“筛选”是生物工程中常用的技术手段,下列关于筛选的叙述中正确的有几项( )
①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因,酶切产物用DNA连接酶连接,为了保证成功率,需将获得的产物筛选后导入受体细胞
②单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第一次筛选出的是杂交瘤细胞
③单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞
④为了快速繁殖无子西瓜,需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养
①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因,酶切产物用DNA连接酶连接,为了保证成功率,需将获得的产物筛选后导入受体细胞
②单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第一次筛选出的是杂交瘤细胞
③单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞
④为了快速繁殖无子西瓜,需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养
A.②③ | B.①④ | C.③④ | D.①② |
更新时间:2019-02-16 21:48:47
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【推荐1】科研人员将目的基因J与质粒构建重组表达载体,该质粒的部分结构如图所示,下列叙述错误的是( )
A.除图中标出的结构外,质粒还需具备的结构有复制原点、标记基因、限制酶切位点等 |
B.与图中启动子结合的酶是RNA聚合酶 |
C.用PCR检测J基因连接到质粒中且方向正确可选用的一对引物是F1和R2 |
D.若J基因转录的链位于b链,可知引物F1与基因J的b链相应部分序列相同 |
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【推荐2】下图分别表示某种质粒和含目的基因的DNA片段,利用相关工具酶将二者构建成基因表达载体并导入受体菌。几种可供使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoR I:-G↓AATTC;BamH I:-G↓GATCC;Bcl I:-T↓GATCA-;Sau3A I:-↓GATC-;Sma I:-CCC↓GGG-。下列关于构建基因表达载体时限制酶的选择及其相关说法,正确的是( )
A.若只使用Sma I,则目的基因在不同受体菌中表达的产物一定相同 |
B.若只使用Sma I,则含有目的基因的受体菌能在氨苄青霉素培养基中生长 |
C.若选择BamH Ⅰ和Sma I,能在四环素培养基中生长的受体菌一定含有目的基因 |
D.若用EcoR I和Bcl Ⅰ切割质粒,则需用EcoR I和Sau3A Ⅰ切割含目的基因的DNA |
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【推荐1】猪圆环病毒2型(PCV2)是单链环状 DNA 病毒,该病毒的核衣壳蛋白Cap蛋白是PCV2基因工程疫苗研制的关键蛋白。科研人员通过基因工程构建了PCV2-Cap蛋白表达菌株,构建过程中先设计引物,通过PCR 获取Cap基因片段,经酶切处理后与质粒重组,并将其成功导入细菌,最后通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR 结果(图1)及 PCV2-Cap重组质粒构建是否成功(图2为检测结果)进行检测,结果如图所示,图中 Maker为DNA标准品。下列叙述错误的是( )
A.图示结果表明,重组质粒构建是成功的 |
B.构建过程中设计的引物,是依据Cap基因序列设计的 |
C.若含 Cap基因的重组质粒成功导入的细菌是大肠杆菌,则需用Ca2+处理细菌 |
D.构建基因表达载体时应用BamHⅠ一种酶处理Cap基因和质粒 |
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【推荐2】人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点,该位点结合BCL11A蛋白后,γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列,解除对基因表达的抑制,可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段(Fn与R),将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测,以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。下列有关叙述错误的是( )
A.为将扩增后的产物定向插入载体,指导荧光蛋白基因表达,需用MunI和XhoI处理载体 |
B.从产物扩增到载体构建完成的整个过程需6种酶 |
C.将构建的载体导入去除BCL1IA基因的受体细胞,可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光,而含F2-F7与R扩增产物的受体细胞有荧光 |
D.向培养液中添加适量的雌激素,可导致部分受体细胞不再有荧光 |
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【推荐3】人参是一种名贵药材,具有良好的滋补作用,干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作,EcoRⅠ、 BamHⅠ为限制酶,它们的识别序列及切割位点如表所示。下列选项错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/8/8/2523482782523392/2523567847464960/STEM/42b909b1-0121-4691-94df-9ebf2781e3c4.png?resizew=658)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/8/8/2523482782523392/2523567847464960/STEM/42b909b1-0121-4691-94df-9ebf2781e3c4.png?resizew=658)
A.过程①依据的是DNA双链复制的原理 |
B.在过程③中T-DNA整合到受体细胞的染色体DNA上 |
C.过程④可利用分子水平上的杂交进行检测和筛选 |
D.两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列,以方便剪切和连接 |
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【推荐1】脂多糖(LPS)是伤寒沙门氏菌的主要致病毒素。在研发伤寒沙门氏菌LPS疫苗的过程中,利用多肽模拟LPS。多肽模拟LPS抗原特征的相似程度越高,其与LPS竞争抗体结合位点的能力越强。为鉴定多肽A、B模拟、LPS抗原特征的相似程度,研究人员利用抗LPS单克隆抗体进行检测,部分实验步骤如图1,实验结果如图2。下列叙述正确的是( )
A.抗LPS单克隆抗体的制备过程中利用了细胞膜的流动性和细胞的全能性 |
B.图1步骤c中与LPS结合的抗体会被洗脱掉,与多肽结合的抗体未被洗脱 |
C.b过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合 |
D.图2表明多肽B模拟LPS效果更好 |
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【推荐2】胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞,其中一个细胞的细胞核消失后,两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”,制备过程如下图所示,其中GFP(绿色荧光蛋白)基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测,“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B,线粒体基因来自品种A,下列说法正确的是( )
A.制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁 |
B.聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合 |
C.“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 |
D.应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” |
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【推荐1】大量繁殖名贵的兰花品种寒兰,最适合的生物工程技术手段是( )
A.取部分寒兰组织置于适合条件下进行组织培养 |
B.利用细胞融合技术将寒兰组织细胞与骨髓瘤细胞融合 |
C.将寒兰的体细胞核移植到其他植物去核卵细胞中实现大规模的克隆 |
D.利用基因工程将促进寒兰生长发育的基因转入到寒兰细胞中 |
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【推荐2】萝卜是雌雄同花植物,其储藏根(萝卜)的颜色由一对等位基因W、w控制,其形状由另一对等位基因R、r控制。一株表型为紫色椭圆形根的植株自交,F₁的表型及其比例如下表所示。下列分析,错误 的是( )
注:不同基因型植株个体及配子的存活率基本相同。
F1表型 | 红色长形 | 红椭圆形 | 红色圆形 | 紫色长形 | 紫色椭圆形 | 紫色圆形 | 白色长形 | 白色椭圆形 | 白色圆形 |
比例 | 1 | 2 | 1 | 2 | 4 | 2 | 1 | 2 | 1 |
A.控制萝卜颜色和形状的两对基因位于非同源染色体上 |
B.F1紫色椭圆形根和红色长形根的植株杂交可验证两对基因是否遵循自由组合定律 |
C.若表中F1随机传粉,F2植株中表型为紫色椭圆形根的植株所占比例是 9/16 |
D.食品工艺加工需大量紫色萝卜,可利用植物组织培养技术在短时间内大量培育种苗 |
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【推荐3】用 32P 标记玉米体细胞(含 20 条染色体)的 DNA 分子双链,再将这些细胞转入不 含32P 的培养基中培养,让其分裂和分化,并最终形成完整的玉米植株。下列叙述中错误的是
A.形成玉米植株过程中,细胞发生分化,但细胞内的遗传物质并没有发生变化 |
B.该过程体现了细胞的全能性,使用的培养基中通常需要加入生长素和细胞分裂素 |
C.若一个细胞中被32P 标记的染色体是10 条,则该细胞可能处于第三次分裂后期 |
D.玉米是自养生物,能自身合成有机物,因此培养基中可不加有机物成分 |
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