基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。如图为含有某目的基因的DNA片段、质粒上的酶切位点及限制酶识别切割位点，则据图分析，下列叙述正确的是（ ）
| A．质粒作为基因工程运载体，只需具备启动子、终止子、标记基因、复制原点即可 |
| B．不能用BclⅠ和BglⅡ切割质粒和含有目的基因的DNA片段，因为二者黏性末端相同 |
| C．限制酶切割部位与DNA连接酶作用的部位不完全相同 |
| D．构建基因表达载体时，目的基因必须接在启动子和终止子之间，以确保转录的正常进行 |
更新时间：2024-05-20 20:46:57
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解题方法
【推荐1】HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。鸡卵清蛋白是由输卵管上皮细胞中卵清蛋白基因特异性表达后分泌至输卵管内，参与构成鸡蛋清的蛋白质。下图是利用基因工程技术制备HA蛋白鸡输卵管生物反应器的过程。几种可供选择的限制酶识别序列如下，下列叙述错误的是（ ）
| A．①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶、4种游离的脱氧核苷酸等组分 |
| B．目的基因与鸡卵清蛋白基因启动子拼接前应先在目的基因两端分别引入HindIⅢ和EcoRI的识别序列 |
| C．②过程需使用的限制酶有HindⅢ、BamHI、EcoRI |
| D．使用鸡卵清蛋白基因启动子的目的是使目的基因在输卵管上皮细胞中特异性表达 |
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【推荐2】下列有关基因工程中限制性内切核酸酶的描述，正确的说法是（ ）
| A．限制性内切核酸酶能识别双链DNA和RNA分子的特定核苷酸序列 |
| B．限制性内切核酸酶可使氢键断裂 |
| C．限制性内切核酸酶只能从原核生物中提取 |
| D．限制性内切核酸酶可将DNA切割成黏性末端或者平末端 |
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名校
【推荐1】关于基因工程基本工具的描述，错误的是（ ）
| A．只有用相同的限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，才能形成重组质粒 |
| B．不同的核苷酸序列被不同的限制酶识别也有可能切出相同的黏性末端 |
| C．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率一般就越大 |
| D．限制酶、DNA连接酶都是工具酶 |
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名校
【推荐2】下图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒A。若已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与载体结合，并被导入受体细胞的结果是
| A．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细菌 |
| B．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能生长繁殖的细菌 |
| C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培养基上不能生长繁殖的细菌 |
| D．在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培养基上能生长繁殖的细菌 |
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名校
【推荐3】下表为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置(箭头所指)，下列叙述正确的是（ ）
限制酶种类 | 序列及切点 | 限制酶种类 | 序列及切点 |
①: EcoR I |
| ③: Bgl II |
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②: BamH I |
| ④: Not I |
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| A．①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端 |
| B．①切出的 DNA 片段，只有用 E.coli 连接酶才能连接起来 |
| C．②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割 |
| D．构建基因表达载体时，用②、③进行双酶切，可防止目的基因与载体的反向连接 |
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