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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:376 题号:12215651
已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下,请回答下列问题:

(1)实验步骤①所代表的过程需要__________________酶催化。
(2)步骤②构建重组DNA分子A和重组DNA分子B必须使用限制性核酸内切酶和____________酶,后者的作用是将限制性核酸内切酶切割的______________________________________________连接起来。
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其主要原因是S基因在大肠杆菌中不能_________________,也不能__________________
(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用_________________________________进行抗原—抗体特异性反应实验,从而得出结论。
(5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”),根本原因是_____________________________________

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

(1)htPA基因与载体用_________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其__________。采集的精子需要经过________才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,该过程的生殖方式是__________
(4)若检测到转ht-PA基因母羊_________,说明目的基因成功表达。
2016-12-12更新 | 103次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐2】将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

表几种限制酶识别列及切割位点数

限制酶

Abul

Ecor I

PstⅠ

SmaⅠ

切割位点


请根据以上图表回答下列问题:
(1)根据表,图步骤③所用的DNA连接酶对所连接的平末端两端的碱基序列是否有专一性要求?_________(填“有”或者“没有”)。限制酶断开的化学键名称是________________________
(2)图步骤⑤中用_________处理农杆菌,使其成为___________细胞。农杆菌转化法的原理是:在农杆菌的Ti质粒上存在________________片段,它具有可以整合到受体细胞____________________的特点,使目的基因进入植物细胞并稳定维持和表达。
(3)画出用PstI酶切得到的两个黏性末端___________________________
(4)对符合设计要求的重组质粒 T 进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开, 请根据图中标示的酶切位点和表所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。
①采用 EcoRⅠ和 PstⅠ酶切,得到_______种 DNA 片段。
②采用 EcoRⅠ和 SmaⅠ酶切,得到_______种 DNA 片段。
2021-04-28更新 | 149次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。

(1)基因工程中使用的限制酶,其特点是_________
(2)将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有____
①X-1   ②X-2 ③X-3   ④X-4
(3)若将上图所示X—1、X—2、X—3、X—4四种质粒导入大肠杆菌,然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有____________
(4)如果X-1用E1酶切,产生850对碱基和3550对碱基两种片段:那么质粒X-2(Tcr基因的长度为1200对碱基)用E2酶切后的片段长度为____________对碱基。
2016-11-26更新 | 79次组卷
共计 平均难度:一般