为研究水稻D基因的功能，研究者将T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为d。现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验，统计母本植株的结实率，结果如下表所示。
（1）表中数据表明，D基因失活使________ 配子育性降低。为确定配子育性降低是由于D基因失活造成的，可将________ 作为目的基因，与载体连接后，导入到________ （填“野生”或“突变”）植株的幼芽经过________ 形成的愈伤组织中，最后观察转基因水稻配子育性是否得到恢复。
（2）用________ 观察并比较野生植株和突变植株的配子形成，发现D基因失活不影响二者的________ 分裂。
（3）进一步研究表明，配子育性降低是因为D基因失活直接导致配子本身受精能力下降。若让杂交①的F1给杂交②的F1授粉，预期结实率为________ ，所获得的F2植株的基因型及比例为________ 。
（4）为验证F2植株基因型及比例，研究者根据D基因、T-DNA的序列，设计了3种引物，如下图所示∶
随机选取F2植株若干，提取各植株的总DNA，分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR，检测是否扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR）。若________ ，则相应植株的基因型为Dd；同理可判断其他基因型，进而统计各基因型比例。
（5）研究表明D基因表达产物（D蛋白）含有WD40（氨基酸序列），而通常含有WD40的蛋白都定位在细胞核内。为探究D蛋白是否为核蛋白，研究者将D基因与黄色荧光蛋白基因融合；同时将已知的核蛋白基因与蓝色荧光蛋白基因融合。再将两种融合基因导入植物原生质体表达系统，如果________ ，则表明D蛋白是核蛋白。
| 杂交编号 | 亲本组合 | 结实数/授粉的小花数 | 结实率 |
| ① | ♀DD×♂dd | 16/158 | 10％ |
| ② | ♀dd×♂DD | 77/154 | 50％ |
| ③ | ♀DD×♂DD | 71/141 | 50％ |
（1）表中数据表明，D基因失活使
（2）用
（3）进一步研究表明，配子育性降低是因为D基因失活直接导致配子本身受精能力下降。若让杂交①的F1给杂交②的F1授粉，预期结实率为
（4）为验证F2植株基因型及比例，研究者根据D基因、T-DNA的序列，设计了3种引物，如下图所示∶
随机选取F2植株若干，提取各植株的总DNA，分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR，检测是否扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR）。若
（5）研究表明D基因表达产物（D蛋白）含有WD40（氨基酸序列），而通常含有WD40的蛋白都定位在细胞核内。为探究D蛋白是否为核蛋白，研究者将D基因与黄色荧光蛋白基因融合；同时将已知的核蛋白基因与蓝色荧光蛋白基因融合。再将两种融合基因导入植物原生质体表达系统，如果
更新时间：2016-11-26 09:52:23
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【推荐1】野生型果蝇为灰身、长翅。灰身基因（A）突变后出现黑身表型，长翅基因（B）突变后出现残翅表型。已知控制这两对性状的基因都位于常染色体上。用灰身长翅（P1）与黑身残翅（P2）两种果蝇进行的杂交实验结果如下：
(1)由P2的表现型可以推测其基因型是_______________ 。根据杂交实验一和杂交实验二的实验结果，请解释杂交实验二中子代出现相应表现型及比例的可能原因______________ 。
(2)根据这两对基因的DNA序列进行常规PCR检测，杂交实验一亲本、子代的检测结果见图1，由图1的检测结果可以推测：果蝇B基因内碱基对的增加导致B→b的突变。判断的依据是：________ 。
(3)对杂交实验二中的亲本、子代的基因组DNA进行检测，亲本及亲本型子代检测结果见图2．请将新组合表型果蝇的检测结果图绘在答题卡图中的横线上______ 。
(1)由P2的表现型可以推测其基因型是
(2)根据这两对基因的DNA序列进行常规PCR检测，杂交实验一亲本、子代的检测结果见图1，由图1的检测结果可以推测：果蝇B基因内碱基对的增加导致B→b的突变。判断的依据是：
(3)对杂交实验二中的亲本、子代的基因组DNA进行检测，亲本及亲本型子代检测结果见图2．请将新组合表型果蝇的检测结果图绘在答题卡图中的横线上
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【推荐2】某科研人员从北京野生型红眼果蝇中分离出紫眼突变体，并进行了以下实验：
实验①：紫眼雌果蝇×野生型雄果蝇→F1均为红眼→F2中红眼：紫眼=3：1
实验②：紫眼雄果蝇×野生型雌果蝇→F1均为红眼→F2中红眼：紫眼=3：1
（1）根据上述实验结果可以确定基因不位于__________ 和X、Y染色体非同源区段。因此，科研人员提出了控制果蝇眼色的基因位于X、Y染色体同源区段的假设（假设1），你认为果蝇眼色的遗传还可以提出哪一种假设（假设2）___________________ 。
（2）如果对F2的实验结果进一步分析，则支持假设1的实验结果应该是_______ 。
（3）经研究确定北京紫眼果蝇突变体的突变基因位于Ⅲ号染色体上，之前发现的来自日本京都果蝇中心的紫眼隐性突变体—Hnr3的突变基因也位于Ⅲ号染色体上，而且Hnr3突变体的其它基因均与野生型的相同。这两种突变体的产生是不同基因突变还是同一基因突变的结果？请设计实验进行研究（简要写出实验设计思路并预期实验结果及结论）。__________________
实验①：紫眼雌果蝇×野生型雄果蝇→F1均为红眼→F2中红眼：紫眼=3：1
实验②：紫眼雄果蝇×野生型雌果蝇→F1均为红眼→F2中红眼：紫眼=3：1
（1）根据上述实验结果可以确定基因不位于
（2）如果对F2的实验结果进一步分析，则支持假设1的实验结果应该是
（3）经研究确定北京紫眼果蝇突变体的突变基因位于Ⅲ号染色体上，之前发现的来自日本京都果蝇中心的紫眼隐性突变体—Hnr3的突变基因也位于Ⅲ号染色体上，而且Hnr3突变体的其它基因均与野生型的相同。这两种突变体的产生是不同基因突变还是同一基因突变的结果？请设计实验进行研究（简要写出实验设计思路并预期实验结果及结论）。
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【推荐3】某种植物的果皮有毛和无毛、果肉黄色和白色为两对相对性状，各由一对等位基因控制（前者用D、d表示，后者用F、f表示），且独立遗传。利用该种植物三种不同基因型的个体（有毛白肉A、无毛黄肉B、无毛黄肉C）进行杂交，实验结果如下：
回答下列问题：
（1）一个特定基因在染色体上的位置称为_____ ，B个体中控制果肉颜色的基因是_____ （填“纯合”或“杂合”）的。
（2）果皮有毛和无毛这对相对性状中的显性性状为_____ 。若要鉴定实验2子代个体的基因型，可选用表现型为_____ 的个体进行测交，其选择理由是_____ 。
（3）若将实验1的子代与实验2的子代进行随机交配，理论上，下一代个体中控制果肉颜色的基因型及比例为_____ 。
（4）实验1的子代个体基因型与实验3子代个体基因型相同的概率为_____ ，若实验3中的子代自交，理论上，下一代个体的表现型及比例为_____ 。
回答下列问题：
（1）一个特定基因在染色体上的位置称为
（2）果皮有毛和无毛这对相对性状中的显性性状为
（3）若将实验1的子代与实验2的子代进行随机交配，理论上，下一代个体中控制果肉颜色的基因型及比例为
（4）实验1的子代个体基因型与实验3子代个体基因型相同的概率为
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【推荐1】大豆是雌雄同花植物，科学家从大豆种群中分离得到一株雄性不育单基因突变体甲，为确定其遗传机制，进行了以下实验：
（1）雄性不育突变体甲的出现，可能是因为基因的碱基对发生了____ ，导致其基因结构发生了改变。
（2）让野生型大豆与该雄性不育突变体甲进行杂交，F1均为雄性可育，F1自交得F2,其中雄性可育：雄性不育=3:1,说明雄性不育属于____ 性状，该性状的遗传遵循____
（3）已知大豆M基因的隐性突变也会导致雄性不育（雄性不育突变体乙），科学家为确定两种突变体是否属于同一突变基因，做了以下实验：将雄性不育突变体乙与野生大豆杂交得到F1，再将F1与雄性不育突变体甲进行杂交，得到F2.
①若F2.____ ，则说明二者都属于M基因发生的突变。
②若F2____ ，则说明二者属于不同基因发生的突变。
（1）雄性不育突变体甲的出现，可能是因为基因的碱基对发生了
（2）让野生型大豆与该雄性不育突变体甲进行杂交，F1均为雄性可育，F1自交得F2,其中雄性可育：雄性不育=3:1,说明雄性不育属于
（3）已知大豆M基因的隐性突变也会导致雄性不育（雄性不育突变体乙），科学家为确定两种突变体是否属于同一突变基因，做了以下实验：将雄性不育突变体乙与野生大豆杂交得到F1，再将F1与雄性不育突变体甲进行杂交，得到F2.
①若F2.
②若F2
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【推荐2】某自花传粉植物的紫株和绿株由常染色体上一对等位基因(D/d)控制，育种工作者用紫外线照射某一纯合紫株后，再与绿株杂交，发现F1代有紫株679株，绿株1株（甲）。针对F1代产生绿株甲的原因，有人提出了两种假设。假设一：基因突变；假设二：含有基因D的片段缺失（注：一条染色体片段缺失不影响个体生存，两条同源染色体缺失相同片段的个体死亡）。回答下列问题：
(1)该植株颜色性状中，由显性基因D控制的是____ 。F1代紫株会产生两种基因型且比例相等的配子，原因是____ 。
(2)若假设一成立，则这种变异发生的时期最可能是____ 。若假假设成立，则可以通过显微镜观察绿株甲花粉母细胞的减数第一次分裂前期得到验证，原因是该时期会发生____ ，这种染色体行为便于将异常染色体与正常染色体进行比较。
(3)若要用杂交实验证明假设一和假设二谁成立，可将绿株甲与F1紫株杂交得到子二代，子二代的表现型及比例为____ 。再将子二代植株都进行自交，统计子三代的表现型及比例，若子三代____ ，则假设一成立；若子三代____ ，则假设二成立。
(1)该植株颜色性状中，由显性基因D控制的是
(2)若假设一成立，则这种变异发生的时期最可能是
(3)若要用杂交实验证明假设一和假设二谁成立，可将绿株甲与F1紫株杂交得到子二代，子二代的表现型及比例为
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【推荐3】为提供治疗乳腺癌的新思路，科研人员检测到乳腺癌细胞内蛋白A的表达量高于癌旁组织，为了探讨蛋白A与乳腺癌细胞增殖的关系，请根据以下提供的实验材料及结果完善实验思路并分析。
实验材料：体外培养乳腺癌细胞株MCF-7悬液、动物细胞培养液、浓度为50mmol/L的X溶液（用B液体配制）、B液体等。
（要求与说明：实验初始等量细胞悬液中细胞数量相等，细胞培养条件适宜，实验仪器，试剂、用具及操作不作要求）
请回答：
（1）实验思路：
①取培养瓶若干随机均分为6组，编号为A、B、C、D、E、F，并向每只培养瓶加入等量动物细胞培养液和MCF-7悬液。
②__________________________________________ 。
③对照组A加入______________ ，实验组B、C、D、E、F加入______________ 。
④在相同且适宜条件下培养一段时间后，______________ 。
⑤对所得实验数据进行分析与处理。
（2）分析与讨论：
本实验所得结果如图所示：
①据此结果推测：物质X与乳腺癌细胞增殖、蛋白A合成及腺嘌呤吸收量的关系为______________ 。
②基于以上实验及分析，请你提出一种治疗乳腺癌的新思路____________________________ 。
③癌细胞的增殖方式为______________ 。测定细胞数时，将细胞悬浮液加胰蛋白酶处理后，既可使用______________ 在显微镜高倍镜下镜检计数，也可利用______________ 测定癌细胞培养液的浑浊度。
实验材料：体外培养乳腺癌细胞株MCF-7悬液、动物细胞培养液、浓度为50mmol/L的X溶液（用B液体配制）、B液体等。
（要求与说明：实验初始等量细胞悬液中细胞数量相等，细胞培养条件适宜，实验仪器，试剂、用具及操作不作要求）
请回答：
（1）实验思路：
①取培养瓶若干随机均分为6组，编号为A、B、C、D、E、F，并向每只培养瓶加入等量动物细胞培养液和MCF-7悬液。
②
③对照组A加入
④在相同且适宜条件下培养一段时间后，
⑤对所得实验数据进行分析与处理。
（2）分析与讨论：
本实验所得结果如图所示：
①据此结果推测：物质X与乳腺癌细胞增殖、蛋白A合成及腺嘌呤吸收量的关系为
②基于以上实验及分析，请你提出一种治疗乳腺癌的新思路
③癌细胞的增殖方式为
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【推荐1】野生茄子具有耐盐基因StP5CS。研究人员扩增StP5CS 基因并双酶切该基因和改造后的中间载体pCAMBIA1301 ，经DNA 连接酶连接酶切产物，最终得到下图1所示的植物表达载体pCAMBIA1301—StP5CS。将该植物表达载体导入植物细胞进而获得了耐盐植株。回答下列问题：
(1)提取茄子幼嫩叶片的总RNA，在_____________ 的催化下合成cDNA，再通过PCR技术扩增StP5CS基因。PCR利用 ____________ 的原理。
(2)扩增StP5CS 基因的上游引物为 ZHPs: 5'-CACATTTCTGCTCCTACATT-3'，下游引物为ZHPa :5'-CTTCCTAAATACACAACTGGAT-3'， 两种引物中C+G 的比例保持一致主要是为了保证_____________ 。StP5CS基因PCR扩增的每次循环分为3步，在循环前常要进行一次94℃、5min预变性，其目的是 ______________ 。
(3)构建耐盐基因StP5CS 表达载体时，用限制酶BamH I和SmaI切割质粒pCAMBIA1301，15 min 后需将温度从36℃升高至65℃左右并保温20 min，目的是___________ ，从而终止酶切反应。mRNA合成方向是 
图2是StP5CS基因示意图，为使其能正确插入表达载体并成功表达，则图中P处的碱基序列应为 5'-______ -3'。
(4)若将该表达载体导入柑橘细胞中，常用_______________ 法，表达载体上的 Ori 可以保证其在柑橘细胞中能____________ 。
(1)提取茄子幼嫩叶片的总RNA，在
(2)扩增StP5CS 基因的上游引物为 ZHPs: 5'-CACATTTCTGCTCCTACATT-3'，下游引物为ZHPa :5'-CTTCCTAAATACACAACTGGAT-3'， 两种引物中C+G 的比例保持一致主要是为了保证
(3)构建耐盐基因StP5CS 表达载体时，用限制酶BamH I和SmaI切割质粒pCAMBIA1301，15 min 后需将温度从36℃升高至65℃左右并保温20 min，目的是
图2是StP5CS基因示意图，为使其能正确插入表达载体并成功表达，则图中P处的碱基序列应为 5'-(4)若将该表达载体导入柑橘细胞中，常用
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【推荐2】一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究,该菌株不能利用乳糖, 这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒,一种含有正常的乳糖操纵基因,另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶,获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌,并向其中加入高浓度的重组质粒,使细菌增殖。 再将实验组细菌(含重组质粒)和对照组细菌(不含重组质粒)放入下表所示环境中让其生长。请回答下列问题
（1）在基因工程的基本操作程序中,___ 是基因工程的核心。本实验中使用限制酶的作用是___ 。
（2）在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒,为了促进细菌更好的吸收重组质粒,还应用___ 处理细菌,使细菌处于___ 。
（3）若没有新的突变发生,细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落?___ 。
A．只有1、2号和4号 B．只有3、5号和6号
C．只有1、2、3号和4号 D．只有4、5号和6号
（4）如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在___ 号和___ 号平板上长出菌落。
（5）若该科学家用该培养基进行另一项实验见下表,在该培养基中用乳糖为唯一能源,则细菌能在哪一培养基中长出菌落?___ 。
A．只有10号 B．只有8号
C．7号和8号 D．8号和10号
| 葡萄糖培养基 | 葡萄糖和氨苄青霉素 | 葡萄糖、乳糖和氨苄青霉素 | |
| 含重组质粒的菌株 | 1号 | 2号 | 3号 |
| 不含重组质粒的菌株 | 4号 | 5号 | 6号 |
（1）在基因工程的基本操作程序中,
（2）在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒,为了促进细菌更好的吸收重组质粒,还应用
（3）若没有新的突变发生,细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落?
A．只有1、2号和4号 B．只有3、5号和6号
C．只有1、2、3号和4号 D．只有4、5号和6号
（4）如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在
（5）若该科学家用该培养基进行另一项实验见下表,在该培养基中用乳糖为唯一能源,则细菌能在哪一培养基中长出菌落?
| 乳糖培养基 | 乳糖和氨苄青霉素 | |
| 含重组质粒的菌株 | 7号 | 8号 |
| 不含重组质粒的菌株 | 9号 | 10号 |
A．只有10号 B．只有8号
C．7号和8号 D．8号和10号
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解题方法
【推荐3】组培再生体系是进行植物遗传转化、开展功能基因组学研究的前提条件，然而目前羊角蜜的组培再生及遗传转化体系仍不成熟。科研人员研究了外植体类型、激素浓度和农杆菌菌株等因素对其组培再生和遗传转化的影响。请回答下列问题：
(1)切取播种后2d子叶节（子叶节-2DAS），播种后5d子叶节（子叶节-5DAS）和下胚轴（下胚轴-5DAS），置于诱导培养基（MS+0.5mg·L-16-BA+1mg·L-1ABA+30g·L-1蔗糖+9g·L-1琼脂）进行愈伤和不定芽诱导，结果如图1、图2所示；并进行了不同浓度6-BA[0（L1）、0.25（L2）、0.375（L3）、0.5（L4）、1（L5）和2（L6），各组单位均为mg·L-1]对不定芽诱导效果的实验，结果如图3所示。____ ，因此可在诱导培养基上直接诱导发芽。根据图1、图2可得出的结论是____ 。图3结果____ （填“能”或“不能”）表明6-BA对诱导不定芽形成具有两重性。然后切取具有明显生长点的不定芽，置于生根培养基诱导生根，2周后观察并统计生根情况。生根培养基与发芽培养对比，主要的区别是____ 。
(2)通常用农杆菌转化法将外源基因导入到羊角蜜细胞中，以改造其遗传特性。农杆菌能将T质粒中的____ 片段转移并整合到羊角蜜细胞的染色体上。转化操作前，需要对野生农杆菌的Ti质粒进行T-DNA基因改造，改造后的质粒如图4所示，其中启动子来源于____ （填“农杆菌”或“羊角蜜细胞”）；标记基因1的作用是____ ；标记基因2的作用是____ 。据图可知，标记基因2与报告基因的模板链不在同一条DNA条链上，原因是____ 。利用报告基因（本研究用绿色荧光蛋白基因GFP基因）与目的基因相连形成融合基因，用于鉴定目的基因是否在角蜜细胞中表达。____ 以抑制农杆菌生长。而后将不含农杆菌的外植体组培至幼苗。统计荧光幼苗数与幼苗总数，并计算出侵染效率1；并利用PCR技术鉴定并统计含有CFP基因的幼苗数，并计算出侵染效率2。结果发现侵染效率2大于侵染效率1，推测可能原因是____ 。用PCR技术鉴定时，科研人员设计了正向引物（与模板链结合的引物）GFP-F和反向引物GFP-R进行基因鉴定，请在下图方框中标出两种引物在GFP基因上结合的位置____ 。____ 。
(1)切取播种后2d子叶节（子叶节-2DAS），播种后5d子叶节（子叶节-5DAS）和下胚轴（下胚轴-5DAS），置于诱导培养基（MS+0.5mg·L-16-BA+1mg·L-1ABA+30g·L-1蔗糖+9g·L-1琼脂）进行愈伤和不定芽诱导，结果如图1、图2所示；并进行了不同浓度6-BA[0（L1）、0.25（L2）、0.375（L3）、0.5（L4）、1（L5）和2（L6），各组单位均为mg·L-1]对不定芽诱导效果的实验，结果如图3所示。
(2)通常用农杆菌转化法将外源基因导入到羊角蜜细胞中，以改造其遗传特性。农杆菌能将T质粒中的
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