【推荐1】玉米是我国重要的粮食作物，研究其雄性不育性状对玉米育种有重要意义。
(1)已知玉米籽粒颜色由一对等位基因控制。紫色籽粒与黄色籽粒的玉米杂交，子代籽粒均为紫色，籽粒颜色中显性性状为______。在子代中获得一株表现为雄性不育的突变株。利用该突变株进行如图1所示杂交实验，结果说明控制花粉育性和籽粒颜色这两对基因的位置关系是_____。用杂交得到的雄性不育株建立品系甲。

(2)绒毡层是雄蕊花粉囊最内侧的细胞层。与花粉发育密切相关。已知M基因在绒毡层特异性表达，M蛋白依赖前端的信号序列S引导进入内质网中完成合成和加工。S序列被切除后M蛋白才能分泌到细胞外发挥作用。研究发现，品系甲的M基因发生突变。导致所表达蛋白的S序列最后一位氨基酸发生改变。对两种M蛋白进行研究，结果分别如图2、图3所示。

根据上述研究结果推测，导致品系甲雄性不育的原因是M基因突变______。
(3)研究发现，雄性不育玉米的花粉败育使更多物质被用于果穗生长，有利于提高产量。研究人员对品系甲（突变基因记为M⁺）进行改造，获得具有一对M⁺基因，且在M⁺基因所在染色体的非同源染色体上插入单个N片段的品系乙。N片段含3个紧密连锁不发生重组的序列：能持续抑制M⁺基因表达的序列、花粉特异表达的花粉败育基因和籽粒特异表达的红色荧光蛋白基因。根据图4流程继续进行育种。

种子A用于继续繁殖品系乙，种子B用于培育不含转基因成分的子代，这两种籽粒在果穗上的比例约为____，筛选出种子B的方法是_____。在生产种植上，与种子C相比，种植种子D不需要分别种植母本植株和父本植株，既操作方便，又可保证传粉效率，原因是_____。

【推荐1】随着全球转基因作物大规模种植和全球一体化下频繁的贸易流通，转基因监管的任务将越来越重。为了还给消费者知情权和选择权，多个国家和地区对转基因产品实行标识管理制度，这些法规实施的前提就是要建立稳定、准确的转基因检测技术。PCR转基因检测技术以其特异性强、快速和准确等优点被多国检测工作者使用，该技术通常包括核酸提取、核酸扩增、扩增产物检测3个步骤。某研究小组设计并完成了“转基因抗草甘膦大豆定性PCR检测”实验，请参与实验设计并回答相关问题（草甘膦为常用除草剂；转基因抗草甘膦大豆的外源基因构建图如图1所示）：

图1抗草甘膦外源基因结构图（CaMV35S为外源启动子、NOS为外源终止子）
(1)提取DNA：取待测大豆组织裂解破碎，进行DNA提取和纯化，得到待测大豆基因组DNA。该过程的常用的试剂有EDTA、SDS、NaCl、酒精等。在研磨液中加入NaCl的目的是________________；纯化DNA时可使用酒精，是因为________________。
(2)DNA扩增：
①在确定扩增对象后，从________________中获得待扩增基因序列，以此为依据可设计引物。该小组拟定的引物设计如表所示，其引物设计有一个是不科学的，请指出并说明原因________________。

基因	引物序列	产物片段大小	基因来源
Lectin	F-5' GCC CTC TAC TCC ACC CCC ATC C-3' R-5' GCC CAT CTG CAA GCC TTT TTG TG-3'	118	内源基因
CaMV35S	F-5' GGG ATT-3' R-5' AAT CCC-3'	195	外源基因
NOS	F-5' GAA TCC TGT TGC CGG TCT TG -3' R-5' TTA TCC TAG TTT GCG CGC TA -3'	180	外源基因
CP4-EPSPS	F-5' CTT CTG TGC TGT AGC CAC TGA TGC-3 R-5' CCA CTA TCC TTC GCA AGA CCC TTC C-3	320	外源基因

注：内源基因指大豆基因组内基因，外源基因指大豆基因组外基因。
②PCR扩增：在4个反应体系中分别加入________________（模板）、相应引物、________________酶、4种脱氧核苷酸等，并将PCR仪的温度设定为：变性94℃ 30s、复性58℃ 30s、延伸72℃ 40s，循环30次。“延伸”的温度设定为72℃，是因为该温度下________________。在设定的PCR体系下可以特异性扩增目标DNA片段，主要是因为________________具有特异性。
(3)扩增产物检测：可采用________________的方法。部分实验结果如图2、3所示。据图2初步判断，该大豆为________________（填“转基因”或“非转基因”）大豆。据图2、图3分析，其实验结果是________________（填“可信的”或“不可信的”）。

图2   NOS终止子PCR反应产物电泳分析

图3   内源基因lectin PCR反应产物电泳分析
注：M：标准参照物，1：阳性对照（基因标准品），2：阴性对照（普通大豆），3：核酸提取空白对照，4：待鉴定样本。

【推荐2】乙烯受体是乙烯感受和转导信号的初始元件，广泛存在于各种植物中，并决定植物各种组织对乙烯反应的敏感性。通过对多种植物研究表明，钝化植物对外源乙烯的敏感性比抑制内源乙烯的生物合成更为有效地延长植物的采后寿命。科学家从草莓中提取乙烯受体Ers1基因，通过基因工程将Ers1基因反向连接在启动子后，筛选转入反义Ersl基因的草莓，达到延长储藏期的效果。回答下列问题：
(1)草莓DNA的提取：取草莓植株叶片，置于预冷的研钵中，加入液氮研磨至粉碎后，加入400uLSDSDNA提取液继续研磨，提取液中含有________可防止DNA被水解。待充分研磨后收集至离心管中，离心后取①于另一干净离心管中，加入200uL异丙醇，离心10min之后弃去管中的②，加入80uL体积分数为70%的乙醇，离心5min之后取③保存。过程中的①、②、③分别是_________。（从“上清液”和“沉淀”中选取相应词语填写）
(2)通过上述方法获得DNA后，需要通过PCR技术进行扩增Ersl基因（如下图）。为使目的基因与质粒连接，在设计PCR引物扩增Ersl基因时需添加限制酶XhoI（识别序列为5'－CTCGAG－3'）的识别序列。已知Ersl基因左端①处的碱基序列为－TTCCAATTTTAA－，则其中一种引物设计的序列是5'_________3'。在PCR体系中，加入的dNTP可提供________。PCR产物通过电泳进行分离后，可割下_________回收扩增的Ersl基因。
   
(3)经XhoI酶切后的载体和Ers1基因进行连接（如图），连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、Ers1基因与载体正向连接、Ers1基因与载体反向连接。为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，请在下图中画出电泳结果，需标明电泳片段DNA大致长度__________。
   
(4)用________处理农杆菌使其变为感受态细胞，将筛选得到的反向连接质粒与感受态农杆菌混合，使重组质粒进入农杆菌，完成________实验。将农杆菌涂布接种于添加有卡那霉素的LB固体培养基上，目的是________。
(5)用阳性农杆菌感染植物细胞，目的基因就会随________整合到植物染色体DNA中，最后通过________技术培育出完整的转基因植株。为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、________及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。得到的转基因植株乙烯受体的合成受阻，其原因是________。