【推荐1】紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，现已被广泛用于乳腺癌等癌症的治疗。生产紫杉醇的传统方法是从红豆杉的树皮和树叶中提取，但野生红豆杉是濒危植物，这种方法不利于对它们的保护。下图为科研人员制备能合成紫杉醇的紫茎泽兰愈伤组织细胞的流程，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶。回答下列问题：

   

(1)图中过程①依据的原理是________，复制开始时需要用到________种引物，引物的作用是________。
(2)图中过程②构建基因表达载体时，目的基因必须位于________之间，启动子的作用是________。
(3)某同学认为图中过程③中Ti质粒的T-DNA能携带目的基因整合到根瘤农杆菌的染色体DNA中，你认为该同学的说法是否合理，理由是________。
(4)过程④需要控制培养基中________，以防愈伤组织细胞发生分化，若要检测目的基因是否导入受体细胞以及成功表达，则可以分别使用________和________技术进行检测。

【推荐2】野生黑芥细胞核具有黑腐病抗性基因，花椰菜细胞质具有高产基因。某研究小组用野生黑芥、花椰菜两种植物细胞进行体细胞杂交，以获得高产抗黑腐病的杂种植株，流程如图1。

回答下列问题：
(1)过程①所需的酶有____________。实验中分别用不同植物幼苗的根和叶获取植物原生质体，即用不同颜色的原生质体进行融合，主要目的是____________。
(2)在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使野生黑芥原生质体和花椰菜原生质体的_____________、____________（填细胞结构）失活。
(3)融合后的原生质体经过细胞壁再生，进而脱分化形成愈伤组织。过程③产生的愈伤组织只能来自杂种细胞，下列分析正确的有_______。

A．未融合的野生黑芥或花椰菜原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂

B．同种融合的原生质体因野生黑芥或花椰菜原生质体失活而不能生长、分裂

C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂

D．杂种细胞由于结构和功能完整，可以正常生长、分裂

(4)采用特异性引物对花椰菜和野生黑芥的基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图2是用该引物对双亲及再生植株1～4进行PCR扩增的结果。得到图2实验结果所涉及的生物技术有___________（答两个）。据图2判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有________（多选，选“1”、“2”、“3”或“4”）。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题
（一）回答利用猕猴桃制作果汁、果酒、果醋有关的问题：
（1）猕猴桃维生素C含量丰富，利用猕猴桃直接制成的猕猴桃果汁较浑浊、_______，加入95%乙醇后，会出现较多絮状沉淀，都可说明果汁中含有较多的果胶。为获得无色澄清的果汁，需要首先进行_____处理，然后用___________处理，既提高了果汁的澄清度，又便于与果汁分离。
（2）制作出的猕猴桃汁，加入活化的酵母悬液，密封发酵。为提高发酵效率，可以采取的措施包括：优化发酵工艺及发酵装置；选择优良发酵菌种以及_____________ 控制好发酵条件如： _______________ （答出2点）。由于维生素C与2，4-二硝基苯肼作用形成红色产物，因此若要测定猕猴桃酒中维生素C的含量，可以用______________法。若样品测得的OD值过大，可以___________处理。
（3）家庭制作的猕猴桃酒存放的过程中容易被醋杆菌污染。为防止变酸，你的建议是（答出2点）___________________________________________________。
（二）正常植物细胞内无法大量积累赖氨酸，下图为植物细胞中利用天冬氨酸合成赖氨酸的简要生化途径。请回答：

（1）据图可知，植物细胞内不能积累大量赖氨酸的原因是赖氨酸通过______调节抑制了天冬氨酸激酶的活性，使赖氨酸的产量下降。若将经诱变处理的愈伤组织接种于________的培养基，能筛选出相应突变体，再通过培养该细胞系就能获得大量赖氨酸。
（2）除了诱变育种外，还可以利用基因工程技术将细菌中已知序列的高赖氨酸蛋白结构基因（pLRP47）转入植物细胞获得高赖氨酸植物新品种，如高赖氨酸玉米。基本过程为：
①获取目的基因：从细菌中提取mRNA，在逆转录酶的作用下形成互补的单链DNA，然后在_______的催化下获得目的基因pLRP47，并利用PCR进行扩增。
②构建表达载体：用限制性核酸内切酶和DNA连接酶作用于目的基因和质粒载体，就可获得重组质粒。作为目的基因的载体须具备的条件有：能自我复制、抗性基因、__________________________、不影响宿主细胞活性、具有控制质粒DNA转移的基因、能启动目的基因表达的序列等特征。
③农杆菌转化：取经扩大培养的农杆菌培养液离心，并用CaCl₂处理，使其生理状态发生改变，再与重组质粒混合等操作，使目的基因导入农杆菌，完成转化。转化后的农杆菌要正常培养一段时间，才能置于含特定抗生素的培养基上筛选，正常培养一段时间的目的是_________。
④植物细胞转化和再生植株：用含重组质粒的农杆菌侵染玉米幼胚，pLRP47基因进入玉米细胞并整合到玉米染色体DNA上，将被侵染的玉米幼胚放在含某种抗生素的培养基中除去_____________后，继续培养获得试管苗，试管苗需锻炼后才可移栽到大田，锻炼时需逐渐降低湿度、________光照强度。为了快速获得稳定遗传的转基因玉米，可选择__________培养获得的细胞系作为受体细胞。

【推荐2】基因工程是按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需求的新的生物类型和生物产品。下图是通过基因工程培养的转基因生物或产品的过程，结合相关知识回答下列问题：

(1)利用基因工程技术，让转基因牛的乳汁中含有药用蛋白的流程是：通过①构建药用蛋白基因与___________等调控组件重组在一起，通过②___________方法导入受精卵，选取今后发育成___________个体的受精卵进行③培养，③运用的技术手段有___________技术培育出“批量生产药物的工厂”——转基因牛。
(2)为了治疗新冠肺炎，科学工作者从新冠病毒的RNA中，剪切出能指导S蛋白（能引起新冠病毒侵染人体肺部细胞的蛋白质）的RNA经___________形成单链DNA，再合成双链DNA,编辑成目的基因并与相应的质粒结合构建基因表达载体后，导入工程菌中培养，从中分离提取___________，加工制成新冠疫苗，利用这种方法制备疫苗的优点是___________（至少答1点）。
(3)选用农杆菌的Ti质粒与富含赖氨酸的蛋白质编码基因构建基因表达载体，是因为农杆菌Ti质粒上的___________转移到被侵染的细胞，并且能将目的基因整合到受体细胞的___________上，把重组Ti质粒导入玉米体细胞中的方法是______________________。

【推荐3】H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。通过基因工程可提高H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力，相关步骤如下：
①细胞培养。将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养，一段时间后，用胰蛋白酶处理培养液，漂洗后调整细胞悬液浓度为。
②免疫小鼠。向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL，以后每隔2周免疫1次，共免疫3次，最后1次免疫后3天，取脾脏制成细胞悬液备用。
③细胞融合及筛选。将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEG作用下进行融合，筛选出能产生抗人肝癌的单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞。
④改造H18杂交瘤细胞。利用PCR技术获得小鼠的基因（抗凋亡基因），构建表达载体，通过脂质体法将其导入H18杂交瘤细胞中，再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。
请分析回答：
（1）步骤①中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是______________，培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______________________。
（2）步骤②中，肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是____________________。
（3）步骤③中，除了用50%PEG促进细胞融合外，常用的生物诱导因素是______________，物理诱导方法是_________________。步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞的过程依赖的原理是_______________________________________。
（4）与普通抗肝癌药物相比，用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是_____________________________。
（5）乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型，科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交瘤细胞凋亡，其结果如图所示：

抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是___________（用图中字母表示）。