【推荐1】金黄色葡萄球菌作为一种引起食物中毒和造成人及动物感染的主要病原菌，可引起局部化脓感染。为了解饲料中金黄色葡萄球菌的污染率，减少仔猪金黄色葡萄球菌感染，某县畜牧兽医工作站科研人员在一家饲料厂随机采集40份仔猪颗粒料，对其进行了病原菌分离和鉴定。回答下列问题：
(1)仔猪颗粒料容易滋生微生物是因饲料中富含营养物，其实质相当于微生物培养实验中的______。
(2)病原检测方法：首先用无菌技术将仔猪颗粒料制成样液，进行适当的梯度稀释后，利用______法接种于已灭菌的培养基上。接种后，需要每隔24h统计一次菌落的数目，这样做的目的是______。
(3)病原鉴定方法：鉴定培养基是否灭菌彻底的操作是______；根据______可鉴别出培养基上不同的菌落。菌落计数时，一般选取菌落数为______的平板，该方法统计的菌落数量比实际活菌数目少，原因是______。
(4)已知金黄色葡萄球菌具有较强的耐盐性。为分离出仔猪颗粒料中的金黄色葡萄球菌，需要在培养基中加入______。

【推荐2】研究人员在某造纸厂附近土壤采样筛选出菌株H，以玉米芯（玉米棒脱粒后的剩余部分，含较多的木聚糖）为原料，在实验室发酵生产木寡糖等高附加值低聚糖，以期提高玉米的整体利用价值。

(1)生产实践中，常在碱性的条件下高温处理玉米芯以提取木聚糖。为筛选出能耐高温耐碱性的木聚糖分解菌H，首先制备以木聚糖为____________的固体培养基，调节培养基pH＝10.0，然后将土壤加入含有____________的锥形瓶中稀释，用____________法将菌种稀释液接种到培养基，在50℃环境中培养以获得单菌落。
(2)基于菌株H的特性，研究人员设计了如上图所示的发酵设备，该设备的控制系统需感应____________等理化性质的变化，以保证良好的发酵环境。
(3)该设备以一定的速度在加料口不断添加新的培养基，同时又以同样速度在出料口放出旧的培养基，可大大提高生产效率，原因是____________（答出两点即可）。
(4)该设备处理玉米芯与将玉米芯进行焚烧处理相比，优点是____________（答出两点即可）。
(5)若要随时了解不同发酵阶段发酵液中的活菌数，则需要对不同阶段的微生物进行计数，其计数原则一般是选择菌落数在30～300的平板进行计数。若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行_____________处理。若实验组的三个平板上均涂布了稀释倍数为10⁵倍的稀释液0.1mL，经培养后，3个平板上的菌落数分别为42、45和39，则原样液中每毫升含有活菌数为_____________个。

【推荐3】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精。取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。图乙是经过图甲步骤A纯化培养的结果，图丙是步骤C操作培养过程中，得到的一个菌落分布平板。请回答下列问题：

(1)步骤A和C所用的培养基中的凝固剂是_______，培养基灭菌的方法是_______，灭菌后的培养基要进行倒平板操作，该操作过程应该在_______旁进行，待平板冷凝后，要将平板倒置，其原因之一是_______。
(2)图乙结果显示，在培养基上接种时划线的顺序依次是_______（用编号表示），步骤B操作中需用_______挑取单个菌落进行接种。
(3)步骤C的接种方法是_______，根据图丙结果判断，接种时可能的操作失误是_______。
(4)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以_______为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
(5)将经上述流程培育获得的酿酒酵母进行酒精发酵能力测试，能用于生产的酵母菌除了能分解木糖外，还需要具备的条件有_______和_______。

【推荐1】天然存在的野生型质粒由于分子量大、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，不能满足作为运载体的要求，因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建新质粒．
假设下列三种质粒A、B、D，分别含有抗生素抗性基因r、s，及酶a、b的酶切位点．现需要通过基因工程大量表达目的基因M的产物。

（1）组成目的基因M的基本单体有哪几种_____。切割目的基因的酶b称为_____酶。
（2）作为基因工程的运载体，必须具备的条件是_____。
A．具有一个或多个限制酶切位点，以供外源基因插入其中
B．具有标记基因，以检测重组DNA分子是否导入受体细胞
C．能在宿主细胞中复制并稳定保存
D．必须是细菌的质粒或噬菌体
E．对宿主细胞无害
（3）目的基因与运载体通过_____酶连接形成重组DNA分子。
（4）如果选择质粒A作为目的基因M的运载体，其缺陷是_____；如果选择质粒B作为目的基因M的运载体，其缺陷是_____。为解决上述野生型质粒作为运载体的缺陷，进行人工构建新质粒。
（5）如果用酶a分别切割质粒A、B，形成人工构建的新质粒（X），X是否是较理想的目的基因运载体，为什么？_____如果用酶a分别切割质粒A、D，形成人工构建的新质粒（Y），Y是否是较理想的目的基因运载体，为什么？_____。

【推荐3】回答下列有关生物技术的问题。
(1)抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两个合成途径的研究，下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

①免疫学称细胞 为____，该细胞的免疫作用被称为____免疫。
②过程①至②可获取抗体，针对性地治疗疾病，其中①是____过程，Y细胞称为____。过程③④得到 V1基因的方法是____。
基因工程中PIJ702是一种常用质粒（图乙），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、 BglⅡ 、 PstⅠ、SacⅠ、 SphⅠ在PIJ702上分别只有一处识别序列。

(2)以 SaeⅠ和 SphⅠ切取的目的基因置换 PIJ702上0.4kb（0.1kb=1000对碱基）的SacⅠ/SphⅠ片段，构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表中。由此判断目的基因的片段长度为____ kb，以上的操作还需要的一种工具酶是____。

	PIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5.7kb	6.7kb
ClaⅠ	5.7kb	2.2kb，4.5kb
PstⅠ	5.7kb	1.6kb，5.1kb

(3)已知 PIJ702上含mel基因的 Cla /PstⅠ区域长度为2.5kb，参照表中数据，以下关于重组质粒 pZHZ8上酶切位点和酶切的叙述，正确的是

A．用 PstⅠ和ClaⅠ同时酶切可得到1.3kb的片段

B．用 PstⅠ和ClaⅠ同时酶切可得到四种不同长度的片段

C．用 PstⅠ和ClaⅠ同时酶切可得到最小的片段长度为0.3kb

D．重组质粒上的目的基因中不再含有 Bgl Ⅱ酶切点

(4)重组质粒pZHZ8上的标记基因是____，在含硫链丝菌素固体培养基上培养后，筛选过程中要淘汰____色的菌落。

【推荐1】胚胎干细胞（ES细胞）具有持续分裂和分化成各种组织细胞的能力。科学家利用已分化的细胞培养出的诱导性多功能干细胞（IPS），也具备胚胎干细胞的特点，诱导产生IPS细胞的前两个阶段为：①分离和培养宿主细胞；②将相关转录因子基因导入宿主细胞（如图所示）。请回答下列问题：

   

(1)培养宿主细胞应在含有____的混合气体的恒温培养箱中进行，所用的培养基需加入的天然成分为____，为及时清除代谢产物需____。
(2)据图可知，将基因导入宿主细胞所用的载体为____。
(3)IPS细胞或ES细胞在医学上的应用是培育人造组织器官，其优点为____。
(4)ES细胞往往取自囊胚的内细胞团或早期性腺细胞，目前ES细胞应用存在部分争议，相比IPS细胞，请说出你认为的争议点是____。

【推荐2】在基因工程中，人们常常会将两个不同的目的基因（不含终止密码子编码序列的A和不含起始密码子编码序列的B）串联在一个质粒分子上，使其联合表达成一种杂合蛋白（如图所示）。质粒pZHZ5上基因C为卡那霉素抗性基因。（注：起始密码子为GUG、AUG）

1. 基因工程的第二步是将目的基因和运载体进行重组。此时，需要选择合适的限制酶和________酶。
2. 如果质粒pZHZ5（2.7kb）上的限制酶E和限制酶F识别序列相距0.3kb，经E和F联合切割后直接加入DNA连接酶进行连接。所形成的含抗菌素抗性基因（C）的DNA分子中，长度最小的两种分子分别为__________和__________kb。
3. 下列是部分限制酶的识别序列和切割位点（用箭头表示）。若要将目的基因B直接插在重组质粒pZHZ6（3.9kb）的限制酶F位点处，则目的基因B上的X必须为______________。
A.        B.                               
C.         D.                               
4. 若trpA基因能利用无机氮源合成色氨酸。则选用的受体细胞应该是_________。
A. 能利用无机氮源合成色氨酸，卡那霉素抗性
B. 能利用无机氮源合成色氨酸，卡那霉素敏感
C. 不能利用无机氮源合成色氨酸，卡那霉素抗性
D. 不能利用无机氮源合成色氨酸，卡那霉素敏感
5. 若本次基因工程选用的受体细胞是大肠杆菌，在筛选过程中，制备的培养基除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入物质有_________
A. 无机氮源       B. 琼脂       C. 噬菌体       D. 卡那霉素
6. 动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的原因是_________。

【推荐3】α-1抗胰蛋白酶（α-1—AT）是人类血浆中最重要的蛋白酶抑制剂，其主要作用是保护机体正常细胞和器官不受蛋白酶的损伤，抑制感染和炎症，维持机体内环境的平衡。下图是以基因工程技术获取重组α-1抗胰蛋白酶（HumanA1AT）的两种方法。回答下列问题：

（1）为获取α-1—AT基因，可采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增α-1—AT基因，该技术需要的酶是_______________。
（2）b过程中，可添加酚类化合物，其作用是______________。将α-1—AT基因导入大肠杆菌细胞时，可用____________处理细胞，使其变为感受态细胞。
（3）已知α-1抗胰蛋白酶需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。据此推导，方法_______（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）具有优势，其优势是______________________。
（4）若要检测小麦胚乳细胞或大肠杆菌细胞中是否翻译出HumanA1AT，可用的检测物质是HumanA1AT的______（填“基因”或“抗体”）。

【推荐1】下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段，其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。请分析回答：

（1）图2所示遗传信息的传递方向是______。在真核细胞内，核基因控制的该过程发生在同一场所的是_____（选填序号）。过程①的产物分子中只有一条单链是新合成的，因此这种合成方式被称为_______。过程②需要催化。完成③时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是_______。
（2）基因突变是由于______，导致基因结构的改变。若图1中基因位点a的碱基对变为，位点b的碱基对变为，位点c的碱基对变为，则其中位点_____的突变对生物性状表现无影响，其原因是____。
（3）若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中，欲检测转基因是否成功，应将转入目的基因的细胞培养在含____的全营养固体培养基中。抗除草剂基因能在大豆细胞中表达说明_______。

【推荐2】真核生物基因结构与原核生物基因结构不同，真核生物基因的编码区是不连续的，有外显子和内含子之分，转录时内含子对应的RNA序列能通过相应机制切除，而原核生物编码区是连续的，没有这一机制。人体中基因M能表达出M蛋白。请回答下列问题：
(1)若想运用基因工程，利用大肠杆菌合成M蛋白，应当从______________________(填“人的基因组文库”或“cDNA文库”)中获得基因M，理由是_________________________。
(2)用大肠杆菌做受体菌，可高效获得蛋白M，因为大肠杆菌具有___________(答出两点即可)等特点。
(3)欲将构建出的基因表达载体导入到大肠杆菌细胞中，可用___________________处理。
(4)要检测目的基因M在大肠杆菌细胞是否转录出mRNA，可用的检测物质是____________________(填“蛋白M的基因”或“蛋白M的抗体”)。
(5)大肠杆菌合成的蛋白M还不具有生物活性，还需要后期加工处理，这是因为________。

【推荐3】新型冠状病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原。研究人员为研制S蛋白疫苗，做了如下实验，请回答：

（1）过程①是______________，过程②是______________，过程③常用的方法是______________。
（2）采用PCR技术获得大量的S基因进行体外扩增，其前提是____________________________，以便根据这一序列合成引物。PCR过程所需的酶是____________________。
（3）通过上述过程⑥得到的蛋白制备的疫苗比④效果更好，从细胞结构差异的角度分析，原因是___________。
（4）利用S蛋白为抗原制备单克隆抗体，运用的生物工程技术有____________________________。（答出一项即可）