【推荐1】将普通大麦经过一系列处理，最终可以得到麦芽汁浸出液。在麦芽汁浸出液中加入一定量蛋白胨、葡萄糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：
（1）M培养基若用于某真菌的筛选，则培养基中应加入四环素以抑制_______的生长，加入了四环素的培养基属于__________培养基。
（2）M培养基为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除碳源外还有__________。碳源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有______（答出两点即可）。
（3）从得到的上述真菌中分离、纯化某特定的酶，常用的方法是电泳法和凝胶色谱法。电泳法分离酶，影响电泳速度的因素有____________（答出两点即可）。凝胶色谱法最先分离出来的是分子量____________（填“大”或 “小”）的酶分子，原因是_______________。
（4）酶的活性指酶催化一定化学反应的能力，酶反应速度指________________。

【推荐3】弹性蛋白酶能高效水解不溶性弹性硬蛋白，常作为肉类嫩化剂。芳香黄杆菌是食品行业常见的弹性蛋白酶产生菌。芳香黄杆菌初筛培养基的部分配方如下表:

弹性蛋白	酵母膏	葡萄糖	KH2PO4	K2HPO4	MgSO4·7H2O	琼脂
0.8g	0.1g	0.1g	0.05g	0.1g	0.01g	2g

(1)表中为芳香黄杆菌提供主要氮源的物质是_____，除此以外，培养基还需要满足芳香黄杆菌对_____的要求（答出两点即可）。
(2)为了提高弹性蛋白酶的产量，需借助一定的方法优化菌种，常见的弹性蛋白酶生产工艺如图所示

   

①接入菌种前，应对初筛培养基进行_____处理，由图可知，将菌悬液接种到初筛培养基上的方法是_____。为了获得高产弹性蛋白酶的菌株，常用亚硝基胍（烷化剂）处理菌悬液的方法进行育种，该育种方法的原理是_____。
②高通量筛选是微生物菌种选育过程中常用的筛选技术，它以微孔板为载体，将诱变后培养得到的单菌落接种至含有发酵培养基的微孔板中培养，可以实现同时间检测上万份产物产量的方法，据此分析弹性蛋白酶生产工艺中 进行②③④的目的是_____。
③分离提取弹性蛋白酶时可以采用凝胶色谱法，它是根据_____分离蛋白质的有效方法。填充凝胶柱时不能有气泡的原因是：_____。

【推荐1】孔雀石绿(C₂₃H₂₅N₂Cl)常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图所示。

请分析并回答：
（1）培养液中应加入_________________作为唯一碳源，从①到③的培养过程中，此过程的目的是________________________和________________________。
（2）使用_________________接种方法可以在④上获得单个菌落。实验中使用的培养基可以用_________________灭菌法进行灭菌。
（3）纯化能降解孔雀石绿的细菌菌株A时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____________________________。
（4）研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如图所示。

由上述结果可以看出，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有_____________作用，只有Pb^2＋的作用相反。若要排除Pb^2＋本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置__________________________的培养基样本作为对照。

【推荐2】回答下列有关微生物培养和利用的有关问题：
（1）按照培养基的成分来分，培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
①在酿制葡萄酒时，葡萄汁就相当于是酵母菌发酵的天然培养基。在_________的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应而受到抑制。
②虽然各种培养基的具体配方不同但一般都含碳源、氮源、无机盐和水。培养基中能同时提供碳源和氮源的成分是_________（“蛋白胨”“葡萄糖”“NaNO₃”）。
（2）按照培养基用途来分，培养基按其特殊用途可分为富集培养基、选择性培养基和鉴别培养基。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作______________。在选择培养基中添加一些特殊的物质，则可配制成鉴别培养基。如在尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，则可初步鉴定为该种细菌能够分解尿素；在纤维素为唯一碳源的培养基中加入__________，当纤维素被分解后，其与纤维素形成的红色复合物就无法形成。
（3）微生物培养中，稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目。值得注意的是，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为________________________________。

【推荐3】苯酚（C₆H₅OH）是重要的化工原料，被广泛应用于工业生产中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有几百种，多为细菌、放线菌等。分离和纯化高效降解苯酚的微生物的实验流程如图1所示。请回答下列问题：
   
       
(1)制作苯酚降解菌的分离培养基时，培养基中应以苯酚为___，除基本营养成分外，还应添加___（物质），然后用___法对培养基进行灭菌。分别取稀释倍数为10²、10³、10⁴的菌液0.1 mL稀释涂布平板后，统计的菌落数分别为：422、389、302；36、39、42；3、4、5。按照菌落计数的要求，据图可得出1mL工业废水中苯酚降解菌的活菌数为___个。平板分离得到的单个菌落大小、颜色、隆起度等不完全一致的原因是___。
(2)要进一步分离、纯化菌种，应采用图2中___（填字母）所示的划线分离操作，使用的划线工具是___，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧___次。
(3)对分离得到的某株苯酚降解菌进行菌株生长及苯酚降解实验，结果如图3所示。实验结果表明此菌株适于降解的苯酚浓度为___g/L，判断依据是___。

【推荐1】【加试题】为了研究接种量对酵母菌种群数量的影响。请根据以下提供的实验材料，以酵母菌活细胞数及细胞总数（活细胞数和死细胞数之和）为检测指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具：培养瓶、酵母菌液、美蓝染料（氧化型为蓝色，还原型为无色；使用的美蓝为氧化型，且能进入细胞）、液体培养基、高压蒸汽灭菌锅、移液器、摇床、血细胞计数板、吸管、显微镜等。
（要求与说明：定时取样，培养足够时间；细胞计数的具体操作过程不作要求；培养过程中不更换培养液；实验条件适宜）
请回答：
（1）完善实验思路：
①对液体培养基用___________________进行灭菌后，然后均分到3组培养瓶中。用移液器吸取____________________的酵母菌液，分别接种入3组培养瓶。
②从各组培养瓶各吸取0.1mL酵母菌培养液，___________________，室温染色适宜时间。立即在显微镜下用血细胞计数板计数__________细胞和__________细胞，统计细胞总数，并记录。
③将3组培养瓶放在摇床上恒温培养。

……

__________
（2）预期实验结果（设计一个坐标系，并绘制不同接种量下酵母菌活细胞数的变化曲线）：_____________。
（3）分析与讨论：
①美蓝染色后活的酵母细胞从蓝色变为无色的原因是_____________。
②在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，请纠正错误______________________________________________________。

【推荐2】反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气 在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温(42℃)的反硝化细菌(目的菌)，用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如图所示(BTB 培养基初始pH=6.8，BTB 是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色:

(1)BTB 培养基灭菌后待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是___________________________。
(2)将污泥样品梯度稀释后，使用_____________ (填工具)将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在______________环境中培养2~3天后，挑选显__________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(3)C/N(碳氮含量比)对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示：科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是_________________________________________________。

(4)为计数微生物的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为10°的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为______。

【推荐3】一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1 mL液样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度。各取0．1 mL已稀释10³倍的水样分别涂布到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为___________________。
（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，理由是________________。
（3）接种技术的核心是_____________________________________。培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是___________________________________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
（4）在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是___________，有透明圈菌落利用的氮源主要是_____________，据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，_____是最理想菌株。可将选取的所需菌种利用_____________________的方法长期保存。