【推荐1】研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒。回答下列问题：

(1)已知DNA复制子链的延伸方向是5'→3'，图1中A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增LTP1基因，应该选用_____________作为引物。为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的_____________位点。设计引物时需要避免引物之间形成_____________，而造成引物自连。
(2)图2中的B为质粒，是一种独立于大肠杆菌拟核DNA之外的具有_____________能力的很小的_____________。图2中的C除了含标记基因之外，在LTP1基因的上游必须具有_____________。
(3)分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有图2中C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是_____________。
(4)可采用分子杂交技术检测LTP1基因是否转录，需要从转基因啤酒酵母中提取_____________，用_____________作探针与之杂交。

【推荐2】COR基因是植物的抗寒基因。CBF基因控制合成的转录因子CBF能特异性结合COR基因启动子区，激活COR基因的表达。将不同植物中获取的CBF基因和COR基因组合起来构建抗寒基因超量表达载体，转入植物体内能提高植物的抗寒性。回答下列问题：
(1)为扩增CBF基因，应选择图甲中的引物______，经过四次循环形成的产物中同时含有所需引物的DNA占______。

(2)COR基因超量表达依赖于适宜的启动子。启动子有三种：各种器官中均起作用的启动子、特定器官中起作用的启动子、特定条件诱导的启动子。多种类型启动子可组合使用。从减少物质和能量消耗的角度出发，最好选择______的启动子，使马铃薯块茎在寒冷刺激下才启动COR基因的表达。转录因子CBF特异性识别下游靶基因启动子区后，可能与______酶结合形成复合体从而激活COR基因的表达。
(3)当遇到平末端和黏性末端不能连接时，可利用限制酶Klenow酶特有的5′→3′DNA聚合酶活性，将黏性末端补平后再与平末端连接。根据图乙分析，构建抗寒基因超量表达载体时，为实现经XbaⅠ切割后的CBF基因与COR基因表达载体的连接，应选用的限制酶是______。
(4)已知A基因表达产物能参与核孔复合体的形成影响RNA运出核，在植物抗寒过程中发挥重要的作用。科学家从抗寒转基因植物中筛选到一个A基因突变的植株（a突变体）。研究发现，a突变体中CBF基因的表达水平降低。由此推断a突变体抗寒能力______（填“提高”或“减弱”），其机理是______。

【推荐1】大豆富含蛋白质等营养物质，真菌性病害严重影响大豆产量和品质，科研人员将几丁质酶基因导入大豆细胞，培育抗病新品种。图1为所用载体及限制酶切位点示意图，图2为PCR扩增几丁质酶基因的某个环节，表为各限制酶的识别序列及切割位点。回答下列相关问题。

名称	识别序列及切割位点	名称	识别序列及切割位点
HindⅢ	5'-A↓AGCTT-3' 3'-TTCGA↑A-5'	EcoRI	5'-G↓AATTC-3' 3'-CTTA↑G-5'
BglⅡ	5-A↓GATCT-3' 3'-TCTAG↑A-5'	PstI	5'-GA↓CGTC-3' 3'-CTGC↑AG-5'
KpnI	5'-G↓GTACC-3' 3'-CCATG↑G-5'	BamHI	5'-G↓GATCC-3' 3'-CCTAG↑G-5'

(1)获得几丁质酶基因，可以从苏云金芽孢杆菌中提取的mRNA，通过___________过程获得该基因，再通过PCR技术扩增，扩增的过程中，变性的目的是___________。若扩增了五轮，则消耗了___________个引物。得到的PCR产物通常用___________法鉴定。
(2)基因转录时，为保证几丁质酶基因能用β链充当转录模板，设计引物时应在图2引物Ⅰ的5'端添加3'___________5'，序列，经PCR扩增后，获得足量目的基因片段，再用___________两种限制酶分别切割质粒和几丁质酶基因两端，选择两种限制酶切割的目的是___________。

【推荐2】利用木聚糖酶进行纸浆漂白，可以大幅度减少氯化物的用量，减轻造纸工业对环境的污染。纸浆漂白需要在高温碱性条件下进行，因此需要耐热耐碱的木聚糖酶.根据生产需要，科学家对已知氨基酸序列的木聚糖酶进行改造，获得了耐高温耐碱的新木聚糖醇，减少了纸浆漂白时木聚糖酶的用量，提高了生产效率。回答下对列问题：
(1)蛋白质工程的目标是恨据人们对______________的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造。与蛋白质工程相比，基因工程原则上只能生产_____________.它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
(2)在蛋白质工程和基因工程中常用大肠杆菌作为受体细胞，原因是大肠杆菌___________________________(答出两点)。分离纯化大肠杆菌时，可使用接种用___________法将聚集的菌种逐步分离并培养成单菌落；实验室中利用选择培养基筛选微生物的原理是_______________________________________。
(3)人工合成的新木聚糖酶的基因在导入受体细胞前要先构建___________________，以使目的基因能够表达和发挥作用。若要将重组大肠杆菌分泌的耐热耐碱木聚糖酶应用于造纸工业生产，除了需要研究木聚糖酶的产量外，还需要检测木聚糖酶的__________________________。
(4)根据新木聚糖酶的氨基酸序列设计新木聚糖酶的基因，会设计出多种脱氧核苷酸疗列，原因是________________________。

【推荐3】转运肽能够引导在细胞质中合成的蛋白质进入叶绿体，组装成叶绿体的完整结构，从而使植物能够顺利地进行光合作用。研究人员尝试将抗除草剂基因（抗草丁膦基因）和转运肽基因同时导入大豆细胞并获得高产量的抗除草剂转基因大豆作物。已知T－DNA上的基因在农杆菌中不能表达，而在植物细胞中能表达。回答下列问题：
   
(1)从抗除草剂大豆叶片中提取抗草丁膦基因的DNA过程中，加入预冷的酒精（体积分数______）的目的是________________________。
(2)根据图1，应选用______酶和______酶对转运肽基因进行酶切，酶切后插入Ti质粒的T－DNA区，T－DNA的作用是________________________，两种限制酶切割转运肽基因的目的是防止发生自身环化，保证转运肽基因和Ti质粒正确连接。
(3)据图2分析，将重组后的Ti质粒导入农杆菌中，成功转化的农杆菌能在含有______的培养基中生长增殖。欲从个体水平上检测转基因大豆是否获得抗除草剂抗性，可采取的措施是_______。

【推荐1】请回答与基因工程和植物组织培养有关的问题：
（1）天然农杆菌的Ti质粒上存在着T-DNA，该片段可转移并整合到____________。设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中至少要有2种可表达的基因，分别是______________。
（2）将重组Ti质粒导入植物受体细胞常采用的方法是______________。由于重组质粒成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行_______________操作。若要检测获得的植物细胞中染色体上是否含有目的基因，则可采用______________技术。
（3）利用茎段经丛状苗到生根的途径如下：

①愈伤组织具有______________的优点，适于诱变育种的取材，能提高突变频率。
②过程b和c分别表示_______________，过程c的实质是______________；配制丛状苗生根培养基时，可适当增加__________________（填“生长素”或“细胞分裂素”）的含量，以促进丛状苗生根。

【推荐2】如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题：

(1)克隆动物培养过程与图示繁殖过程相比特有的技术手段是_____技术，这两种繁殖动物的方式相比，实质性的区别为前者是_____，后者是_____。
(2)如果培养转基因荷斯坦奶牛，可采用_____技术将药用蛋白基因导入到_____中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是_____技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。
(3)上述技术应用于人类所得到的婴儿通常叫_____，在生育方面有什么积极意义？_____。
(4)“试管婴儿”技术诞生后，继而出现了“设计试管婴儿”技术，二者在对人类作用上的区别是_____，在技术手段上的区别是_____，现在大多数人反对设计婴儿性别，其原因是_____。

【推荐3】基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，回答下列问题：

（1）①②过程采用最多的是农杆菌转化法，该方法利用了农杆菌中____________上的T-DNA，T-DNA的特性是________________________。检测目的基因是否成功导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用____________作探针。
（2）在植物组织培养技术中，过程③和过程④分别是____________。这两个过程需在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加的植物激素是________________________。
（3）若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体，细胞间杂交一般采用____________作为诱导剂诱导细胞融合，与传统的有性杂交相比，其优势是________________________。