某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员利用以下两种方法获得了能高效降解化合物A的细菌。
(1)培养基中加入化合物A的目的是__________________ 。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________ 。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是_________________ 。
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是________________________ 。
(4)转为固体培养时,常采用_____________ 的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)若研究“目的菌”的群体生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用显微直接计数法进行计数。若以一个大方格(体积为0.4mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为_________________ 个/mL。
(1)在利用PCR扩增该酶的基因时,在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸,从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量,请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于______________________ 。
(2)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为_____________ 。
Ⅰ 方法一:研究人员利用有机化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示,请分析回答:
(1)培养基中加入化合物A的目的是
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是
(4)转为固体培养时,常采用
(5)若研究“目的菌”的群体生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用显微直接计数法进行计数。若以一个大方格(体积为0.4mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为
Ⅱ 方法二:研究人员通过化学方法合成了高效降解化合物A的某种酶的基因,利用PCR扩增后,采用一定方法导入细菌细胞中,经筛选、培养获得高效降解化合物A的细菌。请分析回答:
(1)在利用PCR扩增该酶的基因时,在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸,从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量,请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于
(2)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为
更新时间:2017-04-17 09:34:59
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【推荐1】【生物——选修模块1:生物技术实践专题】发酵法生产酒精后的废液(pH 4.3)含有大量有机物,可用于培养、获得白地霉菌体,生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图:
请据图分析回答问题:
实验过程中培养白地霉的培养基是 1 。培养基定量分装前,先调节 2 ,分装后用棉塞封瓶口,最后 3 处理。图中①过程称为 5 ,从甲到乙的培养过程是为了 6 。白地霉的代谢类型为 7 。为确定菌体产量,图中②操作之前,应先称量 9 的质量。过滤后需反复烘干称量,直至 10 。所获菌体干重等于 11 。
请据图分析回答问题:
实验过程中培养白地霉的培养基是
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【推荐2】手机现在已经成为人们离不开的通讯和娱乐工具,但手机表面分布较多的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物,可能导致人患肠胃炎等疾病。甲乙同学对正常使用的手机屏幕上的细菌进行初步培养和数量测定,部分操作过程见下图。回答下列相关问题:________ 。除此之外,培养基还需要满足微生物生长对________ 以及氧气的需求。为便于观察菌落,常在培养基中加入________ ,还需采用________ 法对培养基进行灭菌。
(2)甲、乙两位同学手机屏幕上的细菌进行初步培养和数量测定得到以下结果:
甲涂布了1个平板,统计的菌落数是230。
乙涂布了3个平板,统计的菌落数分别是28、214和256,取平均值166。
请你评价甲乙两位同学的实验结果是否合理,若不合理请分析原因并写出改进措施。
①甲同学________ 。
②乙同学________ 。
(3)为了减少手机上微生物的种类和数量,我们需对手机进行消毒,常用方法是______ 。
(1)培养基中含有的主要营养物质有
(2)甲、乙两位同学手机屏幕上的细菌进行初步培养和数量测定得到以下结果:
甲涂布了1个平板,统计的菌落数是230。
乙涂布了3个平板,统计的菌落数分别是28、214和256,取平均值166。
请你评价甲乙两位同学的实验结果是否合理,若不合理请分析原因并写出改进措施。
①甲同学
②乙同学
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【推荐3】如图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题:
(1)土壤中存在能分解尿素的细菌,这些细菌之所以能将尿素分解,是因为能合成_____ 。因此,图中选择培养基应以_____ 为唯一氮源。鉴别培养基还需添加_____ 作指示剂。
(2)若要从土壤中分离大肠杆菌,培养基中应加入牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和琼脂,其中作为碳源的是_____ ;鉴别培养基中也需添加某些特定物质,根据培养基菌落的颜色变化来判断是否分离得到大肠杆菌,请简述鉴别大肠杆菌的方法:_____ 。
(3)土霉素是一种可以治疗人类感染性疾病的抗生素类药物,可从土壤中放线菌的发酵产物中提取,但土壤中放线菌数目较少,可在逐级稀释前使用_____ (从培养基的物理状态和功能分析)培养基进行选择培养,以增加目的菌的数目。分析可知,土霉素易溶于有机溶剂,且是非挥发性物质,故可使用萃取法从放线菌中提取。萃取得到的样品可用纸层析法进行鉴定,用显色剂显色后结果如下图所示,A、D点样时,点是_____ 。
(1)土壤中存在能分解尿素的细菌,这些细菌之所以能将尿素分解,是因为能合成
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【推荐1】干扰素是人体细胞产生的一种免疫活性物质,具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性。某研究小组欲通过基因工程,以酵母菌和CHO细胞系(由中国仓鼠的卵巢细胞转化而来)作为受体细胞分别生产人干扰素,并比较两种表达系统生产的产物特点,回答下列问题。
(1)酵母菌培养基的制备:酵母菌是一种真菌,培养基一般采用马铃薯蔗糖培养基,其中蔗糖的作用是____ 。将培养基放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌,在____ 条件下,灭菌20分钟。
(2)酵母菌的诱变和筛选:将酵母菌种进行紫外线的诱变后,用移液管取____ 的酵母菌液0.1mL加到固体培养基上进行涂布,为了使涂布均匀,通常进行的操作是____ 。
(3)制备CHO细胞系:经过多次____ 培养后获得,由于这种细胞系仍保留____ 的特性,依然存在细胞的增殖随细胞密度增加而逐渐停止的现象。
(4)转基因操作过程:
①目的基因常用PCR扩增大量获取,扩增时若扩增缓冲液中的Mg2+浓度过低,造成的结果是____ 。
②构建重组DNA时,通常选择改造的质粒作为载体,经过酶切处理的干扰素基因与质粒在DNA连接酶作用下形成重组DNA,为了提高获得重组DNA的效率,下列需要考虑的因素有____ 。
A.适宜的外界条件
B.目的基因和质粒的浓度
C.DNA连接酶活性
D.质粒的纯度
③将重组DNA通过____ 法导入酵母菌和CHO细胞中,筛选后进行____ 培养获取目标产物。
(5)两者相比较,CHO表达系统有很多优点:第一,具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面更接近于天然蛋白分子;第二,具有重组基因的高效复制和表达能力,从而能获得较多数量的____ 和大量目标蛋白产物;第三,CHO细胞属于改造的成纤维细胞,很少产生自身蛋白质,利于目标蛋白的____ 。
(1)酵母菌培养基的制备:酵母菌是一种真菌,培养基一般采用马铃薯蔗糖培养基,其中蔗糖的作用是
(2)酵母菌的诱变和筛选:将酵母菌种进行紫外线的诱变后,用移液管取
(3)制备CHO细胞系:经过多次
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①目的基因常用PCR扩增大量获取,扩增时若扩增缓冲液中的Mg2+浓度过低,造成的结果是
②构建重组DNA时,通常选择改造的质粒作为载体,经过酶切处理的干扰素基因与质粒在DNA连接酶作用下形成重组DNA,为了提高获得重组DNA的效率,下列需要考虑的因素有
A.适宜的外界条件
B.目的基因和质粒的浓度
C.DNA连接酶活性
D.质粒的纯度
③将重组DNA通过
(5)两者相比较,CHO表达系统有很多优点:第一,具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面更接近于天然蛋白分子;第二,具有重组基因的高效复制和表达能力,从而能获得较多数量的
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【推荐2】回答下列与PCR相关的问题。
(1)PCR是_______ 的缩写,是在体外大量合成DNA的技术。
(2)PCR过程中,用_______ 代替了解旋酶的作用,使DNA的双链解开。目前在PCR反应中使用TaqDNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_______ 。TaqDNA聚合酶能够从引物的_______ (填“5'”或“3'”)端开始连接脱氧核苷酸。
(3)PCR每次循环一般可以分为变性、复性和_______ 三步。复性的结果是_______ 。
(4)在PCR扩增目的基因的过程中,加入诱变剂可提高目的基因的突变率。与用诱变剂直接处理细胞相比,上述育种技术获得突变目的基因的效率更高,原因是在PCR过程中_______(多选)。
(1)PCR是
(2)PCR过程中,用
(3)PCR每次循环一般可以分为变性、复性和
(4)在PCR扩增目的基因的过程中,加入诱变剂可提高目的基因的突变率。与用诱变剂直接处理细胞相比,上述育种技术获得突变目的基因的效率更高,原因是在PCR过程中_______(多选)。
A.仅针对目的基因进行诱变 |
B.目的基因产生了定向突变 |
C.目的基因可快速累积突变 |
D.目的基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 |
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【推荐3】径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草的液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHN2基因)转移到棉花细胞内,获得了转基因耐盐棉花新品种。图甲表示三种限制酶Sau3A 1、EooRI、BamHI在含有目的基因的DNA片段上的切割位点的位置关系;图乙是这三种限制酶的识别序列与切割位点示意图;图丙是土壤农杆菌中T质粒的结构示意图。请分析回答问题:
(1)图甲中的目的基因实际上指的就是_____ ,实验室通常采用_____ 技术对目的基因进行扩增,该技术与细胞内DNA复制相比,所用到的酶具有的特性是_____ (答出1点即可)。
(2)在切割目的基因和构建基因表达载体的过程中有以下两种选择方案,回答相关问题:
方案一:若用BamHI切剂图甲所示的DNA片段获得目的基因,则需选用Sau3AI切割图丙所示的质粒,原因是_____ 。
方案二:若用BamHI和EoRI切割图甲所示的DNA片段获得目的基因,则需选用EcoRI和Sau3AI切制图丙所示的质粒才能形成重组质粒,与方案一相比,方案二的优势是_____ 。
(1)图甲中的目的基因实际上指的就是
(2)在切割目的基因和构建基因表达载体的过程中有以下两种选择方案,回答相关问题:
方案一:若用BamHI切剂图甲所示的DNA片段获得目的基因,则需选用Sau3AI切割图丙所示的质粒,原因是
方案二:若用BamHI和EoRI切割图甲所示的DNA片段获得目的基因,则需选用EcoRI和Sau3AI切制图丙所示的质粒才能形成重组质粒,与方案一相比,方案二的优势是
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