组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本工具 > DNA重组技术的基本工具
题型:非选择题-解答题 难度:0.15 引用次数:361 题号:9918272
回答下列(一)、(二)小题:
(一)海南粗榧是一种濒危植物,其产生的三尖杉碱对急性及慢性粒细胞白血病和恶性淋巴病有较好的疗效。请回答有关问题:
(1)测定不同来源海南粗榧植株的三尖杉碱含量:精确称取10mg三尖杉碱标准品,溶于甲醇并________至5ml容量瓶中,配制成2mg/ml的母液,再将母液分别________成一系列浓度的工作液各2ml,加入显色剂,测定光密度值(OD值),绘制标准曲线。如果实验中发现OD值太大不利于作图,应该________(增大、减小)光程。
(2)在对海南粗榧进行组织培养的时候,首先配制MS培养基,其中CuSO4提供________(A.大量元素   B.微量元素   C.有机成分   D.能源),在MS培养基的基础上再配制发芽培养基和生根培养基,分装到三角瓶中,加上封口膜后在________压力下灭菌20分钟待用。
(3)三尖杉碱属于________代谢产物,可以通过二段法进行细胞悬浮培养,即细胞系先在生长培养基中培养一段时间以累积________________,再转入生产培养基促使细胞大量合成有效三尖杉碱,从而实现工业化生产。
(二)研究人员利用基因敲除技术将猪的肌生成抑制蛋白基因敲除,从而得到了高骨骼肌含量的克隆猪。请回答有关问题:
(1)常用基因敲除技术是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以定点修饰改造染色体上某一基因。相对传统的转基因技术,该基因敲除技术的最大优点是________________。要实现敲除肌生成抑制蛋白基因的目的,首先要构建替换型打靶载体,该过程中需要的工具酶有________________
(2)将替换型打靶载体通过显微注射法导入猪胚胎干细胞,胚胎干细胞是从着床前胚胎分离出的________的细胞,它具有向各种组织细胞分化的潜能。培养猪胚胎干细胞时,首先要在培养皿底部制备一层细胞,这层细胞一般是________________
(3)筛选出靶细胞,导入猪的________中,再将其植入代孕猪体内,使其发育成嵌合体猪,再经过回交、筛选就可以得到肌生成抑制蛋白基因敲除纯合体。为了快速扩大基因敲除猪的种群,除进行有性生殖外,还可以采取胚胎分割和________技术。
(4)为证明肌生成抑制蛋白基因敲除猪的表现型改变确实是由于敲除了该基因的缘故,可以通过导入肌生成抑制蛋白基因或者直接注射________,如果猪表现型转为正常,说明确实是由于敲除了肌生成抑制蛋白基因的缘故。
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(1)为获得大量的PDC基因,从柿子细胞中提取___,构建cDNA文库。cDNA的基因序列与柿子细胞核内的基因序列有所不同,理由是___(写出2点)。将在cDNA文库中找到的PDC基因作为模板,用___的TaqDNA聚合酶将4种___连接到相应的引物后面,进行PCR扩增。引物的正确连接位置应是图甲中的___(填字母)。
(2)利用图乙的质粒A构建含PDC基因的表达载体。为确定限制酶的切点,科研人员用限制酶BamHI和HindⅡ单独或联合酶切质粒A,获得的DNA片段电泳结果如图丙,最左边为DNAMarker,1kb为1000个碱基对,请在下图中标出限制酶的识别序列位置及其之间的距离。

(3)将成功构建的含PDC基因的重组质粒A导入代谢缺陷型酵母菌,并在___的培养基上筛选成功转化的酵母菌。对已经转化的酵母菌进行扩大培养。现取1mL样液,用___稀释103倍,___后再用吸管滴加在25×16型、计数室体积为0.1mm3的血细胞计数板进行计数,每个计数样方中酵母菌的平均数为8个,则1mL样液中酵母菌的数量为___个。
(4)将已经脱涩处理的柿子破碎,去皮去籽后适宜温度下加入___以增加果浆含量,并加入能分泌蛋白酶和淀粉酶的红曲霉,红曲霉作用后的产物能为酿酒酵母的生长提供___。为缩短发酵时间,酿酒酵母可先用___活化。发酵过程中,发酵液的pH值会___。若要长期保存柿子酒,发酵结束后经过滤、加热,并___分装密封,以防冷却后滋生杂菌。
2024-01-09更新 | 235次组卷
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A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开               
B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开        
D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
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A. 增加                    B. 不变                      C. 减少
(2)在 ___期,位于同源染色体上的等位基因可能会随着______之间的互换而发生交换,导致染色单体上的非等位基因发生重组,其发生概率与二者在染色体上的距离呈正相关。已知紧邻β珠蛋白基因的DNA中含两个限制酶HincⅡ和两个限制酶BamHⅠ的切割位点,推测β珠蛋白基因与切割位点之间发生重组的概率极___   (填“高”或“低”), 利用此特点可对β-地中海贫血进行产前诊断。
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