1 . 蛋白质是活细胞中含量最多的有机物，是生命活动的主要承担者。下图表示某种天然蛋白质经高温加热后发生的变化。请回答下列问题：

（1）据图分析，与天然蛋白质相比，经高温加热后的变性蛋白质中的肽键数目_______________（填“发生”或“不发生”）变化。有同学认为鸡蛋煮熟了吃比生吃更容易消化，理由是________________。
（2）层粘连蛋白是基底层的重要且具有生物活性的部分，影响细胞分化、迁移和黏附。层粘连蛋白是由m个氨基酸构成的异源三聚体蛋白，是由三条不同的αβ和γ链构成的糖蛋白。该层粘连蛋白是在________（填“游离的核糖体”或“内质网上的核糖体”）上合成的，其内含有_______个肽键。若该层粘连蛋白被彻底水解，则其终产物是__________。
（3）研究发现，层粘连蛋白缺陷会导致肌肉形成异常、肾脏滤过器缺陷（肾病综合征）等。若某人是因层粘连蛋白导致的肾脏滤过器缺陷，则医学上，可用___________试剂检验尿液以进行初步疾病诊断。

2 . M 基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：

（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是_________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的_________断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_________。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_________。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为_________（答出两点即可），功能上具有_________。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的_________淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M 基因是否失活的实验思路_________。