【推荐1】营养缺陷型菌株是指野生型菌株经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子后才能生长的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、维生素缺陷型菌株和碱基缺陷型菌株等。筛选营养缺陷型菌株的常规步骤为：诱变育种→淘汰野生型→检出缺陷型→鉴定缺陷型。
(1)用紫外线诱变大肠杆菌，诱变后常采用含青霉素的培养基淘汰野生型大肠杆菌，使营养缺陷型大肠杆菌得以富集。培养大肠杆菌时，需将培养基的pH调至_____性，再在压力和温度分别为_____的条件下进行高压蒸汽灭菌，富集培养时一般使用液体培养基并在摇床上进行，摇床的作用是_____。
(2)夹层平板培养法可用于营养缺陷型菌株的检出，其原理如图1所示，先在培养皿上倒一薄层基本培养基，凝固后再接种一层诱变处理的菌液，其上再浇一层基本培养基，凝固后放入_____中培养出菌落，再倒一层完全培养基继续培养。若结果如图2所示，其中菌落_____（填“A”或“B”）即为检出的营养缺陷型大肠杆菌菌株。

(3)研究小组一利用生长图谱法初步确定检出的营养缺陷型大肠杆菌的类型，即在基本培养基乙的A～E这5个区域中分别添加不同的营养物质，然后用_____法将检出的营养缺陷型大肠杆菌接种在图3培养基上，若培养一段时间后在图3的BC交界处长出了菌落，则说明该菌株是_____营养缺陷型菌。
(4)研究小组二用上述方法鉴定了某菌株属于维生素营养缺陷型，为了进一步确定该菌株的具体类型，他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组，用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素，然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。

组别	维生素组合
1	维生素A	维生素B1	维生素B2	维生素B6	维生素B12
2	维生素C	维生素B1	维生素D2	维生素E	烟酰胺
3	叶酸	维生素B2	维生素D2	胆碱	泛酸钙
4	对氨基苯甲酸	维生素B6	维生素E	胆碱	肌醇
5	生物素	维生素12	烟酰胺	泛酸钙	肌醇

若观察到1组和2组滤纸片周围产生生长圈（图4），则该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是_____；若菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在图4培养基上形成菌落的位置是_____。

【推荐2】花生的根系在生长过程中会分泌苯甲酸、苯乙酮等物质以抑制某些病菌和其他植物的生长。同一片土地多年连续种植花生会导致这些有毒物质不断积累，造成花生产量下降。某大学采用“采集根际土壤→选择培养→分离、纯化培养→菌种鉴定”途径筛选出可将苯甲酸降解为无毒小分子（CO₂、H₂O等）的根际菌。回答下列相关问题：
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其______（填“初生”或“次生”）代谢物。从多年连续种植花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌的原因是______。
(2)为确保能够分离得到分解苯甲酸的微生物，常将土壤稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为______。分离、纯化培养的具体操作如下图所示，若每次稀释都是10倍稀释，则图中的a为______；图中将1g土壤共稀释了______倍。

(3)获得的菌种经鉴定后可通过发酵工程大量增殖，发酵结束后，可通过______等方法将菌体分离。

【推荐3】科研人员发现在黄石公园的温泉中生活着一种水生嗜热菌，并进行了一系列研究：
（1）由于温泉中菌的浓度很低，所以需要首先将菌进行“富集”，应该在_____（全营养／MS／以尿素为唯一氮源）的_____（液体／固体）培养基进行培养。
（2）当菌“富集”起来后，需要对菌种进行分离，得到_____，通常用划线分离法或稀释涂布分离法来实现此目的。
（3）得到纯化的菌株后，科研人员首先对其进行了初步鉴定：首先从平板上菌落的_____等特征来观察菌落，并在_____下观察细菌的形态（例如：棒状、杆状或是球型等）。
（4）科研人员为了找出水生嗜热菌最适的培养温度，做了相关实验，实验的主要步骤依次是_______________等。
a 配置培养基       
b对相应培养基进行高压蒸汽灭菌     
c对相应培养基进行灼烧灭菌   
d 对相应培养基进行干热灭菌              
e调节培养基至适宜的pH值     
f 将培养基分装至各三角瓶       
g在每瓶培养基中分别接种相同量的纯化后的菌种     
h每三瓶为一组，分别放置10、20、30、40、50℃下进行培养
i每三瓶为一组，分别放置在50、60、70、80、90℃下进行培养        
j测量每瓶培养基中细菌在一天后的菌体浓度，并对每个温度的三组取均值       
k测量每瓶培养基中细菌在十天后的菌体浓度，并记录每个温度下的最高值
（5）科研人员还鉴定了该菌在不同抗生素下的生长情况，该实验结果在培养该菌时的应用价值是_________。
（6）科研人员在此菌种发现一种耐高温的_____酶，此酶可用于 PCR 实验。

【推荐1】纤维素酶制剂已被广泛应用于食品、酿酒、饲料加工、纺织、洗衣、农业等多个领域，纤维素酶在自然界分布极为广泛，昆虫、软体动物、细菌、放线菌和真菌等都能产生纤维素酶。目前用于生产纤维素酶的微生物多为真菌。回答下列问题：
(1)为获取分解纤维素的菌种，从树林中多年落叶形成的腐殖土取样后，首先要进行多次选择培养以增加纤维素分解菌的浓度，选择培养所用的培养基属于__________（填“固体培养基”“半固体培养基”或“液体培养基”）。将所取土样加入培养基后需在一定温度下振荡培养，其目的是__________。
(2)经选择培养后，一般可采用__________法将纤维素分解菌接种到鉴别培养基上，用于鉴别纤维素分解菌的培养基中除了加入微生物生长所必需的营养物质外，还需加入琼脂和__________，以便根据菌落周围是否出现明显的透明圈来筛选纤维素分解菌。
(3)筛选出优良的纤维素分解菌菌种后，可通过发酵的方法来生产纤维素酶制剂。分离提纯需所获得的纤维素酶制剂需置于__________（填“低温”“高温”或“最适温度”）条件下保存。
(4)工业生产中，若要将酶固定化，一般__________（填“适宜”或“不适宜”）采用包埋法，其原因是__________。

【推荐2】研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。我国科学家从深海冷泉附近的沉积物样品中分离、鉴定得到拟杆菌X，然后使用含有不同碳源的培养基对拟杆菌X进行培养，实验结果如下图所示。请思考回答下列问题：

(1)根据题干信息推测，按照对O₂的需求划分，拟杆菌X属于___型。据图分析，若要尽快扩大培养拟杆菌X，最好选择以___为碳源的培养基。
(2)为分离拟杆菌X，研究人员先制备富集培养基，并采用___法对培养基进行灭菌，冷却后再接入沉积物样品。培养一段时间后，获得了含拟杆菌X的混合培养物。为获得纯净培养物，可采用___等方法将菌液接种到培养基上。为了检测分离菌种所用的培养基灭菌是否合格，需要进行的操作是___。实验结束后，使用过的培养基应经灭菌处理后再丢弃，这样做的目的是___。
(3)为测定某种拟杆菌X分解淀粉的能力，研究人员用凝胶色谱法从菌种的代谢产物中分离纯化淀粉酶。在对蛋白质样品进行洗脱的过程中，最后收集到的蛋白质样品与最初收集到的蛋白质样品相比，分子质量较___（填大或小）。将淀粉酶固定化后用于工业生产时，发现淀粉溶液在流经固定化淀粉酶反应柱后，溶液中的淀粉含量依然很高，在不增加反应柱高度的前提下，可提高淀粉分解效率的措施有___（答出两点）。

【推荐3】在公共场合佩戴口罩已经成为一种习惯，而大量使用的口罩已经成了新型污染。喷绒布是口罩生产的重要原料，主要成分是聚丙烯，某研究小组欲从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌。回答下列问题：
(1)该科研团队设计了一个对照实验，请将以下实验步骤补充完整：
①采集来自不同环境的等量土壤，编号为A、B、C、D。将同型号等量的一次性口罩经___________处理后埋入各组土壤中。
②在相同且适宜条件下培养一段时间后，观察各组中口罩的腐烂程度。
③从口罩腐烂程度_________的一组上采集细菌样品。
(2)培养基中一般要含有细菌生存所需的____________。分离纯化目的菌时，培养基以______作为唯一的碳源。这样的培养基按功能划分，属于_________培养基。

(3)若需进一步对土样中的细菌计数，上图所示微生物接种的方法是_____________，接种时注意应在________旁进行。图示3个接种后的平板经适当培养后，所得菌落数分别是97、96和98，则1g土壤中的活菌数约为__________个。

【推荐3】某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下：

（1）实验过程中，该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是_________________。
（2）分离酵母菌应使用____________ (用途)培养基，固定化酵母细胞常采用___________法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意_______________。
（3）在酸性条件下，可用______________来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步统计所得果酒中酵母菌的活菌数目，通常可采用_____________法。
（4）发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，该班同学可将菌液采用___________法在_____℃环境中进行长久保存。