实时荧光RT-PCR可用于新型冠状病毒的核酸检测,RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合的技术,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如下图所示。下列说法错误的是( )
A.做RT-PCR之前,需要先根据新冠病毒的cDNA核苷酸序列合成引物和探针 |
B.如果检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者没有感染新型冠状病毒 |
C.RNA不能作为PCR扩增的模板,需将样本中的RNA反转录为DNA后再扩增 |
D.还可以检测病毒的外壳或病毒引发产生的抗体,其原理都是抗原—抗体杂交 |
更新时间:2024-04-28 15:06:23
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【推荐1】下列有关记忆细胞的叙述中,正确的是
A.记忆细胞不能进行细胞增殖 |
B.接触一次某种抗原,记忆细胞是能长期记住该抗原的特征 |
C.记忆细胞可以产生抗体 |
D.细胞免疫不能产生记忆细胞 |
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【推荐2】预防接种是把人工处理的病菌,病毒等疫苗接种在健康人的身体内,使人在不发病的情况下产生抗体获得特异性免疫的医学技术。一次免疫应答中产生的抗体不会全部用完,因此检查血液中是否存在某种抗体,便可确定一个人是否进行过接种或受到某种病原体的侵袭,下列相关叙述正确的是( )
A.人体内存在着多种免疫活性物质,它们都是由免疫细胞产生并分泌的 |
B.接种后受到相应病原体侵袭时,浆细胞迅速增殖分化并产生大量抗体 |
C.疫苗不仅可以预防一些传染疾病,还可以预防某些癌症 |
D.肺结核患者通过抗体的作用就能迅速清除入侵的所有的结核杆菌恢复健康 |
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解题方法
【推荐1】目的基因和载体如果用同一种限制酶处理,连接时会出现正反接的情况,为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR后,结合电泳技术鉴定,图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,其中目的基因为长度300bp的片断。下列有关说法不正确的是( )
A.PCR退火温度不宜太低,避免引物错配和模板链形成双链 |
B.电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关 |
C.选取引物甲丙,扩增出450bp长度片断时,可以说明目的基因正接 |
D.选取引物甲乙,扩增出400bp长度片断时,可以说明目的基因反接 |
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【推荐2】实时荧光定量PCR简称qPCR,灵敏度高特异性好,是目前检测微小残留病变的常用方法。将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合,当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到在特定光激发下发出荧光(如图所示),随着循环次数的增加,荧光信号强度增加,通过实时检测荧光信号强度,可得Ct值(该值与待测样本中目的基因的个数呈负相关)。下列相关叙述正确的是( )
A.每个模板DNA分子含有4个游离的磷酸基团 |
B.在反应过程中,需要ATP为新链的合成提供能量 |
C.做qPCR之前,需要先根据目的基因的核苷酸序列合成引物和Taqman探针 |
D.荧光信号达到设定的阈值时,经历的循环数越少,说明含有的病变的概率越小 |
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解题方法
【推荐3】研究发现,水稻蜡质基因(Wx)编码直链淀粉合成酶。若Wx基因中第226位碱基是正常的G,该位点所在的内含子能被正常剪接,胚乳中直链淀粉含量最高,基因型记做GG;若该位点突变成T,则不能被正常剪接,胚乳中直链淀粉的合成水平会降低,基因型记做TT。为检测Wx基因该位点碱基是G或T,研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料,以Wx基因片段设计引物如图所示,对PCR扩增产物经AccⅠ酶切后电泳。已知引物1为5'-GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3',两引物之间无另外的AccI酶的识别位点。下列叙述正确的是( )
A.组成上述两种淀粉合成酶的氨基酸的种类不同,数目相同 |
B.GT杂合型水稻品种酶切电泳结果为2条条带 |
C.若酶切产物只能观察到大约460bp的DNA条带,则表明该水稻品种为TT型 |
D.该实验中需设计的引物2为5'-TTCAACTCTCGTTAAATCAT-3' |
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【推荐1】新冠肺炎的病原体是一种单股正链RNA(+)的冠状病毒,在宿主细胞内的增殖过程如图所示,a~e表示相应的生理过程。下列相关叙述错误 的是( )
A.RNA(+)的嘌呤数与RNA(-)的嘧啶数相等 |
B.mRNA和RNA(+)的碱基排列顺序相同 |
C.过程b和过程e的碱基配对方式相同 |
D.过程a需要的模板、原料和能量均来自宿主细胞 |
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【推荐2】新冠病毒抗原检测试剂盒可以作为核酸检测的补充手段,用于特定人群的筛查。它的外观如图A所示,只需要将采集制备的样液滴在点样口(S)处,15分钟后,若T线和C线处同时显示横杠即阳性,要即时隔离、核查就医。它的内部结构如B所示(胶体金法),结合垫,T线和C线处分布有不同种类抗体,其中抗体1、3均能与待测抗原结合,抗体2能与抗体4结合,如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色,出现横杠。下列关于该抗原检测试剂盒的推测,不正确的是( )
A.使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性 |
B.抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的 |
C.点样后,结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散 |
D.T线C线均不显示横杠即为阴性,没有感染病毒 |
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【推荐3】我国已经开始部署新冠疫苗序贯加强免疫接种,序贯加强免疫接种是指采用与基础免疫不同技术路线的疫苗进行加强免疫接种,下图是两位同学的疫苗接种记录。下列相关叙述,错误的是( )
新冠疫苗 | 甲同学 | 新冠疫苗 | 乙同学 |
2021年04月30日 | 完成首针(北京科兴中维) | 2021年05月19日 | 完成首针(北京科兴中维) |
2021年05月26日 | 完成第二针(北京科兴中维) | 2021年06月16日 | 完成第二针(北京科兴中维) |
2022年03月15日 | 完成第三针(兰州生物) | 2022年03月16日 | 完成第三针(安徽智飞) |
注:北京科兴与兰州生物新冠疫苗是灭活疫苗,安徽智飞新冠疫苗是重组蛋白疫苗 |
A.首次注射新冠灭活疫苗可使机体产生初次免疫应答,要增强免疫效果需再次接种 |
B.新冠病毒mRNA疫苗进入细胞的过程体现了细胞膜的流动性 |
C.序贯加强免疫接种可以实现不同疫苗之间的优势互补 |
D.甲同学与乙同学第三针均属于序贯加强免疫接种 |
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