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示,推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是__________ ;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是__________ 。
(3)在进行实验时,甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落,但是其他 同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落,若甲同学的结果有问题,则可能的原因是__________ 、__________ (答出两项即可)。
(4)步骤⑤为了提高营养物质利用率,可采取的措施是:__________ 。
(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是___________ 。
(1)步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是
(2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示,推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是
(3)在进行实验时,甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落,但是其他 同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落,若甲同学的结果有问题,则可能的原因是
(4)步骤⑤为了提高营养物质利用率,可采取的措施是:
(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是
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【推荐1】某研究小组为了研究蚯蚓体表分泌液中含有的多种抗菌肽类对土壤微生物是否具有抑制作用,进行了相应实验。请回答下列问题:
(1)称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和___________ 制作固体培养基,并用___________ 法灭菌后,倒平板,获得固体培养基。
(2)获得土壤沥出液后,利用___________ 法将沥出液均匀地接种在培养基上。
(3)利用平板打孔法将蚯蚓体表分泌液注入平板上分散的孔中,在适宜的条件下培养一段时间后,结果如下图所示。实验结果是___________ ,实验结论是______________________ 。
(4)将土壤沥出液接种到以纤维素为唯一碳源的含有蚯蚓体表分泌液的培养基上,培养后用刚果红染色。结果发现绝大部分菌落周围出现不变红的透明圈,这说明______________________ 。
(5)科学家使用___________ 法分离分泌液中不同分子量的抗菌肽类,最先分离出来的是___________ 的肽类。
(1)称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和
(2)获得土壤沥出液后,利用
(3)利用平板打孔法将蚯蚓体表分泌液注入平板上分散的孔中,在适宜的条件下培养一段时间后,结果如下图所示。实验结果是
(4)将土壤沥出液接种到以纤维素为唯一碳源的含有蚯蚓体表分泌液的培养基上,培养后用刚果红染色。结果发现绝大部分菌落周围出现不变红的透明圈,这说明
(5)科学家使用
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解题方法
【推荐2】动物的羽毛中蛋白质含量丰富,是一种新型优质的蛋白源。但是羽毛蛋白是一种高度交联的二硫键构成的角蛋白,不容易被胃蛋白酶、蛋白酶等一般蛋白酶降解。科研人员从长期堆积腐烂羽毛的土壤中筛选分离出高效降解羽毛角蛋白的嗜热型菌株。回答以下问题:(1)科研人员从长期堆积腐烂羽毛的土壤中取5g土壤样品分散于50mL的无菌水中,涂布于初筛培养基培养24h。初筛培养基除了含有微生物生长所需要的水、各种无机盐等营养,还必须满足的一个条件是_____ 。为了筛选出符合条件的菌株,其取样点应是右图中的_____ 点,理由是_____ 。
(2)用5ml无菌水冲洗初筛培养基中长出的菌落,接入富集培养基进行富集培养48h。涂布分离,挑取单个菌落平板划线,划线的目的是_____ 。进行平板划线前需要将平板_____ ,以防止冷凝水滴落平板,造成污染。
(3)科研人员筛选获得了3株降解羽毛效果好的菌株:F2、F3和F4,将它们分别接种在含有完整天然羽毛的发酵液中,一段时间后,测定羽毛的脱毛情况及发酵液中氨基酸增加量,结果如表所示。在筛选获得的3株菌株中,降解羽毛效果最好的是_____ ,理由是_____ 。
(2)用5ml无菌水冲洗初筛培养基中长出的菌落,接入富集培养基进行富集培养48h。涂布分离,挑取单个菌落平板划线,划线的目的是
(3)科研人员筛选获得了3株降解羽毛效果好的菌株:F2、F3和F4,将它们分别接种在含有完整天然羽毛的发酵液中,一段时间后,测定羽毛的脱毛情况及发酵液中氨基酸增加量,结果如表所示。在筛选获得的3株菌株中,降解羽毛效果最好的是
菌脱 | 脱毛时间/d | 氨基酸增加量/(mg·mL-1) |
F2 | 5 | 0.6882 |
F3 | 5 | 0.6198 |
F4 | 2 | 0.8862 |
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【推荐3】微生物驯化是指在微生物培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物,并设计了如下实验流程。请回答以下问题:(1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等,驯化时逐步加入的物质X是____________ 。依照物理性质划分,驯化培养基属于_______ 培养基,其中蛋白胨可提供____________ ,氯化钠和磷酸二氢钾两种无机盐,在培养基中具有___________ 的作用(至少答两点)。
(2)用于筛选的样品应来自__________ 的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为________ ,该方法不需要梯度稀释也能获得单菌落,原因是_____________ 。
(3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以____________ 为唯一碳源的培养基C,培养24小时后,通过测定培养基中________ ,可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量,在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D,统计菌落数分别为250、247、312、253,测得培养基C中活菌数为1.25×107个/mL,则涂布的菌液Y为__________ mL。
(2)用于筛选的样品应来自
(3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以
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【推荐1】将葡萄球菌在含卵黄的固体培养基上培养时,葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,形成的菌落周围会出现特有的乳白色乳浊环。某兴趣小组欲通过实验室培养和计数来检测某果汁中的葡萄球菌密度。回答下列问题:
(1)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键步骤是:_________________ ,本实验中所用的培养皿__________ (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中灭菌。
(2)若要检测果汁中的葡萄球菌密度,需先进行稀释操作,稀释操作中,用手指轻压移液管上的橡皮头,吸吹3次的目的是_____________________________________ ;将稀释后的样液用稀释涂布平板法接种在固体培养基上,利用这一方法进行活菌计数的原理是_____________________________________ 。
(3)将104倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后,统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是210、200、220。如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度,还需要知道的一个重要数据是_______________ 。
(4)配制分离葡萄球菌的培养基时,在培养基中加入一定量的卵黄液,卵黄液能给微生物提供________ 、水和无机盐等营养物质;从功能角度对培养基进行分类,该培养基属于________________ ;已知葡萄球菌耐受高浓度NaCl,为筛选出葡萄球菌,在配制培养基时的操作方法是_____________________________ 。
(1)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键步骤是:
(2)若要检测果汁中的葡萄球菌密度,需先进行稀释操作,稀释操作中,用手指轻压移液管上的橡皮头,吸吹3次的目的是
(3)将104倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后,统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是210、200、220。如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度,还需要知道的一个重要数据是
(4)配制分离葡萄球菌的培养基时,在培养基中加入一定量的卵黄液,卵黄液能给微生物提供
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【推荐2】漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,请回答下列问题:
(1)要分离产漆酶菌株的样品应该富含___________ 这种物质。样品悬液需要培养一段时间以后再进行涂布接种,这一步培养的目的是________________ 。此时培养基应以木质素为唯一碳源,原因是________ 。这一步培养之后,涂布接种之前,还必须完成的一步操作是____________ 。
(2)分离到产漆酶的菌株以后,得到的菌种需要进行保存,需要将菌种接种到______ 培养基上,这种保存方法不能用于菌种的长期保存的原因是____________ 。某同学在接种完菌种之后直接将试管放入4℃的冰箱中保藏,结果影响到了后续菌种的使用,该操作存在的问题是_____________ 。
(1)要分离产漆酶菌株的样品应该富含
(2)分离到产漆酶的菌株以后,得到的菌种需要进行保存,需要将菌种接种到
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【推荐3】日前,微博传言单位面积上手机屏幕上的细菌比马桶按钮上的多。下图是某校甲、乙两个生物兴趣小组展示的实验调查结果。回答下列相关问题:
(1)在制备该培养基的过程中,除了添加微生物所需的基本营养物质外,培养基还需满足微生物生长对___________________ 等的要求。由图中4组培养结果可知.该实验接种微生物的方法为______________________ 。
(2)通过观察菌落的_________________________________ (答两点)等特征,可对手机屏幕和马桶按钮上存在的微生物进行初步鉴定。但若要进一步确定是否存在大肠杆菌,可以加入______________________ 指示剂进行鉴定,若培养基中出现___________ 菌落,则说明存在大肠杆菌。
(3)按图示面积取样,小组成员定某手机屏幕的细菌数量,将10mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到四个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为38、40、42、29,则该手机屏幕的细菌数为___________ 个/平方厘米,为了使该实验统计的数据更准确,应另外设置对照实验.请问如何设置?______________________________
(1)在制备该培养基的过程中,除了添加微生物所需的基本营养物质外,培养基还需满足微生物生长对
(2)通过观察菌落的
(3)按图示面积取样,小组成员定某手机屏幕的细菌数量,将10mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到四个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为38、40、42、29,则该手机屏幕的细菌数为
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