1 . 接种疫苗是预防新冠肺炎最有效的措施，几种不同新冠疫苗生产的途径及原理如下图所示，回答下列问题∶

(1)传统疫苗生产通常采用_____体外培养病毒使其增殖。接种加强针可明显增加相应_____的浓度和_____的数量，达到预防新冠病毒感染的效果。
(2)我国提出序贯免疫加强接种方案，如人们接种两剂灭活疫苗满六个月后，第三针加强针可接种腺病毒载体疫苗进行加强，序贯免疫的优点有_____。（答出两点即可）
(3)感染过腺病毒的人接种腺病毒载体疫苗效果较差，原因可能是_____。

2 . 接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一，新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。右图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示Nco I、Sph I、Nhel、BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表）。请回答下列问题：

限制酶	Nco I	Sph I	Nhe I	BamHI
识别序列和切制位点	C↓CATGG	CCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

(1)为使重组质粒构建过程顺利进行，需先使用限制酶_____和_____切割质粒，选用两种限制酶对新冠病毒的S蛋白基因和质粒进行切割的目的是_______（答出1点即可）。
(2)扩增含S蛋白基因的重组腺病毒：腺病毒为DNA病毒，对人体无害，需要利用技术手段将上面得到的重组质粒整合到腺病毒DNA（基因组）中，然后培养一种称之为293的细胞，让这种重组病毒侵染这些细胞，同时使用_______方法检测有无S蛋白的产生，若有，则证明S蛋白基因成功表达，重组腺病毒可以用作疫苗。
(3)人体接种腺病毒重组疫苗后，S蛋白基因表达出S蛋白抗原，诱导机体通过________免疫产生抗体。重组疫苗只需注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA。请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是________。
(4)综合上述信息，重组腺病毒载体疫苗是安全的，判断的依据是_________。

3 . 核酸检测阳性是确诊新冠肺炎的重要标准，新冠病毒是RNA病毒，核酸检测是通过荧光定量PCR检测受测者体内是否有病毒的核酸。以下是核酸检测过程图：

由图可知，具体检测过程是：
(1)首先采集受测者的痰液、咽拭子、血液等样本，从中提取病毒的________，通过_______过程得到cDNA，再在体外利用________技术对cDNA进行扩增，该技术包括________三个步骤。
(2)PCR技术扩增目的基因的前提是______________________。
(3)诱导动物细胞融合的过程中常用到灭活的病毒，灭活是指用物理或化学手段使病毒失去________，但并不破坏病毒的________________结构。
(4)除核酸检测外，抗体检测也是筛查新冠肺炎患者的重要手段，其原理是：____________。如果检测结果为阳性，则表明：_________________（答出两种可能的原因）。

4 . 检测新型冠状病毒核酸特异性序列的方法最常见的是实时荧光逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法。TaqMan探针是实时荧光定量RT—PCR技术中一种常用探针（如图1），其V末端连接荧光基团（R），3'末端连接淬灭剂（Q）。当探针完整时，R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在PCR扩增过程中，当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q，R发出的荧光信号被相应仪器检测到，荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步（如图2）。请据图回答：

(1)结合图1和图2分析，因PCR反应模板仅为_____________，“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中通常都应该含有__________酶、____________酶、TaqMan探针、引物、dNTP、Mg²⁺、缓冲体系等。
(2)若反应体系中存在靶序列，则TaqMan探针与____________结合，PCR反应时，___________酶沿模板利用外切酶的活性将探针酶切水解，放出游离的R和Q，R发出荧光信号。根据：TaqMan探针功能分析，探针中碱基序列的设计应主要依据_________________。
(3)每扩增一条DNA链，就有_________个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数（Ct值）与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越_________。
(4)虽然荧光RT-PCR是当前被广泛认可的检测手段之一，但是不断有“假阴性”现象报道，通过上述过程分析，“假阴性”的可能原因有_________（填字母）。
a．通过咽拭子取样不规范或取样所获样本量不足
b．在样本运输、检测中出现了损坏和污染
c．病毒核酸关键序列发生突变

6 . 某些机体可对环境中的花粉发生过敏反应。反应过程中产生的组织胺可与靶细胞膜上的受体相结合，最终导致人体出现皮肤红肿、哮喘、过敏性休克等症状。下图表示其中的部分过程，请据图分析回答：

(1)免疫系统三大基本功能是________________________，过敏反应是其中之一的异常表现。如图所示B细胞受到该种花粉刺激后增殖、分化产生的细胞称为_________，该细胞产生的抗体与肥大细胞膜上的特异性受体相结合后，机体进入致敏状态。
(2)当同种花粉再次侵入机体，可与肥大细胞表面的_________发生特异性结合，促使肥大细胞释放组织胺。组织胺可引起毛细血管通透性增大，血浆蛋白渗出，从而出现局部皮肤红肿等症状。抗过敏药物可以减轻过敏症状，其作用的机理可能是_________。
A. 与抗体结合，阻断抗原抗体反应        
B. 稳定肥大细胞，阻止其释放组织胺
C. 与组织胺竞争受体结合位点               
D．杀菌消炎，使过敏原失去活性
E.抑制中枢神经系统的兴奋性
(3)研究发现，新型冠状病毒COVID-19可通过飞沫、气溶胶和密切接触等方式在人群中传播，引起人体发热、肺部严重感染、呼吸困难等症状，对身体健康危害极大。新型冠状病毒COVID-19引起炎症反应，进一步刺激位于_________的体温调节中枢，通过促进甲状腺激素分泌使细胞呼吸增强等途径增加机体产热，通过_______________________等途径减少机体散热，进而使体温升高。
(4)艾滋病（AIDS），是由于机体感染人类免疫缺陷病毒（HIV）而引发的全身性疾病，男女均可发病。该病属于免疫失调中的_________。以下可能传播艾滋病的是：_____。
A．纹身纹眉时与别人共用器械 B．与艾滋病患者拥抱、接吻、共用同一个马桶C．哺乳D．叮咬过艾滋病患者的蚊蝇叮咬正常人E. 与艾滋病病人共用剃须刀F.   避免注射吸毒

7 . 新冠病毒（SARS-CoV-2）引起的疫情仍在一些国家和地区肆虐，接种疫苗是控制全球疫情的最有效手段。新冠病毒疫苗有多种，其中我国科学家已研发出的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗，其基本制备步骤是：将新冠病毒的S基因连接到位于载体上的腺病毒基因组DNA中，重组载体经扩增后转入特定动物细胞，进而获得重组腺病毒并制成疫苗。
(1)新冠病毒是RNA病毒，一般要先通过逆转录得到______________，再经______________获取S基因，酶切后再连接到载体。
(2)重组疫苗中的S基因应编码_______________。

A．催化病毒核酸复制的酶	B．与病毒核酸结合的蛋白
C．病毒与细胞识别的蛋白	D．帮助病毒组装的蛋白

(3)为保证安全性，制备重组疫苗时删除了腺病毒的某些基因，使其在人体中无法增殖，但重组疫苗仍然可以诱发人体产生针对新冠病毒的特异性免疫应答。该疫苗发挥作用的过程是：接种疫苗→______________→表达抗原→______________。

8 . 接种新冠疫苗是阻断新冠病毒流行的主要手段之一。经研究表明，在接种第二针疫苗6个月之后，抗体浓度逐渐降低至保护浓度之下，应及时接种加强针。若提早或者延迟接种加强针，都会降低疫苗的效果。若以血清抗体浓度作为疫苗效果的检测指标，为了验证上述观点，请完善实验思路，预测实验结果，并进行分析和讨论。
实验材料和试剂：若干完成第二针疫苗注射的相同日龄和性别的健康小白鼠，新冠疫苗加强针，生理盐，水饲料。
（要求与说明：抗体浓度检测具体方法不做要求；不考虑注射操作对实验结果的影响。）回答下列问题：
(1)完善实验思路：
①将完成第二针疫苗注射的相同日龄和性别的健康小白鼠随机均分为4组，分别编号A-D，______。
②实验分组设计（可提前或延迟3个月注射加强针）。
A组：健康小白鼠+第6个月注生理盐水；
B组：_______；
C组：健康小白鼠+第6个月注射新冠疫苗加强针；
D组：_______；
③每隔一段时间跟踪测定各组的血清抗体浓度变化。
④对实验数据进行统计分析。
(2)预测实验结果（以坐标曲线图形式表示实验结果）：_________。
(3)新型冠状病毒在人体成熟的红细胞中 _______（填“能”或“不能”）增殖，原因是________。
(4)分析与讨论：
①抗体浓度通常以抗体滴度表示。抗体滴度用来衡量某种抗体识别特定抗原决定部位所需要的最低浓度（也即最大稀释度）：将免疫后血清按不同倍数稀释，能够有效中和抗原的抗体最高稀释倍数就是抗体滴度。如检出的抗体滴度为100，则表示只要血清的稀释度不超过1/100（1份比例的血清和99份比例的稀释液），就能得到阳性结果。据此原理，抗体滴度值越大，血清中抗体的浓度________。
②注射加强针对抗体滴度的提升效果十分明显，原因是_______。

9 . 回答下列(一)、(二)小题：
(一) 红曲霉合成的红曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者进行了红曲色素的提取实验，流程如下：

(1)取红曲霉菌种斜面，加适量____洗下菌苔。制成菌悬液并培养，解除休眠获得____的菌种。经液体发酵，收集红曲霉菌丝体，红曲霉菌丝体与70%乙醇溶液混合，经浸提、____，获得的上清液即为红曲色素提取液。
(2)生产上提取红曲色素后的残渣，需经___后才可作为饲料添加剂或有机肥，这属于废弃物的无害化和资源化处理。
(二) 我国在新冠疫情防控方面取得了显著的成绩，但全球疫情形势仍然非常严峻，尤其是病毒出现了新变异株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。
(3)新冠病毒核酸定性检测原理是：以新冠病毒的单链 RNA为模板，利用_______酶合成DNA，经 PCR扩增，然后在扩增产物中加入特定的_________，如果检测到特定的杂交分子，则核酸检测为阳性。
(4)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是：将腺病毒的复制基因敲除；以新冠病毒的_____基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组，构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原，从而引发特异性免疫反应。在此过程中，腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的_____。将腺病毒复制基因敲除的目的是___________________。
(5)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备原理是：取免疫阳性小鼠的_____细胞与骨髓瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比，杂交瘤细胞的扩大培养通常需要加入_____等一些天然成分。

10 . 新型冠状病毒（SARS-CoV-2）隶属于β型冠状病毒，遗传物质为单链RNA。为应对由SARS-CoV-2引起的全球性疫情，不同的科研人员开展了相关研究。
(1)新冠病毒的检测方法主要有核酸检测、抗体检测、抗原检测三大类。

①核酸检测法如图1 所示，因新冠病毒的RNA不能直接进行 PCR 扩增，必须先经过________成为 DNA，PCR 扩增每次循环一般分为三步，其中耐高温的 DNA 聚合酶参与的步骤是________。
②间接免疫荧光法如图2所示∶把SARS-CoV-2的标本固定在玻片上，然后将待测病人的血清滴在玻片上，特异性抗体与标本中抗原反应后，再加入荧光素标记的第二抗体（与第一抗体特异性结合），洗涤后在荧光显微镜下观察。若______________，则说明待测病人为新 冠肺炎病毒感染者。
(2)疫苗接种是当前新冠肺炎疫情防控工作的一项重要举措，我国科学家研发了多种新冠疫苗，其中重组腺病毒疫苗研发策略是：将新冠病毒的 S蛋白基因整合到腺病毒 DNA中，形成表达 S蛋白的重组腺病毒，注射到健康人体内，腺病毒可侵染人体细胞，达到预防新冠 病毒感染的效果。
①与直接将 S 蛋白注射到体内作为疫苗相比，重组腺病毒疫苗的优点是可以引起人体产生__________免疫，更有效清除病毒。
②为了构建重组腺病毒DNA，需要将S蛋白基因插入腺病毒DNA中，由于腺病毒DNA分子较大，传统的限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理效率较低，所以采取如图1所示方法获得重组腺病毒DNA。

将质粒1和质粒2共同导入受体细胞中，据图推测，最终重组线性DNA分子上，X所示的原件应该为_____________。启动子的作用是________识别和结合的部位，有了它才能________。
③生产疫苗的过程是将上述重组线性DNA分子（不编码病毒复制必需的E₁蛋白）导入到293细胞系（该细胞系可表达人体细胞没有的E₁蛋白），最终包装成完整的腺病毒。这种方式生产的疫苗由于重组腺病毒______________________，从而提高了疫苗的安全性。
④为了检测疫苗的效果，科学家用不同方式给雪貂接种重组腺病毒疫苗后，感染新冠病毒，一段时间后检测新冠病毒含量，结果如图2，说明重组腺病毒疫苗_______________，且效 果最好的免疫方式是______________。