限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
⑴请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端____ 。
⑵请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端___ 。
⑶在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
______ 。因为:______________________________________ 。
⑴请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端
⑵请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端
⑶在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
更新时间:2016-12-12 19:16:30
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【推荐1】研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌,将其添加于饲料中,以提高家禽养殖效率。枯草芽孢杆菌能分泌一种可降解纤维素的酶,这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因,需使用图1中质粒为载体,图2为含W基因的DNA片段。
(1)采用_____________ 技术可以快速、大量获得W基因。利用该技术扩增目的基因时,需要____________ 等作为原料和直接能源物质。
(2)启动子是____________ 识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性,在图1质粒中插入W基因,其上游启动子应选择_____________ (填写字母)。
A.枯草芽孢杆菌启动子 B.乳酸杆菌启动子 C.农杆菌启动子
(3)根据图1和图2,应使用限制酶____________ 切割图2中含W基因的DNA片段,导入质粒以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后,使用含_____________ 的培养基筛选,以得到转入W基因的乳酸杆菌。
(4)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。表中的X应为____________ 。
(1)采用
(2)启动子是
A.枯草芽孢杆菌启动子 B.乳酸杆菌启动子 C.农杆菌启动子
(3)根据图1和图2,应使用限制酶
(4)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。表中的X应为
菌种 | 酶活性相对值 |
乳酸杆菌 | 未检出 |
X | 未检出 |
导入了重组质粒的乳酸杆菌 | 0.96 |
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【推荐2】胰岛素可用于治疗糖尿病,但胰岛素注射后易在皮下堆积,需较长时间才能进入血液,进入血液后又易被分解,因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程,回答下列问题:
(1)新的胰岛素生产过程属于____________ 工程,该工程的操作步骤为__________ (用图示序号表示)。
(2)获取新的胰岛素基因除图示方法外,还可以通过_________________ 获得;在体外利用PCR技术对人工合成的新的胰岛素基因进行扩增时,需向反应体系中加入Taq酶,该酶的作用是______ , 作用的温度范围为___________ ℃。
(3)在大肠杆菌细胞中合成的新的胰岛素,需通过生化制备与重折叠才具备预期的功能,原因是___________________________ 。
(1)新的胰岛素生产过程属于
(2)获取新的胰岛素基因除图示方法外,还可以通过
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【推荐3】烟草是种植广泛的经济作物,烟草易受烟草花叶病毒(TMV)感染而大幅度减产。绞股蓝细胞中含有抗TMV基因,能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草,操作流程如下图所示。请据图回答下列问题:
(1)过程①所用的RNA可以从______ 中获取,过程①称为______ 。
(2)过程②可以采用PCR技术获得大量目的基因,每次循环一般可以分为______ 三步。
(3)过程③需要用到的基本工具酶有______ 。
(4)受体细胞经过程④能发育成再生植株的原因是______ ,所用到的培养基除了加入卡那霉素之外,还需要加入的关键激素有______ 。
(5)过程⑤需要进行个体生物学水平的鉴定。可通过______ 确定TMV基因是否赋予了烟草抗TMV特性以及抗性的程度。
(1)过程①所用的RNA可以从
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【推荐1】请回答下列问题:
(1)基因工程的核心是_____________ 。目的基因可以来自基因文库,基因文库是导入了某种生物DNA片段或cDNA片段的___________ 。
(2)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞。进行细胞培养时,必须首先用________________ 处理内细胞团,使之分散成单个细胞。
(3)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,二者除了都需要增殖外,植物细胞不同于动物细胞的是还要进行____________________ 。
(4)为制备单克隆抗体,需将特定抗原注射到小鼠体内,以此获取________ 细胞,与________ 细胞融合形成杂交细胞。
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【推荐2】现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题。
(1)利用基因工程技术实现胰岛素的批量生产是目前糖尿病治疗的新思路,该过程中的关键操作环节是_______ ,该环节目的是使胰岛素基因_______ ,同时,使其能够表达和发挥作用。
(2)单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的_______ 与骨髓瘤细胞进行融合,再用特定的_______ 培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞后,还需进行______ 培养和抗体检测,经过多次筛选,就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是______ 。
(3)与传统的工程相比较,生态工程是一类______ 的工程体系。在矿区废弃地生态系统恢复过程中,人们可以利用植物修复技术治理重金属污染土壤,引进植物时需考虑的因素有_______ (回答2点即可)。
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【推荐3】基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,属于基因重组。基因工程是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内表达的操作。运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及禽、畜等的新品种,还可以培养出具有特殊用途的动、植物。回答下列问题:
(1)在基因工程中,获取目的基因可以通过人工合成,也可以从基因文库中获取。基因文库包含基因组文库和cDNA文库,构建cDNA文库的操作步骤:从特定细胞中提取mRNA为模板,在___ 酶的催化下获得cDNA,然后利用___ 技术对cDNA文库进行扩增。
(2)基因工程最核心的步骤为构建基因表达载体,表达载体必须含有的结构有___ 。
(3)将构建的基因表达载体导入宿主细胞,当宿主细胞为植物细胞时最常用的方法是___ ,该方法使用的载体为___ 。
(4)将外源生长激素基因导入某种动物的受精卵中,为了检测该基因是否在生物体内表达,在分子水平上,可采用的方法是___ ;在个体水平上,可以采用的鉴定方法是___ 。
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