【推荐1】面筋是由小麦中的蛋白质形成的，具有很高的强度和延展性，对面团的结构和面包的品质有着重要影响。小麦有三对等位基因（A/a，B₁/B₂，D₁/D₂）分别位于三对同源染色体上，控制合成不同类型的高分子量麦谷蛋白（HMW），从而影响面筋强度。科研人员以两种纯合小麦品种为亲本杂交得F₁，F₁自交得F₂，以期选育不同面筋强度的小麦品种。相关信息见下表。

基因	基因的表达产物（HMW）	亲本		F1	育种目标
		小偃6号	安农91168		强筋小麦	弱筋小麦
A	甲	+	+	+	+	-
B1	乙	-	+	+	-	+
B2	丙	+	-	+	+	-
D1	丁	+	-	+	-	+
D2	戊	-		+		-

注：“+”表示有相应表达产物；“-”表示无相应表达产物。
回答下列问题：
(1)在小麦细胞中，以mRNA为模板合成高分子量麦谷蛋白（HMW），mRNA的合成场所和执行功能的场所分别是____________（填“细胞核和细胞质”或“细胞质和核糖体”）。研究发现，基因D，发生突变后，其转录形成的mRNA上有一密码子发生改变，但翻译的多肽链氨基酸序列和数量不变，原因是_____________。
(2)在F₁植株上所结的F₂种子中，符合强筋小麦育种目标的种子所占比例为_________，符合弱筋小麦育种目标的种子所占比例为__________。
(3)序列分析发现a基因是A基因中插入了一段DNA，使A基因功能丧失。为获得纯合弱筋小麦品种，研究者选择F₂中含_________（多选，选“甲”、“乙”、“丙”、“丁”或“戊”）产物的植株，运用转基因技术，在A基因中插入一段DNA，培育新品种。

【推荐2】抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程，报告基因GUS只能在导入真核细胞后正确表达，在农杆菌中不能正确表达。报告基因GUS(含有内含子)，表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。

(1)基因工程的原理是____，基本操作步骤有____。
(2)科研人员研发了新的DNA重组方法——无缝克隆In-Fusion技术，如图2所示。In-Fusion酶能够识别任何具有相同15bp末端序列的线性DNA分子并使其形成黏性末端，据此实现目的基因和载体的连接。和传统方法比，无缝克隆In-Fusion技术的优点是____。

(3)农杆菌转化愈伤组织时，常用含除草剂的选择培养基筛选转化的愈伤组织。由于愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未成功转化的愈伤组织也可能在选择培养基上生长。针对上述现象，可以在选择培养基中同时加____进行筛选，其中周围的培养基____（“显”或“不显”）蓝色的愈伤组织是转化成功的，原因是____。

【推荐3】中国女科学家屠呦呦获2015年诺贝尔生理医学奖，她研制的抗疟药青蒿素挽救了数百万人的生命。研究人员已经弄清了野生青蒿（二倍体，体细胞染色体数为18）细胞中青蒿素的合成途径如图所示：

(1)野生青蒿生长受地域性限制，体内生成的青蒿素极少，科学家考虑采用_________________（育种方法），利用酵母细胞大量获得青蒿素，该育种方法的原理是_______________。
(2)与二倍体相比，多倍体植物通常茎秆粗壮，叶片较大，推测青蒿素的含量也高，故尝试用_____或____________方法处理二倍体青蒿，该过程的原理是______________，从而得到四倍体青蒿。
(3)四倍体青蒿与野生型青蒿______________（“是”或“不是”）同一物种，其原因是两者杂交所产生的子代，其体细胞中含有________条染色体、__________个染色体组，该子代是_________（“可育”或“不可育”）的。

【推荐1】回答下列关于遗传信息的表达和生物工程问题：
图（1）为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图（2）表示质粒，图（3）表示目的基因及限制酶切点。请回答下列问题：

（1）图（1）中限制酶EcoRⅠ的特点是______。
（2）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是______。
（3）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含______基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。按此要求，成功导入重组质粒的大肠杆菌具有的特点是______
A．能在含有青霉素的培养基上生长
B．能在含有四环素的培养基上生长
C．在含有青霉素的培养基上不能生长
D．在含有四环素的培养基上不能生长
（4）为了获得含重组质粒的单个大肠杆菌的菌落，常用的接种方法是______。
（5）若该目的基因合成的是脂肪酶，在生产提纯分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸铵使酶与其他杂质分离，该过程属于酶分离提纯步骤中的______。
A．过滤酶
B．干燥酶
C．层析酶
D．沉淀酶

【推荐2】市面销售的“蓝色妖姬”并不是真正的蓝玫瑰，是用对人体无害的染色剂浇灌快到花期的白玫瑰（或白月季）培育而成的。真正的蓝玫瑰，是将蓝三叶草的相关基因转入玫瑰后获得的。
（1）英语blue rose（蓝色玫瑰）有“不可能”之意，根本原因是正常玫瑰中缺少_____的基因。
（2）蓝三叶草中的某基因部分结构如图所示（a、b为不同酶的作用位点）。从图示看，限制酶作用的部位是_____（a或b），其识别的碱基序列为_____。

（3）将蓝三叶草的基因导入玫瑰体内前还需构建_____，其目的是_____。常用的导入方法是_____。
（4）研发过程中要检测玫瑰的DNA上是否插入了目的基因，常采用_____技术，如果显示出_____，就表明已经插入。

【推荐3】研究人员利用小鼠(2N＝40)的单倍体ES细胞(只含一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Amp^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo^r的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，图中③处的培养液应添加________________(填氨苄青霉素或G418 )。
（2）若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是和，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T₄DNA连接酶)。
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑葚胚的过程中细胞分裂方式是____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为________技术，该胚胎中每个细胞的体积变化是_______。
（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是________。
A．没有限制酶就无法使用质粒运载体
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达

【推荐1】重组工程是一项新型的基因操作技术，其基本原理是通过重组酶将特定的单链DNA片段与双链DNA分子在同源序列处重组，从而实现基因的敲除、替换和突变等修饰。图1表示DNA单链重组过程示意图，请回答问题：

(1)基因工程的核心工作是____________。
(2)图2是大肠杆菌pBR322﹣Red质粒的示意图。科研人员欲利用重组工程技术敲除该质粒上从ki1基因至N基因之间的DNA序列，设计的单链多核苷酸引物应为____________的连接序列（在①、②、③、④中选填）。

(3)将单链多核苷酸与含有pBR322-Red质粒的大肠杆菌感受态细胞混合、电击转化，在重组酶的作用下，理论上1%～6%的大肠杆菌会发生体内同源重组。已知线性化质粒无法转化大肠杆菌。为了从大肠杆菌混合物中筛选出发生重组的克隆，科研人员进行了下列操作。请完成表格相关内容。

目的	简要操作
扩大培养	①将大肠杆菌混合物全部转入含____________的液体培养基中
质粒提取、酶切	②提取质粒，选择限制酶____________进行处理
转化	③用酶切产物转化____________（“含有”或“不含有”）pBR322-Red质粒大肠杆菌的感受态细胞
鉴定、筛选	④菌落PCR技术、琼脂糖凝胶电泳

(4)PCR技术扩增目的基因的前提是____________，以便根据此前提合成引物。引物的作用是____________。
图3为用琼脂糖凝胶电泳对PCR结果进行鉴定，其中泳道____________（填“1”或“2”）对应的是ki1-N基因缺失的质粒。在电泳过程中，为了指示电泳进程，可以将PCR扩增产物与____________混合。

(5)常规的基因工程和重组工程都能将外源基因插入质粒。一般情况下，限制酶在质粒上存在多个作用位点，因此常规的基因工程技术构建重组质粒时会出现____________现象，而重组工程技术可以提高精准。

【推荐2】EPO是促红细胞生成素的英文简称，是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：

(1)从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到_______，再通过_______技术获得大量EPO基因。基因工程的核心步骤是_________________，图中①过程用到的工具酶有_________。
(2)为使供体母鼠超数排卵，需注射_____________激素以排出更多的卵子，卵子培养到________（时期）与获能的精子完成体外受精。
(3)采用_____________技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中。
(4)当胚胎发育至____________时期可进行胚胎移植，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_____________。
(5)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可采用________技术对血液进行检测。

【推荐3】番茄红素具有一定的抗癌效果果，但在番茄红素环化酶的催化作用下，易转化为胡萝卜素。科学家利用基因工程设计了重组DNA（质粒三），并导入番茄细胞，从而阻止番茄红素的转化，提高番茄红素的产量。下图为利用质粒一和目的基因构建重质粒三的过程示意图。请回答下列问题：

（1）该过程中用到的工具有____________，图中“目的基因”是____________基因。
（2）先构建“质粒二”的原因主要是利用质粒二中含有____________。利用限制酶BamHⅠ开环后去磷酸化的目的是____________，再用及Ecl酶切的目的是____________。
（3）质粒三导入受体细胞并表达后，形成双链RNA(发卡）的原因是____________。“发卡”在受体细胞内可以阻止____________过程，从而使基因“沉默”。