地沟油最大的来源为城市饭店下水道的隔油池,用脂肪酶处理地沟油具有广泛的应用前景。为获得高产脂肪酶的菌株,并将其应用于含地沟油的污水处理,某研究小组进行了一些实验。请回答下列问题:
(1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应配制以脂肪为____________ 的固体培养基,这种培养基从功能上看属于____________ 培养基。
(2)经过稀释,在平板上加入0.1mL稀释液并涂布,经适当时间培养后,在平板上计数菌落,据此可计算出每毫升培养液中的活菌数。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小,其原因可能有____________ 、____________ 。
(3)经上述实验得到如下表所示的结果:
为保证结果准确,一般选择表中的稀释倍数为____________ 的平板进行统计。某同学认为“稀释操作时,可以将1mL培养液加适量无菌水直接稀释至所选择的稀释倍数,这样可以简化步骤,省去梯度稀释的麻烦。”该同学的说法是否合理?请判断并说明理由:_____________________ 。
(1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应配制以脂肪为
(2)经过稀释,在平板上加入0.1mL稀释液并涂布,经适当时间培养后,在平板上计数菌落,据此可计算出每毫升培养液中的活菌数。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小,其原因可能有
(3)经上述实验得到如下表所示的结果:
稀释倍数 | 101 | 102 | 103 | 104 | 105 | 106 |
培养 结果 | ||||||
计数 (平均值) | 难以计数 | 难以计数 | 难以计数 | 159 | 17 | 2 |
为保证结果准确,一般选择表中的稀释倍数为
更新时间:2020-03-11 06:25:39
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适中
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【推荐1】进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间,降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾,如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/10/18/2832241298874368/2837132556410880/STEM/95038f65-e95a-4e3d-863a-69954ffecad0.png)
(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,配制的培养基需要以__________ 为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是;计算→称量→溶化→__________ →__________ 。接种微生物最常用的方法是__________ 。
(2)获得产脂肪酶的菌株后,在处理含油垃圾的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株,并进行了培养研究,结果如图1所示。据图分析,应选择菌株__________ 进行后续相关研究,理由是______________________________ 。
(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图2所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择__________ (填“A”“B”或“C”)菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌,A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________ 。
(4)在微生物分解处理垃圾的过程中,纤维素分解菌能够分泌纤维素酶,该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成,其中__________ 酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。
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(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,配制的培养基需要以
(2)获得产脂肪酶的菌株后,在处理含油垃圾的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株,并进行了培养研究,结果如图1所示。据图分析,应选择菌株
(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图2所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择
(4)在微生物分解处理垃圾的过程中,纤维素分解菌能够分泌纤维素酶,该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成,其中
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(0.65)
【推荐2】某研究小组进行了稻田固氮微生物的筛选实验。请回答下列问题:
(1)下表中能达到实验目的的培养基是__________ (填“甲”或“乙”),你的判断依据是__________ 。
(2)将筛选出的菌株用______________ 法接种到固氮培养基培养,观察菌落的_________________ (答出两点即可)等特征,可对菌株进行种属鉴定。
(3)将筛选所得菌株在固氮液体培养基扩大培养一段时间,测定其活菌数并以此评估其繁殖能力。请简要写出测定活菌数的具体思路____________________________________ 。
(1)下表中能达到实验目的的培养基是
类型 | 组成 |
甲 | 甘露醇、KH2PO4、NaCl、MgSO4、CaSO4、CaCO3,pH7.2 |
乙 | 葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、Ca3(PO4)2,pH7.2 |
(2)将筛选出的菌株用
(3)将筛选所得菌株在固氮液体培养基扩大培养一段时间,测定其活菌数并以此评估其繁殖能力。请简要写出测定活菌数的具体思路
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(0.65)
【推荐3】β-葡萄糖苷酶是一种存在于微生物中的可水解纤维素的酶,可用于生产燃料乙醇,也可作为洗涤剂的有效成分。某科研小组进行了β-葡萄糖苷酶高产菌株的分离、鉴定、提纯产物等研究。已知七叶灵能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解产物七叶苷原能和Fe3+作用呈现棕黑色。请回答:
(1)为筛选出β-葡萄糖苷酶高产菌株,应到_____________ 环境中取样,取样后要在液体培养基中进行选择培养,其目的是_________________ 。
(2)选择培养后要初步分离鉴定出目的菌株,请写出实验思路:___________________ 。
(3)用接种针挑取棕黑色的菌落用_____________ 法进一步纯化,进而筛选出高产菌株。
(4)将高产菌株扩大培养,获得发酵液,用___________ 法去除发酵液中分子量小的杂质,再用_________ 法进一步纯化,最终获得纯度较高的β-葡萄糖苷酶。
(5)生产中为降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用________ 法固定,以便重复使用。
(1)为筛选出β-葡萄糖苷酶高产菌株,应到
(2)选择培养后要初步分离鉴定出目的菌株,请写出实验思路:
(3)用接种针挑取棕黑色的菌落用
(4)将高产菌株扩大培养,获得发酵液,用
(5)生产中为降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用
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【推荐1】青枯病由青枯菌(一种细菌)引发,严重危害番茄生长。菜粕有机肥是以菜粕为原料经微生物降解而制成的氨基酸有机肥。研究者希望筛选出能充分利用菜粕有机肥抑制青枯菌的菌株。
(1)菜粕有机肥含有大量的营养物质,可为微生物提供充足的碳源和__________ 源,从而可促进抑菌微生物的繁殖。
(2)为筛选适于在菜粕上生长且能抑制青枯菌的菌株,研究者进行了下列实验。
①称取10克番茄根际土壤置于装有__________ 的锥形瓶,制成稀释10倍的土壤稀释液,接种于若干个含菜粕的固体培养基,30℃培养2~4天,该培养基按功能划分,属于__________ 培养基。
②将上述培养基上生长的所有单菌落接种到同一个固体培养基上,培养24h后,在培养基表面均匀喷洒__________ 悬液,30℃培养48h后对出现抑菌圈的菌落进行测量,计算每个菌落的__________ 以表示其抑菌能力,最终筛选出菌株RC14。
(3)为检测在施用不同肥料条件下菌株RC14对番茄青枯病的防治效果,研究者将盆栽番茄接种青枯菌7天后进行如下处理,45天后测定发病率。结果如表所示。
表中A处应为__________ ,综合上述研究及表中信息推测第4组发病率最低的原因__________ 。
(1)菜粕有机肥含有大量的营养物质,可为微生物提供充足的碳源和
(2)为筛选适于在菜粕上生长且能抑制青枯菌的菌株,研究者进行了下列实验。
①称取10克番茄根际土壤置于装有
②将上述培养基上生长的所有单菌落接种到同一个固体培养基上,培养24h后,在培养基表面均匀喷洒
(3)为检测在施用不同肥料条件下菌株RC14对番茄青枯病的防治效果,研究者将盆栽番茄接种青枯菌7天后进行如下处理,45天后测定发病率。结果如表所示。
组别 | 处理 | 发病率(%) |
1 | 施用常规化肥 | 72.5 |
2 | A__________ | 62.5 |
3 | 施用含菌株RC14的常规化肥 | 56.5 |
4 | 施用含菌株RC14的菜粕有机肥 | 17.5 |
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【推荐2】某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A.研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/12/03ed5da1-418e-4a0c-ab1b-e7e690b19b5a.png?resizew=618)
(1)培养基中加入化合物A的目的是_____ ,这种培养基属于_____ 培养基。
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源来自培养基中的_____ 。实验需要振荡培养,由此推测目的菌的代谢类型是_____ 。
(3)对培养基进行灭菌的常用方法是_____ 。用稀释涂布平板法测定细菌数目时,实际活菌数要比测得的数目_____ 。
(4)某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用稀释倍数为104、105、106的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是_____ ,此对照实验的目的是_____ 。
(5)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量_____ (填“增加”或“减少”)的培养液,接入新的培养液中连续培养,使目的菌的数量_____ (填“增加”或“减少”)。
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____ 处理后才能倒掉,这样做的目的是防止造成_____ 。
(7)如图所示,甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳的制作,①②③④表示它们制作的相同之处。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/22/2963727640346624/2964127410585600/STEM/5b127ff9-3090-421e-a440-a88f0ed34171.png?resizew=140)
甲乙丙所用的菌种分别是_____ 、_____ 、_____ 。
(8)下列相关叙述错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/12/03ed5da1-418e-4a0c-ab1b-e7e690b19b5a.png?resizew=618)
(1)培养基中加入化合物A的目的是
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源来自培养基中的
(3)对培养基进行灭菌的常用方法是
(4)某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用稀释倍数为104、105、106的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是
(5)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行
(7)如图所示,甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳的制作,①②③④表示它们制作的相同之处。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/22/2963727640346624/2964127410585600/STEM/5b127ff9-3090-421e-a440-a88f0ed34171.png?resizew=140)
甲乙丙所用的菌种分别是
(8)下列相关叙述错误的是( )
A.①可表示两者制作时所用的主要菌种都是单细胞生物 |
B.②可表示两者制作时所用的主要菌种都属于真核生物 |
C.③可表示两者制作过程都需要有氧环境 |
D.④可表示三者制作过程的温度相同 |
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【推荐3】回答下列(一)、(二)小题:
(一)嗜盐菌常分布在晒盐场、盐湖、腌制品中,某生物兴趣小组对嗜盐菌进行了如下探究和分析,请回答以下问题:
(1)获得嗜盐菌的第一步是从合适的环境中采集菌样,然后按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的培养基较普通培养基中________ 含量高
(2)如图是采用不同接种方法接种嗜盐菌后纯化培养的效果图,其中图___ 方法(填字母)不适合用于微生物的计数,出现图A结果的原因是在操作时_________ 。在进行计数时,最终选取菌落数在______ 范围内的平板进行计数。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/5/25/2728741713723392/2741503758376960/STEM/d874b2a6efb34391913036c7f0e38415.png?resizew=297)
(3)在实验过程中,无菌操作是非常重要的,对实验过程中使用的玻璃器皿通常使用_____________ 法进行灭菌。
(二)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG的单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG的单克隆抗体制备流程示意图。回答与动物的克隆有关的问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/5/25/2728741713723392/2741503758376960/STEM/713095ce056c4d408f510b10d0c1c1c0.png?resizew=758)
(4)图中的抗原是____________ 。①过程中促进细胞融合的最常用化学药剂是_______ 。
(5)③过程需进行专一的_________ ,筛选出的X细胞具有的特点是______________ 。
(一)嗜盐菌常分布在晒盐场、盐湖、腌制品中,某生物兴趣小组对嗜盐菌进行了如下探究和分析,请回答以下问题:
(1)获得嗜盐菌的第一步是从合适的环境中采集菌样,然后按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的培养基较普通培养基中
(2)如图是采用不同接种方法接种嗜盐菌后纯化培养的效果图,其中图
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(3)在实验过程中,无菌操作是非常重要的,对实验过程中使用的玻璃器皿通常使用
(二)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG的单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG的单克隆抗体制备流程示意图。回答与动物的克隆有关的问题:
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(4)图中的抗原是
(5)③过程需进行专一的
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【推荐1】(一)草莓是春节市场上非常受欢迎的一种水果,但却存在易腐烂,难保存的问题。某科研团队为了确定腐烂草莓上的菌种类型和探究草莓的新产业开发模式,进行了以下一系列的研究。请回答:
(1)科研团队用棉签刮取腐烂的草莓表面,然后用_________ 冲洗棉签获得菌悬液,然后利用_________ 法将其接种至LB固体培养基中,培养基中出现了均匀分布的单菌落。
(2)腐烂的草莓非常软烂,原因是微生物产生的_________ 作用后使草莓组织更加松散。为了获得使草莓变软的微生物,用接种环分别刮取LB培养基上菌落的菌种,接种到_________ 培养基上,发现了以下两种情况:
①LB培养基中的菌落数量和种类更多,原因是__________________ 。
②后者培养基上的菌落与在LB培养基上培养时相比,生长状况不尽相同,可能原因是_________ 。
(3)科研团队为了制成草莓果酒,将草莓放入榨汁机制成黏稠的果酱,然后接种酿酒酵母进行发酵,结果发现酒精含量低,且极易造成污染。可以将果酱进行_________ 处理后再用于发酵。
(二)某种植物的根会产生一种次生代谢产物,该次生代谢产物具有很高的药用价值。在研究这种次生代谢产物合成的分子机制时发现,基因A表达沉默时才能产生,且有物质甲存在时会使基因A表达。物质甲在环境中非常常见,为了实现基因A的沉默,现设计将基因A反向连接到植物基因组中。基因A与Ti质粒结构如下图所示,箭头表示转录方向。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/21/2963153153499136/2963645647699968/STEM/2cd7da1e-b21b-478d-b019-3353db57f6f3.png?resizew=451)
(4)为了使基因A反向连接到Ti质粒上,选用EcoRI和BamHI酶进行切割并分离获得A基因,然后加入___________ 形成重组Ti质粒。为了保证重组Ti质粒在农杆菌中的稳定存在,需将工程发根农杆菌进行___________ 处理。
(5)将含有重组T质粒的发根农杆菌与经过创伤处理的外植体共同培养一段时间,然后进行___________ 后,在培养基中加入___________ 以筛选出成功导入基因A片段的植物细胞。再转移至含有______________________ 的培养基上培养得到愈伤组织。结果发现未更换培养基的情况下,就长出了较多的根,可能原因是发根农杆菌的T-DNA中含有______________________ 基因。
(6)为了检验转基因是否成功,应在___________ (填“含”或“不含”)物质甲的培养液中将获得的根进行水培,发现只有部分能产生目标次生代谢产物。部分根无法产生次生代谢产物的可能原因是___________ 。
(1)科研团队用棉签刮取腐烂的草莓表面,然后用
(2)腐烂的草莓非常软烂,原因是微生物产生的
①LB培养基中的菌落数量和种类更多,原因是
②后者培养基上的菌落与在LB培养基上培养时相比,生长状况不尽相同,可能原因是
(3)科研团队为了制成草莓果酒,将草莓放入榨汁机制成黏稠的果酱,然后接种酿酒酵母进行发酵,结果发现酒精含量低,且极易造成污染。可以将果酱进行
(二)某种植物的根会产生一种次生代谢产物,该次生代谢产物具有很高的药用价值。在研究这种次生代谢产物合成的分子机制时发现,基因A表达沉默时才能产生,且有物质甲存在时会使基因A表达。物质甲在环境中非常常见,为了实现基因A的沉默,现设计将基因A反向连接到植物基因组中。基因A与Ti质粒结构如下图所示,箭头表示转录方向。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/21/2963153153499136/2963645647699968/STEM/2cd7da1e-b21b-478d-b019-3353db57f6f3.png?resizew=451)
(4)为了使基因A反向连接到Ti质粒上,选用EcoRI和BamHI酶进行切割并分离获得A基因,然后加入
(5)将含有重组T质粒的发根农杆菌与经过创伤处理的外植体共同培养一段时间,然后进行
(6)为了检验转基因是否成功,应在
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【推荐2】为探究细菌间的相互作用,科研人员利用基因工程技术,对无法利用乳糖的大肠杆菌进行改造。将乳糖酶基因转入大肠杆菌,获得营养菌(能利用乳糖);将抗生素CRO降解酶基因转入大肠杆菌,获得抗性菌。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/16/ffac2cce-7304-4b55-b163-0a70d1915c1c.png?resizew=415)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/16/550a4a08-2a3c-4e58-9eeb-c53674df83cb.png?resizew=389)
(注:→代表混合菌液培养板上细菌的存活率相对值为1,即与0h数量相同。→以上数值越大,细菌数量越大;→以下表示存活率降低。)
(1)将得到的两种菌分别接种于__________ 培养基进行扩大培养。
(2)为了解大肠杆菌的繁殖速度,可用________________ 法对其进行计数。将培养到某一时期的培养液制备成10-4的稀释液,每次取0.1mL进行涂布分离,三个培养皿生长的菌落数依次为35个、31个,33个,则培养液中的大肠杆菌数量为 ________ 个/mL。
(3)若将两种菌混合接种,培养一段时间后,培养皿中有菌落长出,且同时含有两种菌,推测两种菌实现了“互利共生”。为进一步探究上述 现象的原因,科研人员设计了如图1 所示装置进行实验。
①在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板左侧,加入以______ 为唯一碳源并含_________ 的培养基,培养基可从左侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。定期检测混合菌液培养板上两种菌的数量,得到如图2所示结果。
②0~10h,营养菌的数量变化是:近培养基端(相对距离0~500之间)_____________ ,远培养基端(相对距离500~1000之间)__________________ 。
③10~45h,营养菌和抗性菌的数量变化趋势是_________________________________ ,并逐渐向____________ 方向增殖,其原因是__________________________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/16/ffac2cce-7304-4b55-b163-0a70d1915c1c.png?resizew=415)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/16/550a4a08-2a3c-4e58-9eeb-c53674df83cb.png?resizew=389)
(注:→代表混合菌液培养板上细菌的存活率相对值为1,即与0h数量相同。→以上数值越大,细菌数量越大;→以下表示存活率降低。)
(1)将得到的两种菌分别接种于
(2)为了解大肠杆菌的繁殖速度,可用
(3)若将两种菌混合接种,培养一段时间后,培养皿中有菌落长出,且同时含有两种菌,推测两种菌实现了“互利共生”。为进一步探究上述 现象的原因,科研人员设计了如图1 所示装置进行实验。
①在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板左侧,加入以
②0~10h,营养菌的数量变化是:近培养基端(相对距离0~500之间)
③10~45h,营养菌和抗性菌的数量变化趋势是
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【推荐3】对生活垃圾进行分类处理,是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾,如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。
(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,配制的培养基需要以___________ 为唯一碳源。
(2)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是___________ 。
(3)为了测定细菌含量,将稀释倍数为
的菌液均按0.1mL的用量各接种3个平板,在适宜条件下培养一段时间后,3个平板上长出的菌落数分别为42个、55个、38个,则每升菌液的活菌数约为___________ 个。活菌的实际数目往往比该方法测得的数据___________ (填“多”“少”或“相等”),因为___________ 。
(4)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择___________ 菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌, A 菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是___________ 。
(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,配制的培养基需要以
(2)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是
(3)为了测定细菌含量,将稀释倍数为
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(4)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/12/1c12e4ba-6272-41c8-be1c-7634a412054e.jpg?resizew=297)
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