噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,最终使抗体以复合蛋白质的形式表达于噬菌体的表面,形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库,请回答下列问题:
(1)人体内的抗体在合成后,以____________ 的方式分泌到内环境中。
(2)若要获取人的抗体基因,可以从细胞中提取相应的RNA,通过逆转录过程获取_______ 片段,再合成目的基因,采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要______ 。
(3)构建重组DNA分子的目的是_________ 。在噬菌体抗体库的构建过程中,_________ (需要/不需要)利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞,理由是_________________ 。
(4)检测大肠杆菌是否转录出相应RNA时应先从原核细胞中提取其RNA,再以__________ 为探针,与RNA杂交,该技术的原理是______________ 。
(1)人体内的抗体在合成后,以
(2)若要获取人的抗体基因,可以从细胞中提取相应的RNA,通过逆转录过程获取
(3)构建重组DNA分子的目的是
(4)检测大肠杆菌是否转录出相应RNA时应先从原核细胞中提取其RNA,再以
更新时间:2017-11-02 09:53:42
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【知识点】 基因工程的基本操作程序
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【推荐1】干扰素能抑制病毒的复制,可增强巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用。下图是利用基因工程技术生产干扰素的操作过程示意图,请据图回答。
(1)图中①代表的是___________ 过程,所获得的甲是______________________ 。
(2)在生物体外,重复②③④的步骤,可以获得大量的甲,这是___________ 技术。其中过程③需要___________ 酶。
(3)与人体细胞中干扰素基因相比,甲不含有非编码区和___________ 。
(4)在利用甲、乙获得丙的过程中,必须用同一种___________ 切割甲和乙,使它们产生相同的___________ ,再加入___________ ,连接形成丙。
(5)科学家将甲与___________ 的启动子等调控组件重组在一起形成的基因表达载体,通过___________ 方法,导入到哺乳动物的___________ 中,进行早期胚胎培养,当胚胎发育到___________ 阶段时进行胚胎移植;同时代孕母体对移入子宫的胚胎基本上不发生___________ ,才为移入的胚胎在代孕母体内的成活提供了可能,使其生长发育成转基因动物。该动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁中获得___________ 。
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解题方法
【推荐2】玉米的甜度受到很多消费者的青睐,基因S与作物甜度相关,可将S基因导入到玉米细胞中,培育转基因玉米新品系。下图是S基因及相应质粒的结构示意图,据图回答下列问题。(1)将S基因导入到玉米细胞的常用方法是___ ,此方法的操作中,会应用酚类化合物处理植物细胞,其目的是___ 。
(2)为使S基因按正确方向与质粒连接,应选用的限制酶是___ 和___ 。
(3)S基因表达载体中,对S基因表达起调控作用的序列是___ 。
(4)若要检测转基因玉米细胞中是否含有S基因,可采用___ 技术进行检测,此技术的原理是___ 。
(5)S基因转录的方向是沿着模板的___ (5'→3'或3'→5')。
(2)为使S基因按正确方向与质粒连接,应选用的限制酶是
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【推荐3】干扰素是由淋巴细胞产生的一种细胞因子,在临床上常用于治疗病毒感染性疾病,科研人员通过构建基因工程菌来生产干扰素。下图为构建工程菌的流程图,图中质粒A上的m、n分别是启动子和终止子,目的基因的b链为模板链。请回答以下问题:
(1)过程①需要______ 酶,所需RNA要从______ 细胞中获得。
(2)目的基因扩增常用PCR技术,该过程需要根据__________________ 设计特异性引物序列,此外PCR反应体系中除模板和引物外还需加入含Mg2+的缓冲液、________________________ (答出一点即可)、H2O等。
(3)过程②需在a链的5′端加接______ 的识别序列,b链的5′端加接______ 的识别序列,才能保证目的基因正向插入质粒。插入质粒过程中,还要注意将干扰素基因插入启动子和终止子之间,其中启动子的作用是________________________ 。
(4)获得重组质粒后,将其导入大肠杆菌时常用______ 处理受体菌。用该工程菌获得的干扰素不具有生物活性,其原因可能是________________________ 。
(1)过程①需要
(2)目的基因扩增常用PCR技术,该过程需要根据
(3)过程②需在a链的5′端加接
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