【推荐1】我国生活饮用水卫生标准规定：接种1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37℃、24h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：
（1）用三角瓶取水样前，可采用_________________(填灭菌方法)对三角瓶灭菌；取水池的水龙头用酒精擦拭后，再通过___________________的方法灭菌；在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑____________和渗透压等条件。
（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上培养，培养时应将平板倒置，其目的是________________________________，经过24h培养，得到结果为：平板1中41个菌落、平板2中35个菌落、平板3中38个菌落，则所取水样测定结果_____________ (填 “符合”或“不符合”)饮用水的标准。
（3）若要鉴别水样中大肠杆菌，培养基中还应加入的非营养物是__________________，若要长时间保存大肠杆菌，可以采用________________________；使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止____________________________________。

【推荐2】无菌操作是微生物接种技术的关键：传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：

(1)下列各项哪些适用于消毒处理_____。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿
⑥接种环⑦培养基⑧果汁 ⑨酱油     ⑩手术刀

A．①②③⑧⑨

B．④⑤⑥⑦⑩

C．①②③④⑤⑥⑧

D．以上全部

(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_____，倒平板前要进行_____。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
(3)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_____。上图是利用_____法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前接种环要_____；冷却后从上一区划线末端开始划：首尾区_____。
(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是_____，观察培养基上是否有菌落产生。
(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_____。
(6)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素。结果发酵失败，原因是_____。

【推荐3】解磷微生物能分解有机磷，可降低水体富营养化程度。下图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意图，下表是分离纯化的结果。请回答下列问题：

记录项目：透明圈直径/菌落直径

菌落编号	1	2	3
48小时	1.6	2.8	3.0
72小时	2.2	1.2	5.0
96小时	2.3	1.2	4.2

(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液，其中__________主要提供有机磷。从土壤中富集解磷微生物时，应选用___________ (固体、液体)培养基。
(2)在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是________________。配制成l0^-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有__________mL无菌水的试管中，并依次配制10^-2～10^-10的梯度稀释液。
(3)过程②、③为菌种分离纯化的过程，接种方法分为____________、_____________。
(4)分析菌种的分离纯化结果，应选择为_____号菌落进行扩大生产，原因是_______________。

【推荐1】科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8，并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。

(1)配制好的培养基通常采用的灭菌方法是___。实验小组为获得耐盐纯培养物，使用的培养基应是___（选填“普通培养基”或“选择培养基”），使用的接种方法是___。
(2)要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入___，挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为___。

(3)培养基a的作用是___，b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，根据菌落直径和透明圈直径大小，初步判断___的菌落为产酶能力较高的菌株。
(4)He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选，因为He-Ne激光照射引起的变异具有不定向的特征。最后获得的纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵，摇瓶培养的目的是___和___。

【推荐2】（二）回答下列有关微生物的问题。
自生固氮菌是在土壤中能够独立进行固氮的细菌，对于增加土壤中的氮素有重要意义。某研究小组按照下列实验方案（如图）从土壤中分离自生固氮菌株。

1．下列属于自生固氮菌生物学特征的是__________。

A．具有质膜和核糖体	B．厌氧型细菌
C．所需能量由自身的线粒体提供	D．单细胞真核生物

2．按功能分，Ⅰ号培养基称为__________培养基；该培养基中应有的营养成分（仅列出了碳氮源）为___________。

A．葡萄糖、硫酸铵

B．葡萄糖

C．牛肉膏、蛋白胨

D．牛肉膏

3．从配制培养基到制备平板的过程中，不需要的是__________。

A．酒精灯

B．接种环

C．灭菌锅

D．玻璃棒

4．接种后的平板放在28℃恒温箱培养3-4天，通过观察__________的特征可统计自生固氮菌的种类，但培养时间不宜过长的原因是___________。
草甘膦是目前农业上广泛使用的一种除草剂，其田间推荐使用的中间浓度为C，但未考虑它对固氮微生物的影响，研究小组采用“抑菌圈法”对此开展研究（见如表），以期为农田合理使用草甘膦提供理论依据。
5．补全表中的实验方案：
如表草甘膦的抑菌圈直径比较

_____________

【推荐3】某课题小组的研究性学习课题是“探究影响细菌生长繁殖的因素”。他们在培养细菌的过程中发现了某种细菌(记作X)的周围其他细菌的生长繁殖受到抑制。他们把X细菌接种到专门的培养基上培养，一段时间后除去X细菌，用该培养基再培养其他细菌，结果其他细菌仍然不能生长和繁殖。据以上材料回答下列问题：
(1)从生态学的角度分析，X细菌与其周围细菌之间的关系称为______________。
(2)培养该细菌的培养基的基本营养物质包括_____________________________，该小组成员在使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应的温度，最可能的原因是_________________________________________；
(3)X细菌周围的其他细菌不能生长和繁殖的原因最可能是___________________。
(4)为验证（3）中的原因进行了如下实验。请参照上述题目中给出的有关材料，补充相关的实验。实验步骤：
第一步：取两个培养皿，按相同营养成分配制成甲、乙两个培养基。
第二步：______________________。
第三步：______________________。
第四步：在相同条件下，让甲、乙两个培养基上的细菌生长繁殖。
实验结果：__________________________，___________________________。

【推荐1】酸奶因营养丰富和口感美味而深受大众喜爱，且含有活性乳酸菌，对身体大有益处。常见的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌属。现采用如下步骤对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离：
酸奶→选择适宜稀释度→涂布MRS琼脂培养基→适宜温度培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板或MC琼脂平板→菌种鉴定→接种MRS液体培养基→菌种保藏
请回答下列有关问题：
(1)制备MRS琼脂培养基时，采用___________法灭菌15～20 min。
(2)倒平板操作时，应在_________附近进行，待平板冷凝后将平板倒置的目的是__________。
(3)制备稀释液时，先将酸奶样品充分摇匀，以无菌吸管吸取样品________mL放入装有225 mL无菌水的锥形瓶中，充分振荡，制成1∶10的样品液。
(4)培养一段时间后，从MRS固体培养基上挑取多个单菌落，使用______法接种于MC琼脂平板或MRS琼脂平板上，于36±1 ℃_____（填“无氧”或“有氧”）条件下倒置培养48 h后，再挑取单个菌落进行菌种鉴定。
(5)菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是__________。

【推荐2】幽门螺杆菌是引起胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等疾病的“罪魁祸首”。下图是幽门螺杆菌结构模式图。请回答：

(1)幽门螺杆菌与酵母菌比较，二者共有的结构是________（填序号）；二者的主要区别在于幽门螺杆菌_______________________________________。
(2)沃伦和马歇尔用高倍显微镜观察慢性胃炎活体标本时，意外地发现了某种细菌，而且这种细菌总是出现在慢性胃炎标本中，而在正常的胃窦黏膜中则无这种细菌。他们根据这一现象，提出了关于慢性胃炎病因的假设。该假设最可能是__________________________________。
(3)为了进一步探究影响幽门螺杆菌生长繁殖的因素，某研究性学习小组在培养该菌过程中，发现了在某种细菌（简称W菌）的周围，幽门螺杆菌的生长繁殖受到抑制。他们把W菌接种在专门的培养基上培养，一段时间后，除去W菌，在此培养基上再培养幽门螺杆菌，结果是幽门螺杆菌仍然不能正常生长繁殖。
①据材料分析，研究小组的同学对“造成W菌周围的幽门螺杆菌不能正常生长繁殖”的原因最可能的假设是________。
②试参照上述材料设计实验验证①中的假设。
A．方法步骤：
a．制备培养基：取两个培养皿，按相同的营养成分配制成甲、乙两个培养基。
b．设置对照：在甲培养基上________W菌，乙培养基上________W菌，相同条件下培养一段时间后，除去________培养基上的W菌。
c．接种幽门螺杆菌：在甲、乙两培养基上分别接种相同的幽门螺杆菌。
d．培养观察：在________的条件下培养甲、乙两个培养基上的幽门螺杆菌。
B．实验结果：
________培养基上的幽门螺杆菌的生长繁殖受到抑制，不能正常繁殖，而________培养基上的幽门螺杆菌的生长繁殖不受抑制，正常繁殖。

【推荐3】Ⅰ.甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，其风味受发酵过程中微生物产生的代谢产物的影响。其生产工艺如图所示。

(1)从蚕豆瓣到甜瓣子，蚕豆中的成分会发生一定的变化，其中的蛋白质转变为______________，发酵过程中优势微生物为米曲霉，属于______________（填“真菌”或“细菌”），该发酵过程需要控制的发酵条件有______________（答出两点即可）。
(2)甜瓣子制作过程中，加盐水的作用是______________。
(3)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是______________。
Ⅱ.产脂肪酶酵母可用于含油污水处理。欲从土壤中筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
(4)按照表格内容，围绕微生物实验室培养中的无菌技术，完成下表：①______________②______________。

灭菌（消毒）对象	培养基	①	培养皿	实验操作者的双手
灭菌（消毒）方法	高压蒸汽	火焰灼烧	②	75%酒精

(5)称取1.0g土壤样品，转入99mＬ无菌水中，制备成菌悬液，经______________后，获得细胞密度不同的菌悬液。实验中初步估测菌悬液中细菌细胞数为2×10⁷个/mＬ，若要在每个平板上涂布100μＬ稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将菌悬液稀释______________倍。
(6)实验室中纯化产脂肪酶酵母常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，这两种接种方法的不同之处是______________。

【推荐2】农作物光合作用产物有一半以上存在于秸秆中，木质素是存在于植物纤维中的一种有机物，其分解与陆地上碳循环密切相关。已知木质素降解后能与愈创木酚反应生成棕红色或棕褐色的轮环。下图为木质素降解菌分离筛选方案流程图。回答下列问题。
   
(1)配制的培养基需用___________法灭菌，检测灭菌效果的常用做法是___________。
(2)配制的固体培养基应以___________为唯一碳源筛选木质素降解菌。实验结果表明，在固体培养基上出现了两种形态等特征不同的菌落A和B，为进一步判断菌种A和B降解木质素能力的强弱，请写出简要的实验思路：___________。
(3)为了解土壤中木质素降解菌的数量，取10g土样加入90mL无菌水，充分混匀后，进行等比稀释，将0.1mL稀释液接种于培养基上，10⁵倍稀释对应的三个平板上菌落数分别是138、140、148，则每克土样中木质素降解菌数量为___________个。该计算结果与真实值相比偏小，原因可能是___________。

【推荐3】大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，便菌落呈紫黑色。检测水样是否符合饮用水卫生标准时，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目，流程如图所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝培养基（EMB培养基）上培养一统计菌落数目。

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是_________。
(2)从功能上划分，EMB培养基属于__________培养基，为检测该培养基灭菌是否彻底，对于该培养基应采用的检测方法是_________。
(3)为检测严重污染的水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板中，应选择颜色为_________的菌落进行计数。该方法通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是__________。
(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可以测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是__________。另一份来自湖泊，若要通过测量蓝藻的数目来研究“水华”，则培养基配方中必须添加__________（从“水”“无机盐”“碳源”“氮源”中选填）。