【推荐1】回答下列（一）（二）（三）小题
（一）在植物组织培养过程中，激素的添加已成为一种常规的实验手段。在植物组织培养过程中，已研究过的植物激素有生长素、细胞分裂素、赤霉素等。
（1）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和_______的关键性激素。
（2）若该实验材料为菊花，则应对其进行_______（填“消毒”或“灭菌”），然后切取一些小组织块，放在固体培养基中培养，脱分化在___________ 表面形成一种相对没有分化的活的_____________细胞团，即愈伤组织。
（3）将含有愈伤组织培养物的试管放在摇床上，通过__________培养可以分散得到单细胞，单细胞再发育成胚状体，最后得到新植株。
（二）果酒的制作离不开酵母菌，泡菜的制作离不开乳酸菌，请回答下面的问题。
（1）为了获得耐高糖、耐酸特性的酵母菌菌种，可以对野生菌种进行 _______________，然后在___培养上进行筛选得到。
（2）筛选乳酸菌时培养基应放在 ___________环境条件下，培养基中的尿素可为乳酸菌生长提供 _________。
（三）下列是有关固定化酶及细菌培养与分离的问题，请回答下面的问题。
（1）固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法固定在某种介质上，使之成为 _________而又有酶活性的制剂。可用_________法将α-淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。
（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是_________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”作对照的目的是_____________________。
（3）某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中，正确的是________
A.实验用过的带菌培养基须经过加热后才能倒掉
B.利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C.观察细菌培养的实验时，最好同时在另一平板上接种澄清湖水作为对照实验
D.培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和碳源

【推荐3】大肠杆菌是寄生于人肠道内的一种细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应而使菌落呈紫黑色。测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。 滤膜法的大致流程如下图 1 所示。请回答下列问题：

（1）据题意分析，图中培养基除了加入水、碳源、氮源和无机盐为大肠杆菌生长繁殖提供营养物质外，还需添加__________和伊红美蓝，从功能上看属于__________培养基。
（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵，本实验中所使用的培养皿等玻璃器皿的常用灭菌方法有_______。
（3）在无菌操作条件下，将 10 mL 待测水样加入到 90 mL 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得伊红美蓝培养基上的菌落数平均为 124 个，紫黑色菌落数平均为 29 个，推测 1L 待测水样中的大肠杆菌总数约为______个。
（4）若饮用水中大肠杆菌超标，可引发多种感染。为了研究不同浓度的甲抗生素对 A、B两种大肠杆菌的抑菌效果，做如下实验。
I．取稀释后的 A、B 两种大肠杆菌菌液少许，分别与溶化并冷却至 45℃左右的培养基混匀后 倒平板各 5 个；
II．待平板凝固后，在每个平板中央的培养基里各打一个直径为 3mm 的孔，并在孔中分别加入不同浓度的甲抗生素。
III.在适宜条件下培养一段时间，可在孔的周围观察到一圈清晰区，按图 2 所示测量清晰区的直径，数据如下表。

甲抗生素浓度/µg/mL		5．0	7．5	10．0	15．0	20．0
清 晰 区 直 径/mm	A 大肠杆菌	—	5	8	13	17
	B 大肠杆菌	5	7	9	14	19

①由表中数据可知，甲抗生素对 A、B 大肠杆菌的增长都有抑制作用，但_________大肠杆菌对甲抗生素敏感性较强，判断依据是_______。
②为了更准确地说明清晰区的出现是因为甲抗生素的作用，本实验还需增设一组在上述平板孔内加入_____作为对照。
③本实验需将上述接种后的平板与______________在相同条件下培养，以检查培养基灭菌是否合格以及培养过程中是否受到杂菌污染。

【推荐1】自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供___________和维生素等。
(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明______________________。

(3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样___________后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上，涂布过程中，涂布器用__________ 的方法灭菌。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现___________。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱）___________。

【推荐2】牛奶消毒不过关容易携带细菌。根据国家标准（GB19645-2010)，每毫升合格的牛奶细菌总数不能超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒然后检测消毒的效果，如下图所示。

(1)图中步骤①对牛奶的消毒的方法是______________，蛋白胨的作用有_______________(写两点)。
(2)步骤③的接种方法是____________________________，这种方法可以用来统计样品中活菌的数目，其原理是__________________________________。
(3)兴趣小组通过步骤①~③接种了3个平板并将其和1个未接种的平板放入恒温培养箱，在适宜的温度条件下培养48h，然后统计出4个平板上的菌落数分别是57、53、55和9。根据这样的实验结果是否能判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标，请回答并给出原因______________________。

【推荐3】我们在生产、生活中产生的大量垃圾，正在严重侵蚀我们的生存环境，垃圾分类处理是避免“垃圾围城”的有效途径。利用微生物将垃圾中的有机物分解是常用的方法。请回答下列问题:
(1)每种微生物的利用，都离不开微生物的分离、提纯和培育。实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻断其它微生物的生长，能达此目的的培养基称为_________。在实验中，为了获得纯净的某种微生物，关键是_________，主要包括消毒和灭菌，其中对培养基常采用的方法是__________。
(2)我国科学院研究团队首次发现了能够高效降解聚氨酯（PU）塑料的新菌种，并把该菌种命名为塔宾曲霉菌，若要筛选该菌种，则需要使用以_________为唯一碳源的选择培养基。若要测定样品溶液中该菌种的数目，可将100mL含该菌种的样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为190个，且空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中含有塔宾曲霉菌_________个。
(3)若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入刚果红的培养基中，通过比较菌落的__________，来判断降解活性的高低。
(4)研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌（均为需氧型）处理厨余垃圾废液效果好。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，研究者做了如下实验；①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	A	B	C	D
圆褐固氮菌：芽孢杆菌	1：0	0：1	1：1	2：1

将上表菌液分别接种于50mL某厨余垃圾废液中进行振荡培养。
本实验的对照组应在50mL厨余垃圾废液中接种__________。
②培养3天后测定活菌数：取一定量菌液进行_________，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布平板法接种于完全培养基中培养。依据菌落形态对两种菌进行区分计数。
③实验结果如下图：

由图可知处理该厨余垃圾，两菌种的最佳接种量比例为_________，判断依据是_________.

【推荐1】新冠病毒是RNA病毒，病毒的S蛋白（棘突蛋白）是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白，可与宿主细胞的受体结合。下面为两种针对新冠病毒的疫苗研发方法，回答下列问题。

方法	技术路线
基因工程疫苗	S蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→S蛋白→人体
腺病毒载体重组疫苗	S蛋白基因→腺病毒基因表达载体→人体

(1)基因表达载体的组成除了S蛋白基因外还必须有标记基因、启动子、___________（答出2点）等。基因表达载体的构建有利于目的基因完成转化，转化是指___________。
(2)基因工程疫苗制备过程中需要分离和提纯大肠杆菌，通常情况下，我们需要对培养基进行___________灭菌，当采用平板划线法分离大肠杆菌时，第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是___________。
(3)除研制疫苗外，还可对新冠病毒进行免疫学检测以阻断传播途径，其过程是：
①向小鼠体内注射新冠病毒S蛋白后分离产生的B淋巴细胞，并与小鼠的骨髓瘤细胞融合，常用的融合方法有____________（答出1种）；再多次筛选、检测，最终获得所需杂交瘤细胞，该种细胞的特点是___________。
②获得的杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养，或注射到___________内增殖，获得大量可与S蛋白特异性结合的单克隆抗体作为诊断试剂。

【推荐2】塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等．2008年7月3日加拿大媒体报道：16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳．伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”．以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程．
请回答：

（l）根据你的生活经验推测，伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于_______________。
（2）图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的 ____________________，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞．从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个____________。
（3）I号培养基属于__________培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为___。使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、___________________等基本营养成分．从物理性质来看，Ⅱ号培养基中不能添加____________________。
（4）若要进行月季花药的离体培养，最好选择____________期的花药，从宏观来判断通常择__________，采用的MS固体培养基中除含有多种大量元素和微量元素外，还需添加植物激素，其中主要是____________。
（5）为避免杂菌污染培养物和环境，植物组织培养和微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行______________。
（6）接种时要在___________________操作。

【推荐3】（一）新疆是我国最大的优质棉花生产基地，黄萎病菌引起的黄萎病，严重影响棉花产量。 科研人员通过筛选出对棉花黄萎病菌有较强拮抗作用的微生物，制备生物农药，用于防治棉花黄萎病。 回答下列有关问题。   
（1）分离纯化棉花黄萎病菌时需配置相应的 ________ ，为菌种生长繁殖提供营养物质，接种必 需 在 _______旁 进 行 。
（2）分离土壤根系微生物时，先用 ___________对土壤溶液进行梯度稀释，再用 ________（填“玻璃刮刀”/“接种环”）涂布平板。涂布前进行梯度稀释的理由是     ______________________ 。             
（二）柚子不仅可以用果肉制备果酒，还可以从柚皮中提取果胶。请回答以下问题：
（3）果酒制作的菌种是酵母菌，在分离和纯化酵母菌时对培养基灭菌要采用________ 法，在用液体培养基扩大培养酵母菌时，需要放在摇床上振荡培养，其目的是_________________________。
（4）若利用柚子果皮制取果胶，需预先将柚子果皮在沸水中浸泡一段时间，目的是________________________。研磨、萃取获得果胶初提物，并用无水乙醇处理，使其 __________________________，获得果胶干制品。
（5）果胶能与 3，5-二甲苯酚发生反应，产生红色物质，可用 _________ 法定量测定果胶的含量。测定前，需用活性炭对果胶进行 ____________________   处理。测定时需要配置一系列溶液 ， 测 定   _____________ ， 然 后制作_____________________________。

【推荐1】尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验，实验中用到的尿素培养基成分如下表所示，具体操作流程如图所示。请分析回答。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
1．4g	2．1g	0．2g	10．0g	1．0g	15．0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。

(1)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是_____，需要消毒的是____（填序号）。
①培养基与培养皿②玻棒、试管、锥形瓶③实验操作者的双手④操作空间⑤接种用具
(2)培养基中加入尿素的目的是_____，从作用分析这种培养基属于_____培养基，本实验还同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，目的是_____。
(3)除了本实验的接种培养方法外，通常还可以采用_____方法能将单个微生物分散在固体培养基上，此实验不选这个方法的原因是_____。
(4)该兴趣小组在三种稀释度下吸取0．1mL的菌液涂布平板，统计菌落数分别为198、243、279，则10g土样中的活菌数约为_____个。

【推荐2】餐厨垃圾废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用，但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：
将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	R0	R1	R2	R3
圆褐固氮菌:巨大芽孢杆菌	1:0	0:1	1:1	2:1

(1)将上表菌液分别接种于l00mL___________中进行振荡培养。
(2)振荡处理的目的是___________。
(3)本实验还需设置对照组为___________。
(4)培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行___________稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用___________法接种于基本培养基中培养。
(5)进行计数时，可依据___________对两种菌进行区分，并选取菌落数在30~300内的平板进行计数，利用此方法计数的结果会比实际菌数偏___________。实验结果如图1所示，由实验结果可知___________。
   
为进一步探究菌种比例对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪等有机物的降解效果，测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如图2所示：
   
(6)由实验结果可知分别选取___________的接种比对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪降解效果最好。
(7)废液中个别组蛋白质含量在后期升高，分析可能的原因是___________。
(8)餐厨垃圾废液中的某些细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。下列关于分解尿素细菌的分离和计数的叙述，正确的是（       ）

A．分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的

B．倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定

D．若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板

【推荐3】为调查某地土质状况,某科研小组对该地土壤中能分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题:
(1)能分解尿素的细菌能分解尿素,而其他微生物不能,其根本原因是前者具有_____。为筛选出能分解尿素的细菌,在配制培养基时应选择__________作为唯一氮源。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源,但可用葡萄糖作为碳源,由此推测能分解尿素的细菌是____(填“自养”或“异养”)型生物。
(2)该研究小组将10 g土样进行梯度稀释,在某个稀释度下涂布接种了3个平板(接种量均为0.1 mL),经适宜培养后,3个平板均没出现菌落,分析可能的原因是______。明确原因后,该科研小组用先前制作的未使用的平板重新涂布接种3个平板完成实验,经适宜培养后3个平板均存在多种不同特征的菌落,推测最可能的原因是______________。
(3)该科研小组从同一平板中挑选出A、B、C三种菌落分别接种到液体培养基中,培养一段时间后,采用稀释涂布平板法接种在能分解尿素的细菌的选择培养基上,经适宜培养后,均能检测到A、B两种菌落,却始终检测不到C种菌落。
①由此可得出的结论是_______________。
②推测C种细菌与A、B两种细菌在同一个平板上能生长繁殖的原因可能是_______________。