我们在生产、生活中产生的大量垃圾，正在严重侵蚀我们的生存环境，垃圾分类处理是避免“垃圾围城”的有效途径。利用微生物将垃圾中的有机物分解是常用的方法。请回答下列问题:
(1)每种微生物的利用，都离不开微生物的分离、提纯和培育。实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻断其它微生物的生长，能达此目的的培养基称为_________ 。在实验中，为了获得纯净的某种微生物，关键是_________ ，主要包括消毒和灭菌，其中对培养基常采用的方法是__________ 。
(2)我国科学院研究团队首次发现了能够高效降解聚氨酯（PU）塑料的新菌种，并把该菌种命名为塔宾曲霉菌，若要筛选该菌种，则需要使用以_________ 为唯一碳源的选择培养基。若要测定样品溶液中该菌种的数目，可将100mL含该菌种的样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为190个，且空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中含有塔宾曲霉菌_________ 个。
(3)若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入刚果红的培养基中，通过比较菌落的__________ ，来判断降解活性的高低。
(4)研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌（均为需氧型）处理厨余垃圾废液效果好。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，研究者做了如下实验；①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：
将上表菌液分别接种于50mL某厨余垃圾废液中进行振荡培养。
本实验的对照组应在50mL厨余垃圾废液中接种__________ 。
②培养3天后测定活菌数：取一定量菌液进行_________ ，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布平板法接种于完全培养基中培养。依据菌落形态对两种菌进行区分计数。
③实验结果如下图：_________ ，判断依据是_________ .
(1)每种微生物的利用，都离不开微生物的分离、提纯和培育。实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻断其它微生物的生长，能达此目的的培养基称为
(2)我国科学院研究团队首次发现了能够高效降解聚氨酯（PU）塑料的新菌种，并把该菌种命名为塔宾曲霉菌，若要筛选该菌种，则需要使用以
(3)若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入刚果红的培养基中，通过比较菌落的
(4)研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌（均为需氧型）处理厨余垃圾废液效果好。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，研究者做了如下实验；①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：
| 编号 | A | B | C | D |
| 圆褐固氮菌：芽孢杆菌 | 1：0 | 0：1 | 1：1 | 2：1 |
本实验的对照组应在50mL厨余垃圾废液中接种
②培养3天后测定活菌数：取一定量菌液进行
③实验结果如下图：
更新时间：2024-05-05 13:40:01
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【推荐1】利用玉米秸秆生产乙醇，其技术流程为：
(1)玉米秸秆经预处理后，应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①从土壤中分离出分解纤维素细菌的培养基配方如下：纤维素粉5g、 NaNO3 1g、Na2HPO4• 7HZ0 1.2g、KH2PO4 0.9 g、MgS04·7H20 0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到IOOOmU9该培养基能初步选择出分解纤维素细菌的原因是_________________ 。
②为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入________ 染液，将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生_______ 的菌落作为菌种进行扩大培养。
③从分解纤维素细菌中提取出的纤维素酶首先要检测_____________ ，以便更好地将酶用于生产实践。为了使分离出的纤维素酶能够反复使用，最好采用___________________ 或_______________ 方法将酶固定化。
(2)发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是___________________ 。
(3)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性,从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR 技术扩增目的基因。在PCR反应体系中，除了要加入模板、原料外，还需要加入______ 和__________ 等
(1)玉米秸秆经预处理后，应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①从土壤中分离出分解纤维素细菌的培养基配方如下：纤维素粉5g、 NaNO3 1g、Na2HPO4• 7HZ0 1.2g、KH2PO4 0.9 g、MgS04·7H20 0.5g、KCl0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到IOOOmU9该培养基能初步选择出分解纤维素细菌的原因是
②为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入
③从分解纤维素细菌中提取出的纤维素酶首先要检测
(2)发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是
(3)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性,从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR 技术扩增目的基因。在PCR反应体系中，除了要加入模板、原料外，还需要加入
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【推荐2】随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩 ，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌，设计了如图所示的流程。回答下列问题：
(1)通过相关实验选择较合适的土壤样品时，该实验的自变量是_______ ，选择最合适土壤样品的指标是_______ 。
(2)图中“甲”指的是_______ ，使用的是_______ （填“固体”或“液体”）培养基，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度。
(3)分离纯化聚丙烯纤维降解菌时，为了使培养皿上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的接种方法是_______ ，采用该方法的原因是_______ 。
(4)将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基以_______ 为唯一碳源，并加入了能与之结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为S1，菌落周围透明圈的面积为S2，那么，选择_______ 的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。
(1)通过相关实验选择较合适的土壤样品时，该实验的自变量是
(2)图中“甲”指的是
(3)分离纯化聚丙烯纤维降解菌时，为了使培养皿上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的接种方法是
(4)将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基以
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名校
【推荐3】最新调查显示手机每平方厘米就驻扎了12万个细菌，这个数字足以令马桶坐垫上的细菌队伍汗颜。某生物兴趣小组的同学，利用手机表面的细菌进行了相关的培养研究。
（1）培养微生物的培养基一般含有的成分有_____ ，另外还需满足pH、营养物质以及对氧气的需求。
（2）若想获取不同菌的菌落形态，需要固体培养基培养，培养基配置的基本步骤有：计算称量、溶化、灭菌、倒平板。上述操作完成待培养基冷却凝固后需将平板倒置，这样做的目的是_____ 。
（3）为研究手机表面微生物的种类，用稀释涂布平板法进行细菌的纯化和分离。下面的四种菌落分布情况中，哪些选项是通过稀释涂布平板法得到的_____
（4）研究小组用琼脂扩散法测定玫瑰精油对手机表面细菌的抑制情况。该方法的操作步骤如下：首先制备牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器将5种细菌分别接种到5个平板上，得到细菌平板。然后制备直径为5mm 的滤纸圆片，采用_____ 灭菌法处理，将灭菌的滤纸片部分放入适宜浓度的玫瑰精油中，对照组放入_____ 中，浸泡10min，后将滤纸片放在5个细菌平板表面。最后将平板放入恒温培养箱中倒置培养48小时。通过测量_____ 来检测玫瑰精油对5种细菌的抑制效果。
（1）培养微生物的培养基一般含有的成分有
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名校
【推荐1】某研究小组进行了稻田固氮、解磷、解钾筛选及其复合菌剂对土壤培肥作用的系列实验。
(1)菌株筛选：从土壤中筛选出具有固氮、解磷和解钾能力的3种菌株， A、B、C，需选用的培养基分别为表中的______ 。这些培养基从功能上应属于______
（注：钾长石粉是一种富钾的铝硅酸盐矿物制成的粉末，其主要化学成分为
、
、
、CaO等）
(2)菌株鉴定：将上述筛选出的菌株用______ 法分别接种到固氮、解磷和解钾培养基培养，观察菌落的______ 等特征，对菌株进行种属鉴定和计数。通过该计数方法获得的数据往往比实际菌体数少，原因是______ 。为保证鉴定结果准确无误，关键是要做到______ 。
(1)菌株筛选：从土壤中筛选出具有固氮、解磷和解钾能力的3种菌株， A、B、C，需选用的培养基分别为表中的
类型 | 组成 |
甲 | 甘露醇、 |
乙 | 蔗糖、 |
丙 | 葡萄糖、NaCl、KCl、 |
、NaCl、
、
、
，pH7.2
、
、
、
，pH7.2（注：钾长石粉是一种富钾的铝硅酸盐矿物制成的粉末，其主要化学成分为
、、、CaO等）(2)菌株鉴定：将上述筛选出的菌株用
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【推荐2】莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下图1程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。
(1)由图1推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_________
(2)图2为A~C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，甲类细菌密度迅速降低的主要原因是__________
(3)本实验中将C瓶菌种接种到固体培养基的方法是__________ ，接种之前通常要进行__________ 。
(4)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落。请根据培养结果，结合两种菌落中细菌利用的氮源，分析说明哪种菌落中的细菌是筛选出来的目的菌。_____________________ 。
(5)为弄清固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？_____________________ 。
(1)由图1推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_________
| A．初步选择能降解莠去津的细菌 | B．初步选择能降解莠去津的细菌菌落 |
| C．增加能降解莠去津的细菌数量 | D．去除土壤中的杂质 |
| A．莠去津会杀死甲类细菌 |
| B．培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源 |
| C．振荡造成培养液中溶氧增加，抑制了甲类细菌生长 |
| D．培养液中没有甲类细菌寄生的宿主 |
(4)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落。请根据培养结果，结合两种菌落中细菌利用的氮源，分析说明哪种菌落中的细菌是筛选出来的目的菌。
(5)为弄清固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？
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【推荐3】咔唑（含N有机物）具有潜在致癌性，且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物，研究人员设计了如图所示的实验方案。请回答下列有关问题：
（1）在获取土壤微生物后先进行①～②的培养，其目的是________________ 。为了获得目的微生物，①～②号瓶所用的液体培养基的成分共有的特点是________________ 。
（2）“目的菌”的代谢类型是__________ 。在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是________________ 。在多瓶培养的过程中，通过测定咔唑浓度来确定目标微生物，则咔唑浓度________________ 的摇瓶内为目标微生物。
（3）可对获得的高效降解咔唑的微生物进行固定化处理，而海藻酸钠是固定化细胞中常用的载体，如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，则说明________________ 。目前还没有一种固定化技术普遍适用于所有酶，原因是____________________________ （答出一点即可）。
（1）在获取土壤微生物后先进行①～②的培养，其目的是
（2）“目的菌”的代谢类型是
（3）可对获得的高效降解咔唑的微生物进行固定化处理，而海藻酸钠是固定化细胞中常用的载体，如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，则说明
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【推荐1】研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。我国科学家从深海冷泉附近的沉积物样品中分离、鉴定得到拟杆菌X，然后使用不同碳源的培养基对拟杆菌X进行培养，实验结果如图甲所示。回答下列问题：
(1)为了检测灭菌是否合格，需要进行的操作是_____________ 。
(2)图乙表示使用不同接种方法后培养拟杆菌X的实验结果，图乙中能用于拟杆菌X计数的是培养基_____________ （填序号），该培养基对应的接种方法是________________________ 。
(3)据图甲分析，在培养8天后，不同培养基中拟杆菌X的种群密度基本达到了稳定，其原因是_______________ 。
(4)据图甲分析，若要尽快扩大培养拟杆菌X，最好选择以_____________ 为碳源的培养基。与该碳源相比，拟杆菌X在以淀粉为碳源的培养基中数量最少，从酶的角度分析，可能是由于在相同时间内，_____________ （答出1点）。
(1)为了检测灭菌是否合格，需要进行的操作是
(2)图乙表示使用不同接种方法后培养拟杆菌X的实验结果，图乙中能用于拟杆菌X计数的是培养基
(3)据图甲分析，在培养8天后，不同培养基中拟杆菌X的种群密度基本达到了稳定，其原因是
(4)据图甲分析，若要尽快扩大培养拟杆菌X，最好选择以
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名校
【推荐2】尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL。实验过程如图所示，回答下列问题：
（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是______________________ 。
（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是_____________ 。初步筛选出来的 菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入________ 指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成________ 色，则可说明该菌种能够分解尿素。
（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是________ ，需要消毒的是________ （填序号）。
①培养细菌的培养基与培养皿
②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管
③实验操作者的双手
（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________ （填序号）。
①所取土样不同 ②培养基被污染
③接种操作错误 ④没有设置对照实验
KH2PO4 | 1．4 g |
Na2HPO4 | 2．1 g |
MgSO4·7H2O | 0．2 g |
葡萄糖 | 10 g |
尿素 | 1 g |
琼脂 | 15 g |
（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是
（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是
（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是
①培养细菌的培养基与培养皿
②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管
③实验操作者的双手
（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有
①所取土样不同 ②培养基被污染
③接种操作错误 ④没有设置对照实验
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解题方法
【推荐3】大肠杆菌是人和动物肠道中的正常寄居菌，可在有氧环境下进行实验室培养。研究人员将某微生物的固碳基因导入大肠杆菌细胞内，使之能产生用于CO2固定和还原的酶；同时将能利用甲酸盐（可再生的储氢物质，具备廉价、易得、无毒、可降解等特性）的非天然酶基因导入大肠杆菌，如图所示。请回答下列问题：____________ 来合成直接的能源物质，进而驱动工程菌利用_____________ 为原料合成有机物。
(2)实验过程中，需每天取1mL培养液用__________ 进行一系列梯度稀释，将稀释了10倍和100倍的培养液各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，两组平板上的菌落数分别为71、75、73个和4、9、8个，据此可得出每升菌液中的活菌数为____________ 个。
(3)由题意可知，改造前的大肠杆菌的呼吸方式为___________________ ，可利用下图中的实验装置进行验证，操作如下：_______________ ，扎紧气球。
②将两套装置始终置于37℃的恒温水浴中。
③一段时间后，记录_____________________ 。预期实验结果：_______________________________ 。
(2)实验过程中，需每天取1mL培养液用
(3)由题意可知，改造前的大肠杆菌的呼吸方式为
②将两套装置始终置于37℃的恒温水浴中。
③一段时间后，记录
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【推荐1】为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A所示的实验。回答下列问题。
（1）步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中__________ 。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于__________ 培养基。
（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是__________ ，出现图B结果可能的失误操作是__________ ，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________ 。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤①的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0．1mL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为__________ 个。
（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是_____________________________ 。
（5）步骤⑤后，取样测定石油含量的目的是____________________________________ 。
（1）步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中
（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤①的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0．1mL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为
（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是
（5）步骤⑤后，取样测定石油含量的目的是
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名校
【推荐2】溶菌酶遇碱易被破坏，但在酸性环境下，对热的稳定性很强。它能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖，广泛应用于食品加工、环境工程、医药制作等领域。请回答下列有关问题：
（1）酶所催化的化学反应速度常用____ 来表示。溶菌酶能杀菌但并不能杀死植物细胞的原因是：植物细胞的细胞壁主要成分不是肽聚糖而是____ 。
（2）溶菌酶常被用来作为食品防腐剂，食品最好是_____ （用“酸/碱/中”作答）性，原因是：_______ 。
（3）在实际生产中常用固定化酶技术，固定化酶常采用的方法有_______ ，与直接使用酶相比，其主要优点是_______ 。
（4）用双层琼脂平板法从土壤样品中初步筛选产溶菌酶菌株。将均匀混有金黄色葡萄球菌的培养基倒入培养皿中形成下层培养基，将1ml土壤悬液加入已经凝固的下层培养基上，再倒入50℃培养基，混匀制成上层培养基。适宜条件下培养合适时间，结果如下图表示：
下层平板中加入的金黄色葡萄球菌的作用是：____ ；用无菌牙签挑取___ 菌落进一步的分离、鉴定。
（1）酶所催化的化学反应速度常用
（2）溶菌酶常被用来作为食品防腐剂，食品最好是
（3）在实际生产中常用固定化酶技术，固定化酶常采用的方法有
（4）用双层琼脂平板法从土壤样品中初步筛选产溶菌酶菌株。将均匀混有金黄色葡萄球菌的培养基倒入培养皿中形成下层培养基，将1ml土壤悬液加入已经凝固的下层培养基上，再倒入50℃培养基，混匀制成上层培养基。适宜条件下培养合适时间，结果如下图表示：
下层平板中加入的金黄色葡萄球菌的作用是：
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【推荐3】玉米芯残渣含有大量的木质纤维素（由纤维素、半纤维素和木质素组成），通常被焚烧处理，不但造成严重的环境污染，还导致大量能量浪费。某科研团队从树林土壤中筛选得到野生的季也蒙毕赤酵母，并进行多次筛选以期获得优良菌株。优良菌株以玉米芯残渣为原料可发酵生产洁净燃料——乙醇。下图为筛选过程，请分析回答：
(1)图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是__________ 。稀释后将菌液接种到以_________ 作为唯一碳源的培养基中进行培养。
(2)发酵生产时需先将玉米芯残渣进行预处理，该过程会产生许多抑制物。因此，研究人员在②的液体培养基中加入抑制物，并在③多次筛选时不断提高抑制物的浓度，是为了____________ 。培养过程中从②的液体培养基中定期取样并用__________ 的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有___________ 和___________________ 等。
(3)刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的葡萄糖等发生这种反应，从而在纤维素分解菌周围出现透明的水解圈。将经过多次实验所获得的4种优良菌株后接种到含纤维茶、刚果红、高浓度抑制物的固体培养基中，结果如图。可选择菌株_________ 作为目标菌株进行发酵生产，原因是__________________ 。
(1)图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是
(2)发酵生产时需先将玉米芯残渣进行预处理，该过程会产生许多抑制物。因此，研究人员在②的液体培养基中加入抑制物，并在③多次筛选时不断提高抑制物的浓度，是为了
(3)刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的葡萄糖等发生这种反应，从而在纤维素分解菌周围出现透明的水解圈。将经过多次实验所获得的4种优良菌株后接种到含纤维茶、刚果红、高浓度抑制物的固体培养基中，结果如图。可选择菌株
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