回答下列(一)、(二)小题:
(一)海南粗榧是一种濒危植物,其产生的三尖杉碱对急性及慢性粒细胞白血病和恶性淋巴病有较好的疗效。请回答有关问题:
(1)测定不同来源海南粗榧植株的三尖杉碱含量:精确称取10mg三尖杉碱标准品,溶于甲醇并________ 至5ml容量瓶中,配制成2mg/ml的母液,再将母液分别________ 成一系列浓度的工作液各2ml,加入显色剂,测定光密度值(OD值),绘制标准曲线。如果实验中发现OD值太大不利于作图,应该________ (增大、减小)光程。
(2)在对海南粗榧进行组织培养的时候,首先配制MS培养基,其中CuSO4提供________ (A.大量元素 B.微量元素 C.有机成分 D.能源),在MS培养基的基础上再配制发芽培养基和生根培养基,分装到三角瓶中,加上封口膜后在________ 压力下灭菌20分钟待用。
(3)三尖杉碱属于________ 代谢产物,可以通过二段法进行细胞悬浮培养,即细胞系先在生长培养基中培养一段时间以累积________________ ,再转入生产培养基促使细胞大量合成有效三尖杉碱,从而实现工业化生产。
(二)研究人员利用基因敲除技术将猪的肌生成抑制蛋白基因敲除,从而得到了高骨骼肌含量的克隆猪。请回答有关问题:
(1)常用基因敲除技术是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以定点修饰改造染色体上某一基因。相对传统的转基因技术,该基因敲除技术的最大优点是________________ 。要实现敲除肌生成抑制蛋白基因的目的,首先要构建替换型打靶载体,该过程中需要的工具酶有________________ 。
(2)将替换型打靶载体通过显微注射法导入猪胚胎干细胞,胚胎干细胞是从着床前胚胎分离出的________ 的细胞,它具有向各种组织细胞分化的潜能。培养猪胚胎干细胞时,首先要在培养皿底部制备一层细胞,这层细胞一般是________________ 。
(3)筛选出靶细胞,导入猪的________ 中,再将其植入代孕猪体内,使其发育成嵌合体猪,再经过回交、筛选就可以得到肌生成抑制蛋白基因敲除纯合体。为了快速扩大基因敲除猪的种群,除进行有性生殖外,还可以采取胚胎分割和________ 技术。
(4)为证明肌生成抑制蛋白基因敲除猪的表现型改变确实是由于敲除了该基因的缘故,可以通过导入肌生成抑制蛋白基因或者直接注射________ ,如果猪表现型转为正常,说明确实是由于敲除了肌生成抑制蛋白基因的缘故。
(一)海南粗榧是一种濒危植物,其产生的三尖杉碱对急性及慢性粒细胞白血病和恶性淋巴病有较好的疗效。请回答有关问题:
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(2)在对海南粗榧进行组织培养的时候,首先配制MS培养基,其中CuSO4提供
(3)三尖杉碱属于
(二)研究人员利用基因敲除技术将猪的肌生成抑制蛋白基因敲除,从而得到了高骨骼肌含量的克隆猪。请回答有关问题:
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(2)将替换型打靶载体通过显微注射法导入猪胚胎干细胞,胚胎干细胞是从着床前胚胎分离出的
(3)筛选出靶细胞,导入猪的
(4)为证明肌生成抑制蛋白基因敲除猪的表现型改变确实是由于敲除了该基因的缘故,可以通过导入肌生成抑制蛋白基因或者直接注射
20-21高二上·浙江杭州·阶段练习 查看更多[1]
(已下线)【新东方】2018-2019学年浙江省杭州市新东方学校高二上试卷高中生物062(第二批)
更新时间:2020-03-07 08:12:38
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困难
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【推荐1】柿子在水果中甜味居首位,被誉为“最甜的金果子”,因此常用来酿柿子酒、制作柿子绵绵冰等美食,但不成熟的柿子有涩味,影响口感和健康。据研究,柿子的涩味程度与乙醛代谢关键酶基因(PDC)的表达情况密切相关。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/10/fb4574ae-3e76-4d0c-a631-c5f3d5970909.png?resizew=525)
(1)为获得大量的PDC基因,从柿子细胞中提取___ ,构建cDNA文库。cDNA的基因序列与柿子细胞核内的基因序列有所不同,理由是___ (写出2点)。将在cDNA文库中找到的PDC基因作为模板,用___ 的TaqDNA聚合酶将4种___ 连接到相应的引物后面,进行PCR扩增。引物的正确连接位置应是图甲中的___ (填字母)。
(2)利用图乙的质粒A构建含PDC基因的表达载体。为确定限制酶的切点,科研人员用限制酶BamHI和HindⅡ单独或联合酶切质粒A,获得的DNA片段电泳结果如图丙,最左边为DNAMarker,1kb为1000个碱基对,请在下图中标出限制酶的识别序列位置及其之间的距离。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/10/8ecee954-133b-450d-adbd-86c0f0fc6cd8.png?resizew=189)
(3)将成功构建的含PDC基因的重组质粒A导入代谢缺陷型酵母菌,并在___ 的培养基上筛选成功转化的酵母菌。对已经转化的酵母菌进行扩大培养。现取1mL样液,用___ 稀释103倍,___ 后再用吸管滴加在25×16型、计数室体积为0.1mm3的血细胞计数板进行计数,每个计数样方中酵母菌的平均数为8个,则1mL样液中酵母菌的数量为___ 个。
(4)将已经脱涩处理的柿子破碎,去皮去籽后适宜温度下加入___ 以增加果浆含量,并加入能分泌蛋白酶和淀粉酶的红曲霉,红曲霉作用后的产物能为酿酒酵母的生长提供___ 。为缩短发酵时间,酿酒酵母可先用___ 活化。发酵过程中,发酵液的pH值会___ 。若要长期保存柿子酒,发酵结束后经过滤、加热,并___ 分装密封,以防冷却后滋生杂菌。
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(1)为获得大量的PDC基因,从柿子细胞中提取
(2)利用图乙的质粒A构建含PDC基因的表达载体。为确定限制酶的切点,科研人员用限制酶BamHI和HindⅡ单独或联合酶切质粒A,获得的DNA片段电泳结果如图丙,最左边为DNAMarker,1kb为1000个碱基对,请在下图中标出限制酶的识别序列位置及其之间的距离。
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名校
【推荐2】苏云金杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图。据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/28/1955039499739136/null/STEM/6a3b3ce6c4af405799b401b9446446ea.png?resizew=390)
(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有___________ 种DNA片段。
(2)假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗?___________ (填“能”或“不能”),理由是______________________ 。若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒________ 。
A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开
B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开
D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
(3)实际操作中最常用___________ 法将重组质粒导入植物受体细胞。种植转基因植物,它所携带的目的基因可能传递给非转基因植物,造成基因污染。把目的基因导入植物的___________ DNA中,就可以有效避免基因污染,原因是_______________________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/28/1955039499739136/null/STEM/6a3b3ce6c4af405799b401b9446446ea.png?resizew=390)
(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有
(2)假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗?
A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开
B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开
D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
(3)实际操作中最常用
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解题方法
【推荐3】β-地中海贫血主要由β珠蛋白合成异常所致,是一种单基因遗传病,患者常于幼儿或青少年期死亡。对遗传病进行早期诊断可有效预防遗传病的产生。回答下列问题:___ 。β珠蛋白基因内部有六个突变位点,它们的遗传方式均与图1相同,且其中任何一个位点突变均会造成β珠蛋白合成异常。若单条染色体上的β珠蛋白基因中仅有一处位点发生突变,则人群中该病患者的基因型有__________ 种。若某位点发生了一对碱基的替换, 与正常β珠蛋白相比较,该基因表达产物的氨基酸数量可能会_______ 。
A. 增加 B. 不变 C. 减少
(2)在___ 期,位于同源染色体上的等位基因可能会随着______ 之间的互换而发生交换,导致染色单体上的非等位基因发生重组,其发生概率与二者在染色体上的距离呈正相关。已知紧邻β珠蛋白基因的DNA中含两个限制酶HincⅡ和两个限制酶BamHⅠ的切割位点,推测β珠蛋白基因与切割位点之间发生重组的概率极___ (填“高”或“低”), 利用此特点可对β-地中海贫血进行产前诊断。
(3)研究人员设计了两条探针,其中探针1能与两个HincⅡ切割位点间的DNA特异性结合,探针2能与两个BamHⅠ切割位点间的DNA特异性结合。图1各成员的DNA经限制酶切割后电泳,并用分别用探针1、2显示相应片段位置,结果如图2和图3所示(左侧数字表示DNA片段大小,Ⅱ₄为羊水DNA)。根据图1和图2判断Ⅱ₄的基因型可能为____ , 再结合图3结果可确定Ⅱ₄的基因型是___ 。 (相关基因用B/b表示)
A. 增加 B. 不变 C. 减少
(2)在
(3)研究人员设计了两条探针,其中探针1能与两个HincⅡ切割位点间的DNA特异性结合,探针2能与两个BamHⅠ切割位点间的DNA特异性结合。图1各成员的DNA经限制酶切割后电泳,并用分别用探针1、2显示相应片段位置,结果如图2和图3所示(左侧数字表示DNA片段大小,Ⅱ₄为羊水DNA)。根据图1和图2判断Ⅱ₄的基因型可能为
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