【推荐1】膜泡是细胞中一种重要细胞结构，但由于其结构不固定，因而不能称之为细胞器。细胞内部产生的蛋白质被包裹于膜泡形成囊泡，囊泡具有准确的转运物质的调控机制，它能在正确的时间把正确的细胞“货物”运送到正确的目的地。
（1）膜泡的形成，充分体现了生物膜的结构特点是具有__________，膜泡是由单层膜所包裹的膜性结构，其基本支架是______________，动物细胞中能产生膜泡的结构一般有_________________________。
（2）囊泡上有一个特殊的VSNARE蛋白，它与靶膜上的受体蛋白结合形成稳定的结构后，囊泡和靶膜才能融合，从而将物质准确地运送到相应的位点，这说明膜融合具有_______性，该过程_______（填“需要”或“不需要”）消耗能量。
（3）如果囊泡转运系统受到干扰，则会对有机体产生有害影响，并导致如糖尿病等疾病的发生，这种类型糖尿病发病的机理是________________________________________。
（4）为了确定参与膜泡运输的基因（sec基因），科学家筛选了两种酵母突变体，这两种突变体与野生型酵
母电镜照片差异如表：

据此推测，sec12基因编码的蛋白质的功能是与____________的形成有关，sec17基因编码的蛋白质的功能是___________________________________。

【推荐2】二甲双胍的抗肿瘤效应越来越受到人们的广泛关注。它可通过抑制线粒体的功能而抑制细胞的生长，其作用机理如图所示。请据图回答下列问题：

（1）核膜的主要成分是________________。线粒体中可合成ATP的部位是________________。据图分析，二甲双胍抑制线粒体的功能，进而直接影响了______________的跨核孔运输，最终达到抑制细胞生长的效果。
（2）物质进出核孔是否具有选择性？________。RagC进出细胞核需经过________层生物膜。
（3）下列生理过程可能受二甲双胍影响的是_______。
A．细胞分裂                                        B．转录RNA
C．分泌蛋白质                                      D．细胞质中激活型RagC转化为无活型RagC

【推荐3】某植物研究所发现一个具有分泌功能的植物新物种，该植物细胞的亚显微结构的局部图如下。请据图回答下列问题：

(1)与图1中细胞膜上具识别功能的物质的形成有关的细胞器有_____________（填字母）。图中含有核酸的细胞器有_____________（填字母）。
(2)将该植物的正常活细胞浸在质量分数为1%的健那绿染液中，图中被染成蓝绿色的结构是_____________（填字母）。该细胞中磷脂的合成场所是_____________（填中文名称）。从功能的角度分析，C与E紧密相依的意义是_____________。
(3)G与该植物细胞壁成分的形成直接或间接有关，G中合成果胶等非纤维素多糖，而纤维素合成过程是在细胞膜上完成的，请推断纤维素的合成与G的关系：_____________。
(4)有学说认为线粒体起源于好氧性细菌：好氧细菌被原始真核生物吞噬后与宿主间形成共生关系（好氧细菌可从宿主处获得更多的营养，而宿主可借用好氧细菌的氧化分解功能获得更多的能量），最终逐渐进化为现在的线粒体。据此分析，图1中E和A中DNA的存在形式的主要区别是_____________。
(5)将完整的离体线粒体放在缓冲液中，按图2所示，分别加入物质x、y、z。已知寡霉素可以抑制ATP合成酶的作用，琥珀酸是可以被氧化分解的物质，DNP（一种化学物质）可降低进入线粒体内的[H]的含量。分析可知，物质x是_____________，z是_____________，②阶段最可能是_____________。

【推荐1】与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化较慢，可溶性糖含量高，汁多质脆，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题：

(1)强启动子能驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用___酶组合，将DNA片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。
(2)外植体经______形成的玉米愈伤组织放入农杆菌液浸泡后进行植物组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，最终获得多个玉米株系a₁、a₂、a₃、a₄。通过对a₁、a₂、a₃、 a₄，四株甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定结果如图2，______（填“能”或“不能”）说明a₄株系未导入重组质粒，原因是________。
(3)真核基因的编码区含有内含子和外显子，下图3为淀粉酶合成基因片段，其转录后形成的前体RNA需通过剪接（切去内含子对应序列）和加工后方能用于翻译。

科研人员通过降低调控淀粉酶合成基因的表达实现提高甜玉米中可溶性糖的含量。吗啉反义寡核苷是RNA剪接抑制剂，注入植物细胞内会使基因表达受阻。为验证吗啉反义寡核苷能阻止前体RNA上内含子1的对应序列被剪切，科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵作为实验组，设计相关实验，请完成下列表格：

操作流程	操作方法或操作要点
获取cDNA	从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取总RNA，①__形成cDNA。
扩增cDNA	以获得的cDNA为模板进行PCR时需加入引物②_____。
产物鉴定	用琼脂糖凝胶电泳技术鉴定PCR扩增后获得的产物
分析结果，得出结论	实验组有目的条带，对照组无目的条带，说明③______。

某次实验结果电泳发现：实验组和对照组都没有任何条带，从PCR操作过程角度解释可能的原因有______（至少答出两点）。

【推荐2】径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na^＋/K^＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。下图1是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；下图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；下图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：

(1)不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA，其原因是_________。
(2)若用BamHⅠ切割图1所示的DNA片段，获取目的基因，则需选用_________切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，请写出两个黏性末端连接后的碱基序列：_____________，该序列能不能被图2中某种酶识别，如果能，请写出酶的名称：____________。简述该方案的缺陷是__________________。
(3)参考上问，故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用_________酶。图1所示一个DNA片段被完全酶切后会产生____个DNA片段。
(4)图3中，启动子可以被____________识别，终止子序列的基本单位是_________。
(5)为了检测技术成果，科研工作者在个体水平的检测方法是_________________。
(6)若已知TaNHX2基因的两端部分序列为：5'-AACTATGCGC……CGTAGCCTCT-3'，请写出PCR扩增该基因时的两个引物对应的局部序列（前5个碱基序列），并标明5'和3'端：_________________，________________。

【推荐3】为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝细胞中油脂积累的影响机制，科研人员构建了两个基因表达载体，其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc）构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示，箭头表示转录方向。回答下列问题。

(1)载体中启动子的作用是_____。
(2)据图分析，构建基因表达载体甲时，需要选择_____两种限制酶识别序列事先添加在LEA基因的两侧，然后再用这两种限制酶分别切割载体和LEA基因，最后再用DNA连接酶拼接，选用两种限制酶切割的优点是_____。
(3)利用PCR扩增LEA基因时，需要在两种引物上分别添加两种限制酶的识别序列，从而扩增出两端带有两种限制酶识别序列的LEA基因。依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为5′—_____—3′和5′—_____—3′。
(4)乙酰-CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如图。

①在分子水平上，用_____技术检测AC酶和ATGL酶的表达量可得到上述结果。
②基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝细胞油脂积累中的机制是：_____。

【推荐1】黄瓜为雌雄同株异花植物，同一植株上既有雌花也有雄花，雌花率影响黄瓜产量。研究人员利用黄瓜纯合雌雄同株品系甲培育出了全雌株（只有雌花）品系乙，为确定全雌株性状形成的分子机制，研究人员进行了如下实验：
（1）品系甲与品系乙杂交，获得的F₁表现型为全雌株，说明全雌株为___________性状。将F₁与品系甲杂交，获得的子代表现型及比例为___________，表明该相对性状由一对等位基因控制。研究人员发现给品系甲施加乙烯，可以增加雌花的比例，说明生物的性状是___________的结果。
（2）进一步研究发现控制全雌株性状的基因位于3号染色体上，品系甲、乙3号染色体上部分基因情况如图1所示，同时发现品系乙花蕾细胞中ASC基因的mRNA和MYBI基因的mRNA含量显著高于品系甲，而BCAT基因的mRNA无显著差异。

注：ASCa基因编码区序列与ASCb基因相同，非编码区序列有差异
由图1及上述结果推测，品系乙可能由于___________，从而促进了雌花的发育。
（3）为进一步确定控制全雌株性状的基因，研究人员CRISPR-利用-cas9系统对相关基因进行编辑。该系统的核心组成包括gRNA和Cas9，gRNA可以识别并结合靶基因，引导Cas9蛋白对靶基因进行剪切，进而破坏靶基因结构。
由于品系乙难以被直接编辑，研究人员以品系甲为背景选育了转基因植株丙和丁（图2），分别与品系乙进行杂交，结果见表。

亲本	F1
	全雌株	雌雄同株
植株丙×品系乙	15	16
植株丁×品系乙	?	?

①图2中转入的基因可随配子传递给子代，表达的CRISPR--cas9系统可在受精卵中发挥基因编辑作用。植株丙与品系乙杂交结果产生的原因是植株丙为转基因杂合子，减数分裂后产生____________。前一种配子参与形成受精卵后，导致细胞中___________，子代表现为雌雄同株。后一种配子参与形成受精卵后，细胞中__________，子代表现为全雌株。因此子代雌雄同株和全雌株的比例为1：1。
②植株丁与品系乙杂交结果为______________________，说明MYBI基因不是控制全雌株性状的基因。

【推荐2】科研人员以酵母菌为受体细胞，通过转基因技术研究水稻某种病毒的蛋白P与水稻蛋白的相互作用。
(1)实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸，培养时在培养基中需添加上述氨基酸，为酵母菌细胞内________上合成________提供原料。
(2)将蛋白P基因与质粒K（具有色氨酸合成基因及BD蛋白合成基因）连接，构建重组质粒K。将重组质粒K导入缺陷型酵母菌，用不含________的培养基筛选转化的酵母菌获得菌落，从这些菌落中可筛选得到基因成功________BD-P蛋白的酵母菌A。
(3)为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用，科研人员提取水稻细胞的mRNA，在________酶作用下获得cDNA，再与质粒T（具有亮氨酸合成基因及AD蛋白合成基因）连接形成重组质粒T，构建水稻cDNA文库。
(4)在酵母菌细胞内，组氨酸合成基因的转录受到调控，如下图所示。若被测的水稻蛋白能与病毒蛋白P发生相互作用，BD、AD两个蛋白充分接近时，_________才能催化组氨酸合成基因转录。

(5)将酵母菌A分别接种到不含组氨酸和不含亮氨酸的培养基中，以确定转入重组质粒K后酵母菌A________。取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到酵母菌A中，将转化产物接种在不含________的培养基中培养，获得了分散的多个单菌落。经检测这些酵母菌中含有4种水稻蛋白，表明这4种水稻蛋白能够________。
(6)研究发现，这4种水稻蛋白都是水稻不同代谢过程中的关键酶，推测该病毒引起水稻出现各种病症的原因之一可能是______。

【推荐3】回答下列问题：
I.将纯种黄身小鼠（A^vyA^vy）与纯种黑身小鼠（aa）杂交，子一代小鼠表现出介于黄色与黑色之间一系列不同毛色的过渡类型。请回答下列问题：
(1)正常情况下，子一代不同毛色小鼠的基因型是__________，之所以出现一系列介于黄色与黑色之间的过渡类型，是因为子代个体中的__________基因发生了甲基化修饰。
(2)子代小鼠甲基化程度越高，小鼠颜色___________，因为甲基化的作用是_________。
(3)上述这种遗传现象叫做__________。
Ⅱ.已知水稻中D基因与配子的育性有关，研究者用一定方法使D基因失活，失活后的基因记为d。现以野生型植株和D基因失活植株作为亲本进行杂交实验，统计母本的结实率（结实数/授粉的小花数×100%），结果如表所示。请回答下列问题：

杂交实验	亲本组合	结实率
①	♀DD×♂dd	10%
②	♀dd×♂DD	50%
③	♀DD×♂DD	50%

(4)若该实验中杂交实验①为正交实验，则__________为反交实验。由杂交实验结果可知，D基因失活会造成__________（填“雌”或“雄”）配子的育性大大降低。
(5)杂交实验②③的结实率均只有50%，其原因可能是____________。
(6)若让杂交实验①的子代与杂交实验②的子代杂交，则后代的结实率为___________，其中基因型为dd的个体所占的比例为____________。

【推荐2】亮氨酸脱氢酶是一类氧化还原酶，在临床生化诊断上有重要作用。有研究表明，在亮氨酸脱氢酶基因原有启动子(PHpaII)之后加上信号肽(引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的一段肽链)序列，可提高亮氨酸脱氢酶产量。科研人员进一步研究双启动子(PHpaII、PamyQ)及双启动子后再分别添加3种信号肽序列对亮氨酸脱氢酶产量的影响，主要实验流程如下图。请回答下列问题。

(1)启动子的功能是_____。组成信号肽的基本单位是_____。
(2)过程①中，PCR 反应体系中添加的dNTP的功能有_____，添加的一对引物是_____。
P1: 5'-GGGAATCATATGGGCGGCGTTCTGTTTCTG-3'
P2: 5'-CCGATTAAGCTTGGCGGCGTTCTGCATCTG-3'
P3: 5'-CGCGGATCCATAAGGCAGTAAAGAGGCTTTTG-3'
P4: 5'-GCCGGATCCACAAGGCAGTATTTACTGCCTT-3'
(3)过程②中的 DNA 连接酶催化相邻核苷酸之间的3′一羟基与5′一磷酸间形成__________________，PCR 循环中， TaqDNA 聚合酶的作用是催化_______________，进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中______的设定与扩增片段的长度有关。(填标号)
①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度 ④变性时间   ⑤退火时间   ⑥延伸时间
(4)过程②中，启动子 PamyQ能与质粒1连接的分子基础是_____。将重组质粒1导入枯草杆菌前先用Ca²⁺处理枯草杆菌， 其主要目的是_____。转化后的枯草杆菌一般要用稀释涂布平板法接种到添加_____的培养基上进行筛选。
(5)科研人员将质粒1、重组质粒1和3种重组质粒2分别导入枯草杆菌得到甲~戊5 种重组枯草杆菌，进行发酵后提取上清液中的亮氨酸脱氢酶，酶活力测定结果如下表。

重组菌	甲	乙	丙	丁	戊
酶活力/U·mL⁻¹	10.11	31.24	0.44	6.49	21.76

①结果表明，______最有利于提高亮氨酸脱氢酶产量。
②双启动子后添加信号肽序列影响酶的表达或分泌量的原因可能有_______。
a.信号肽序列影响了亮氨酸脱氢酶基因的表达
b.信号肽序列影响了启动子转录成相应的 mRNA 序列
c.信号肽序列表达产物使亮氨酸脱氢酶分泌路径发生改变