【推荐1】ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。

(1)实验中需注意无菌操作，下列需要灭菌处理的是____________。

A．土样

B．甲培养基

C．接种环

D．涂布器

(2)图中第I步最常用的接种方法是____________。甲培养基能提供目的菌所需的全部营养，其中包括水、碳源、氮源和_________等营养物质。
(3)通过步骤II能筛选出产ε-PL的菌种，因此，乙培养基属于_______培养基，在进行第Ⅲ步接种时，应挑选_______（①/②/③）号菌落。步骤IV的目的是_________________。
(4)为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度，结果见下表。注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。

清晰区宽度/mm		ε-PL浓度/
		20	30	40	50	60	70
微生物	大肠杆菌	+	+	7．2	10．8	11．6	13．3
	沙门氏菌	+	+	6．5	9．2	10．9	13．0
	酿酒酵母	7．2	9．1	12．6	13．4	14．8	-
	红曲霉	+	+	+	+	+	6．3

结果显示ε-PL对______________的抑制作用最强，且ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度______________（正相关/负相关）。为使结果更具说服力，还应增加___________实验。

【推荐2】下表是某研究小组配制的适合尿素分解菌生长的培养基,请回答下列问题:

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	蒸馏水
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15g	1000mL

(1)上述培养基的成分中，为尿素分解菌提供碳源的是____，提供氮源的是____。该培养基从物理状态上看，属于____培养基；从功能上看，属于____培养基。 
(2)当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落。此菌落来源于____________,此时______较能准确地反映样品中的活菌数。 
(3)培养过程中，常选择菌落数在______区间的平板统计计数。统计的菌落数往往比活菌的真实数目低，原因是__________________________。 
(4)尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，原因是_______________________。 
(5)初步筛选出的产脲酶细菌，在培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，其原理是_______________________________________。

【推荐3】孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。

(1)培养基的配制：MG降解菌富集培养基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加________作为唯一碳源。培养基配制好后，需用____________________法进行无菌处理才能后续使用。
(2)MG高效降解菌株的富集：如图所示，将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中，将三角瓶置于30℃、180r/min摇床中振荡培养1-2天，此操作的目的是________________，直至培养液变浑浊后，换瓶重复操作2-3次，以达到富集的目的。
(3)MG高效降解菌株的分离和纯化：图中所示的分离纯化细菌的方法是________________，该方法统计结果往往比实际值偏小的原因是______________________。实验中初步估测A中细菌细胞数为1.5×10⁹个/mL，若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且每个平板上长出的菌落数约为150个，则应将A中的菌液稀释__________倍。
(4)MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，根据培养基是否出现__________________，就可以鉴别出目的菌株，原因是____________。
(5)MG高效降解菌株的保存：获得纯净的菌种后，需要进行菌种的保藏。若需长期保存，可以采用______________的方法。

【推荐1】[生物——选修1：生物技术实践]
根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。
（1）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有___________________ 、________和高压蒸汽灭菌。
（2）锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。
（4）平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：

①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免   ____________。
②划线时最后一区不要与第一区___________
③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。
（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用________法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察细菌的计数。
（6）统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为_____________。

【推荐2】为了获得茁鄄胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：

(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_____；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该_____。
(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是_____。
(3)上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是_____。（填序号）
①安全阀、放气阀、压力表
②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表
④放气阀、安全阀、温度表
(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在 3 块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是_____。
(5)为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是_____；研磨时_____（填“需要”或“不需要”）添加CaCO₃，理由是_____。

【推荐3】牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基。
多次筛选
   
(注：①②③表示相应操作)
请分析回答下列问题：
(1)从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应有___________成分，将瘤胃液先接种到培养基甲中进行培养，其目的是___________。
(2)过程②所使用的接种方法是___________；科研人员先用0.85%NaCl溶液进行系列稀释而不用无菌水，原因是___________。在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是___________。
(3)刚果红是一种染料，可与纤维素等多糖形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。将刚果红加入培养基乙中，得到4个产透明圈的菌株，测量菌落直径和透明圈的直径，结果如表所示。其中降解纤维素能力最强的是___________(填菌株编号)。

菌株编号	菌株直径r(cm)	透明圈直径R(cm)
1	0.3	0.9
2	0.4	0.6
3	0.3	1.3
4	0.6	1.9

(4)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁴的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179.则每毫升样品中含有细菌数量为___________个。

【推荐1】我省属黄土高原半干旱地区，向土壤中添加玉米秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。某大学某研究小组欲筛选玉米秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌（能够独立进行固氮的细菌），组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下面为本实验两种相关培养基配方，请回答：
培养基1：CMC - Na、NaCl、KH₂ PO₄，MgSO₄·7H₂O、蛋白胨、琼脂、蒸馏水
培养基2：KH₂ PO₄，NaCl、MgSO₄·7H₂O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水
（1）培养基1中主要碳源是______ 。两种培养基中，培养基2能用于筛选自生固氮菌因为___________。
（2）欲用培养基1筛选出纤维素分解菌，培养基1中还需要加___________，在筛选出纤维素分解菌（命名为X）后，需进行玉米秸秆降解能力检测，一般采用对___________进行定量的测定。
（3）分离纯化得到自生固氮菌（命名为N）并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可用活菌计数法或_____， 后者计数方法的测量值一般比活菌的实际数目___________。
（4）无菌操作在相关培养基上均匀涂布N（或X），晾干后在其表面接种X（或N），适宜条件下培养一段时间后，若X（或N）周围______（填“有”或“无"）抑菌圈（细菌生长受到抑制形成的透明圈）出现，则两种微生物适合联合施用，原因是___________。

【推荐2】番茄红素是一种类胡萝卜素，具有很强抗氧化能力，在生活和生产中具有重要的应用价值。作为一种天然色素，它主要存在于茄科植物番茄(西红柿）的成熟果实中。人们可从番茄果实或能够产生番茄红素的微生物体中提取番茄红素。请据相关知识回答下列问题：
（1）从番茄中提取番茄红素常用_________法，提取的效率主要取决于提取液的性质和__________；提取过程应采用________加热，以防止有机溶剂燃烧、爆炸；在加热瓶口还要安装__________装置，防止加热时有机溶剂挥发。
（2）测定培养液中微生物的数目，可采用____________法对培养液中的微生物直接计数，也可用______法将微生物接种于灭菌后的固体培养基上，培养一段时间后通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目；第一种方法统计的数目比实际活菌数目_________(填“高”或“低”），第二种方法统计的数目比实际活菌数目_____________(填“高”或“低”），试分析出现这两种情况的原因:______________。

【推荐3】聚乙烯（PE）由乙烯（CH₂=CH₂）聚合而成，是农用地膜的主要成分，因其难以被降解，废弃物常造成“白色污染”。下图为研究人员筛选PE降解菌的实验流程图。

回答下列问题。
（1）为保证土样中含有PE 降解菌，最好到_______（填有或无）农用地膜覆盖的农田中取样，原因是________。
（2）土样中的 PE 降解菌主要是_____（填“好氧菌”或“厌氧菌”）
（3）振荡培养7天后，可见A组培养液明显浑浊，B组培养液未出现浑浊，原因是___
（4）用平板划线法接种后培养的目的是________。
（5）研究发现在培养筛选得到 PE 降解菌的液体培养基中，含有降解聚乙烯的两种关键酶。可用凝胶色谱法分离这两种酶，凝胶色谱法是根据_____________分离蛋白质的有效方法。分离得到的酶一般可通过________法固定，从而实现重复利用。