农作物光合作用产物有一半以上存在于秸秆中,木质素是存在于植物纤维中的一种有机物,其分解与陆地上碳循环密切相关。已知木质素降解后能与愈创木酚反应生成棕红色或棕褐色的轮环。下图为木质素降解菌分离筛选方案流程图。回答下列问题。
(1)配制的培养基需用___________ 法灭菌,检测灭菌效果的常用做法是___________ 。
(2)配制的固体培养基应以___________ 为唯一碳源筛选木质素降解菌。实验结果表明,在固体培养基上出现了两种形态等特征不同的菌落A和B,为进一步判断菌种A和B降解木质素能力的强弱,请写出简要的实验思路:___________ 。
(3)为了解土壤中木质素降解菌的数量,取10g土样加入90mL无菌水,充分混匀后,进行等比稀释,将0.1mL稀释液接种于培养基上,105倍稀释对应的三个平板上菌落数分别是138、140、148,则每克土样中木质素降解菌数量为___________ 个。该计算结果与真实值相比偏小,原因可能是___________ 。
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(1)配制的培养基需用
(2)配制的固体培养基应以
(3)为了解土壤中木质素降解菌的数量,取10g土样加入90mL无菌水,充分混匀后,进行等比稀释,将0.1mL稀释液接种于培养基上,105倍稀释对应的三个平板上菌落数分别是138、140、148,则每克土样中木质素降解菌数量为
更新时间:2023-07-23 08:34:11
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解题方法
【推荐1】有报道,解钾和解磷微生物可以分解土壤中难溶性的钾和磷,提高土壤可溶性钾和磷的含量。现从某“样地”称取10g供试土壤,先将土壤浸出液梯度稀释,然后吸取3μL菌液接种(第一次)在特定培养基上,根据解钾和解磷水解圈大小筛选出C8和B4两种菌株。将筛选出的两种菌株接种(第二次)在相应培养基并检测培养基中可溶性钾和磷的含量,结果如下表,请回答下列问题:
(1)取供试土壤时,应从________ 的环境中取土样;筛选解钾和解磷的培养基中需要有________ (答出4种即可)等营养物质。
(2)第一次接种的方法为________ ,该方法也可用来统计样品中的活菌数,其原理是________ 。计数时,应选择菌落数为________ 之间的平板进行统计。
(3)依表格信息,应选________ (填“C8”或“B4”)作为可高效解钾和解磷的菌种,选择该菌种的理由是________ 。
菌株编号 | 可溶性钾含量(μg﹒mL-1) | 可溶性无机磷含量(μg﹒mL-1) | 可溶性有机磷含量(μg﹒mL-1) |
C8 | 27.37 | 10.27 | 26.31 |
B4 | 0 | 0 | 29.38 |
(2)第一次接种的方法为
(3)依表格信息,应选
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【推荐2】为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/4/12/2440013396426752/2440108815097856/STEM/60dfe6f6-0cd6-4b57-a62d-c146ee678c18.png)
请分析回答下列问题:
(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加入适量的_______ 和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是_______ 。
(2)接种微生物的方法有很多,图中过程①②③所示的方法为_______________ 。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是_________________ 。用该方法统计样本菌落数后,所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=_____________ (4或5或6)。经正确操作培养后,3个平板上的菌落数分别为150、158和157。据此可得出每毫升样品中的活菌数_______ (填“至多”或“至少”)为________ 个。
(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:
步骤1:分别取______________________________ 加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到50°C左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。
步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
步骤3:将接种后的三组培养基和一个________ 都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。
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请分析回答下列问题:
(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加入适量的
(2)接种微生物的方法有很多,图中过程①②③所示的方法为
(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:
步骤1:分别取
步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
步骤3:将接种后的三组培养基和一个
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解题方法
【推荐3】近年来,水环境中发现的不同程度的抗生素残留,不仅威胁水生生物的生存,还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星(OFL)(C18H20FN3O4)是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物,某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株X。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题:__________________ 。
(2)富集培养基中只能以OFL作为唯一碳源或氮源,其原因是________________________ 。用于培养菌株X的固体培养基含有水、蛋白胨、酵母提取物和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为菌株X提供氮源、__________________ (答出2点)。
(3)过程Ⅲ使用的接种方法是____________ ,过程Ⅱ中的总稀释次数为8次,在过程Ⅲ中,可以每隔24h统计一次菌落的数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154,由此推测培养液A中该菌的数量为______ 个·mL-1,使用该方法可以计数的原因是__________________ 。
(4)该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株X降解OFL能力的影响,进行了相关的实验。请简要写出实验思路:________________________ 。
(2)富集培养基中只能以OFL作为唯一碳源或氮源,其原因是
(3)过程Ⅲ使用的接种方法是
(4)该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株X降解OFL能力的影响,进行了相关的实验。请简要写出实验思路:
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【推荐1】[生物——选修1:生物技术实践]
人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面,有效防止了海洋生物附着生长,但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海,对多种生物造成毒害。现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物。回答下列问题:
(1)为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种,可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样,并应选用以__ 为碳源的培养基进行选择培养。除含有碳源外,培养基还应含有________________ 、_______________ 、无机盐和蒸馏水等。
(2)实验过程中,玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌,原因是_________ 。
(3)常用的微生物接种方法有两种,但只有_____________________ 可用于微生物的计数,运用该方法计数的结果往往比实际数目_______ (填“高”或“低”)。在平板划线操作中,接种环在使用前要先灼烧,其目的是__________________________ ,第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,其目的是________________________________ 。
(4)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时,则应选择微生物_______ 作为菌种进行后续培养。
人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面,有效防止了海洋生物附着生长,但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海,对多种生物造成毒害。现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物。回答下列问题:
(1)为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种,可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样,并应选用以
(2)实验过程中,玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌,原因是
(3)常用的微生物接种方法有两种,但只有
(4)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时,则应选择微生物
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【推荐2】为了研究“某酸奶中乳酸菌耐药情况”而制定的流程图,请分析回答:_____ (生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从功能角度分析,本研究使用的培养基属于_____ 。
(2)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须_____ ,以保证锅内气压上升,达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后,在_____ 附近倒平板。
(3)在酸奶制作过程中要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,通常所指的发酵条件包括_____ (至少写出两项)。一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶,原因是_____ 。
(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤:
步骤1:分别取_____ 加入灭菌后冷却至50℃左右的三组无菌培养皿的培养基中,立即混匀,静置凝固成平板。
步骤2:向三组培养基中分别接种等量相同的待检测的乳酸菌菌种。
步骤3:将接种后的三组培养基都置于适宜温度等条件下培养若干天,观察比较培养基中菌落生长情况。
(2)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须
(3)在酸奶制作过程中要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,通常所指的发酵条件包括
(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤:
步骤1:分别取
步骤2:向三组培养基中分别接种等量相同的待检测的乳酸菌菌种。
步骤3:将接种后的三组培养基都置于适宜温度等条件下培养若干天,观察比较培养基中菌落生长情况。
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【推荐3】下图为传统酿酒的工艺流程图:
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根据对微生物发酵原理以及操作原理的理解回答下列问题:
(1)在酿酒前对粮食种子(多为高粱)要进行适当粉碎成小颗粒状态,但是并不磨成面粉状态,这样做的原因是既要增大微生物与粮食中有机物的接触面,又要有一定透气性便于接种发酵和蒸馏,第二步高温蒸汽条件下蒸一段时间,其目的一方面是_____________________ ,另一方面“糖化”的含义是________________________________________ 。
(2)第三步为什么晾至35 ℃左右时才可向粮食中加曲?__________________________ 。
“加曲”实际上相当于向培养基中__________________ 。
(3)密封后在酒缸中发酵12天左右,此间温度基本保持在____________ ℃,原因是此温度是酵母菌等酿酒微生物的________________ 。
(4)发酵好后需要用蒸馏法获得酒精,蒸馏的温度应控制在78 ℃,原因是______________________________ 。蒸馏出的原浆酒酒精浓度高达95%以上,但成品白酒一般酒精浓度为40~60度,“勾兑”的作用是向原浆酒中加水稀释,因此名酒产地要有好的水源地。
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根据对微生物发酵原理以及操作原理的理解回答下列问题:
(1)在酿酒前对粮食种子(多为高粱)要进行适当粉碎成小颗粒状态,但是并不磨成面粉状态,这样做的原因是既要增大微生物与粮食中有机物的接触面,又要有一定透气性便于接种发酵和蒸馏,第二步高温蒸汽条件下蒸一段时间,其目的一方面是
(2)第三步为什么晾至35 ℃左右时才可向粮食中加曲?
“加曲”实际上相当于向培养基中
(3)密封后在酒缸中发酵12天左右,此间温度基本保持在
(4)发酵好后需要用蒸馏法获得酒精,蒸馏的温度应控制在78 ℃,原因是
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【推荐1】目前可溶性磷元素的缺乏已经成为制约植物生长的关键因素。解磷菌可以将土壤中难溶性的无机磷分解成可溶性的无机磷供植物吸收利用,目前的研究主要集中在常温下解磷菌筛选,而在低温环境下这些解磷菌则不能发挥作用。科员人员从南极企鹅岛土壤中尝试筛选耐低温的解磷菌,请回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/4/16/2d103c1a-fe20-4aa8-aa2f-a682ef9a0653.png?resizew=615)
(1)常规微生物实验中,常用______ 法对培养基进行灭菌。选择从南极企鹅岛土壤分离耐低温的解磷菌的原因是______ 。
(2)步骤④中的培养基的成分是:葡萄糖、(NH4)2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4•7H2O、MnSO4、Ca3(PO4)2、琼脂粉等,其中做氮源的是______ ,琼脂粉作为______ 。
(3)步骤⑤是将具有明显溶磷圈的菌落多次重复______ 法以得到纯净的单一菌落,该过程使用的接种工具是______ 。
(4)初步筛选出3种能够在10℃条件下溶解无机磷培养基中难溶性无机磷而产生溶磷圈的低温解磷菌,结果如图1,根据图1可知三株菌株中______ 的解磷能力最强,判断的理由是______ 。
(5)将初步筛选出的3株解磷细菌在液体培养基中进行复筛,180r/min的转速培养3d后菌液中的可溶性磷含量即可达到最高值,最高值的结果如图2,复筛的培养温度为______ ,根据实验结果可知______ 为最佳目标菌株。
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(1)常规微生物实验中,常用
(2)步骤④中的培养基的成分是:葡萄糖、(NH4)2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4•7H2O、MnSO4、Ca3(PO4)2、琼脂粉等,其中做氮源的是
(3)步骤⑤是将具有明显溶磷圈的菌落多次重复
(4)初步筛选出3种能够在10℃条件下溶解无机磷培养基中难溶性无机磷而产生溶磷圈的低温解磷菌,结果如图1,根据图1可知三株菌株中
(5)将初步筛选出的3株解磷细菌在液体培养基中进行复筛,180r/min的转速培养3d后菌液中的可溶性磷含量即可达到最高值,最高值的结果如图2,复筛的培养温度为
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【推荐2】我国生活饮用水水质标准(GB5749—85)中规定生活饮用水中大肠杆菌不得大于3个/L。某兴趣小组使用EMB培养基从某种水中分离和鉴定大肠杆菌。回答下列问题。
(1)在实验室中对培养基进行灭菌时,常采用的方法是_______________ 。该方法与干热灭菌相比,特殊之处在于____________________________ 。
(2)EMB培养基的配方(见下表)中,乳糖的作用是_______________ 。在该培养基上生长的大肠杆菌菌落呈______________ 色。
(3)在接种前,为了检测培养基灭菌是否彻底,应如何处理?_______________ 。
(4)该组同学用滤膜法检测大肠杆菌数,大致流程如图所示。该流程一共过滤了10L水,最后在平板上形成了17个大肠杆菌的单菌落。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/10/8/2825045147320320/2831047342391296/STEM/3bf5b4e2a6004c4fa624f5d461ef01ae.png?resizew=406)
①单菌落指的是______________________________ 。该方法所统计样品中含大肠杆菌数往往偏低的原因是_______________________________ 。
②该种水_______________ (填“符合”或“不符合”)我国生活饮用水水质标准(GB5749—85)中对大肠杆菌的规定
(1)在实验室中对培养基进行灭菌时,常采用的方法是
(2)EMB培养基的配方(见下表)中,乳糖的作用是
蛋白胨 | 乳糖 | K2HPO4 | 2%伊红水溶液 | 0.5%美蓝水溶液 | pH | 琼脂 |
10g | 10g | 2g | 20mL | 13mL | 7.4 | 25g |
将上述物质溶解后,添加无菌水,定容至1000mL |
(3)在接种前,为了检测培养基灭菌是否彻底,应如何处理?
(4)该组同学用滤膜法检测大肠杆菌数,大致流程如图所示。该流程一共过滤了10L水,最后在平板上形成了17个大肠杆菌的单菌落。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/10/8/2825045147320320/2831047342391296/STEM/3bf5b4e2a6004c4fa624f5d461ef01ae.png?resizew=406)
①单菌落指的是
②该种水
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【推荐3】南昌进贤县有“酒乡”美称,是李渡酒古窖遗址所在地,距今有800多年的历史。百年老窖出好酒,酒的品质与发酵工艺和窖泥微生物密切相关。研究人员对明代窖窖泥和新窖窖泥微生物进行研究,图一是研究窖泥微生物的基本方法。请回答下列问题。
(1)李渡酒的酿造以优质大米为发酵的主要原料,先对原料进行蒸煮的主要目的是__ 。
(2)从微生物培养的角度看,培养基能够为微生物提供水、碳源、__________ 、__________ 等营养物质。
(3)对窖泥微生物中的酵母菌进行计数可用稀释涂布平板法,其原理是____ 。此外,还可利用显微镜进行___________ 。该方法利用特定的血细胞计数板(计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由25个中格组成,每个中格含16个小格)对其进行计数。将1g窖泥稀释106倍,经显微镜计数,结果为平均每个中方格的酵母菌数为60个,则1g窖泥中含有酵母菌__________ 个。
主要微生物类群数量检测结果表1 cfu/g
(4)研究人员检测明代窖窖泥和新窖窖泥微生物类群数量,获得表1的统计结果。通过比较明代窖窖泥和新窖窖泥微生物类群数量推测,提高新窖窖泥中____________ 微生物类群数量可以提升李渡酒的产量和品质。进一步研究发现明代窖窖泥需氧型细菌类群数量低于新窖窖泥,分析其可能的原因是:___________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/5/27/2f6212f1-8451-497d-ae33-56f21485fc81.png?resizew=545)
(1)李渡酒的酿造以优质大米为发酵的主要原料,先对原料进行蒸煮的主要目的是
(2)从微生物培养的角度看,培养基能够为微生物提供水、碳源、
(3)对窖泥微生物中的酵母菌进行计数可用稀释涂布平板法,其原理是
主要微生物类群数量检测结果表1 cfu/g
微生物种类 | 明代窖窖泥 | 新窖窖泥 |
细菌 | 5.22×107 | 2.21×106 |
霉菌 | 1.64×104 | 1.49×104 |
酵母菌 | 3.48×106 | 3.52×106 |
放线菌 | 1.43×105 | 1.55×105 |
(4)研究人员检测明代窖窖泥和新窖窖泥微生物类群数量,获得表1的统计结果。通过比较明代窖窖泥和新窖窖泥微生物类群数量推测,提高新窖窖泥中
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解题方法
【推荐1】饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的磷酸钙,很难被动物吸收利用。若在饲料中添加磷酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从土壤中分离产磷酸酶细菌菌株的过程示意图。回答下列问题:________ 后,获得细胞密度不同的细菌悬液。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1 mL涂布到三个培养基。一段时间后,菌落数分别是168、175、167个,则10 g土壤中含有此菌的菌体数是________ 。
(2)制备产磷酸酶的细菌菌株初筛平板时,需要将培养基的pH调至________ ,灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌磷酸钙粉末、充分混匀后倒平板,加入磷磷钙的目的是_____________________ ,达到检测菌种分泌磷酸酶的能力。实验结果显示A~E五种菌株中,________ 是产磷酸酶最理想的菌株。
(2)制备产磷酸酶的细菌菌株初筛平板时,需要将培养基的pH调至
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【推荐2】聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物,PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA,PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物,当PVA被分解时蓝绿色复合物消失,形成白色透明斑,请回答下列问题:
(1)下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方,X物质最可能为_____ 。培养基配制完成后通过__________ 法进行灭菌。
(2)若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后,取1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面,测得菌落数的平均值为180个,空白对照组平板上未出现菌落,则100mL原菌液中有PVA分解菌______ 个。该方法的测量值与实际值相比一般会偏小,其原因是_______________________________ 。
(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌,培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_______ 。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小,则需配制相同PVA浓度的培养基来培养不同菌株,一定时间后通过测定_________ 来确定不同菌株降解PVA能力的大小。
(1)下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方,X物质最可能为
成分 | MgSO4 | 蛋白质 | PVA溶液 | 水 | X物质 |
用量 | 5g | 10g | 1000mL | 7g | 20g |
(2)若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后,取1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面,测得菌落数的平均值为180个,空白对照组平板上未出现菌落,则100mL原菌液中有PVA分解菌
(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌,培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入
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【推荐3】金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性,在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下面是某研究小组测定某水样中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题。
(1)金黄色葡萄球菌的培养基为质量分数为7.5%的NaCl牛肉膏蛋白胨培养基,此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供________________ 。培养基中加入质量分数为7.5%的NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选,原因是________________ 。
(2)上述培养基的灭菌方法是____________ 。在制作血平板时需等平板______ 后,方可加入血液,以防止______________ 。
(3)现将10 mL菌液进行梯度稀释,依次稀释成10-1~10-4的四个稀释样液,再取四个稀释样液各0.2mL分别接种到4组血平板上(每组3个,每个接种0.2mL),所用方法是________ 。在血平板上,金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现____ 。若在10-3组的3个血平板上,金黄色葡萄球菌菌落数分别为35、36和37,则每升水样中的活菌数约为_______ 。
(1)金黄色葡萄球菌的培养基为质量分数为7.5%的NaCl牛肉膏蛋白胨培养基,此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供
(2)上述培养基的灭菌方法是
(3)现将10 mL菌液进行梯度稀释,依次稀释成10-1~10-4的四个稀释样液,再取四个稀释样液各0.2mL分别接种到4组血平板上(每组3个,每个接种0.2mL),所用方法是
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