【推荐2】阅读以下材料，回答（1）～（5）题。
破解叶绿体“守门人”之谜，叶绿体是绿色植物和藻类等真核生物的“养料制造车间”和“能量转换站”。其自身编码100多种蛋白，而多达2000到3000种叶绿体蛋白由核基因编码，在细胞质中翻译成为前体蛋白，再运输到叶绿体中。叶绿体到底是怎样精确识别这些蛋白的呢？叶绿体的外膜和内膜上分别存在转运因子TOC和TIC，它们联合形成一个超级复合体TOC-TIC，是核基因编码的前体蛋白穿过叶绿体膜的重要“守门人”。
   
大部分转运入叶绿体的前体蛋白N端都含有一段可以剪切的信号序列称为转运肽，在分子伴侣蛋白的帮助下，通过转运肽与叶绿体外膜受体蛋白识别。第一阶段，前体蛋白与叶绿体外膜上TOC复合体的受体相互作用。第二阶段，前体蛋白进一步插入TOC复合体，甚至与TIC复合体接触，此阶段的特点是前体蛋白穿过TOC复合体，与TIC复合体相结合形成转运中间体，即TOC-TIC超级复合体。最后阶段，前体蛋白完全跨过叶绿体内膜插入到基质中，转运肽被转运肽基质加工酶SPP移除。2022年，我国科学家首次纯化并解析了TOC-TIC超级复合体的完整清晰结构，看到了“守门人”的样子，揭开了叶绿体前体蛋白转运之谜。实验采取两种不同策略纯化出来的蛋白质组分完全一致，解析出来的电镜结构也高度一致。解析结果显示，克莱因衣藻叶绿体上的TOC-TIC超级复合体一共包含14个组分，其中8个为之前已报道的组分，6个为功能未知的新组分。此研究用纯化并解析结构这个“终极手段”解决了光合生物叶绿体生物学的一个核心问题，为增进理解和认识藻类、植物叶绿体如何发展进化迈出了一大步。
(1)绿色植物和藻类中的叶绿素，主要吸收__________光，海带（褐藻）在海水中的垂直分布为__________（浅、中、深）水区。
(2)根据材料可知，叶绿体前体蛋白转运入叶绿体的过程__________（“需要”、“不需要”）消耗能量。
(3)从文中可知，转运肽在叶绿体前体蛋白转运入叶绿体中发挥的作用是________________。
(4)对文中TOC-TIC超级复合体及对其结构解析的理解，正确的有__________。

A．叶绿体膜上的“守门人”由TOC和TIC两个部分组成超级复合体

B．纯化TOC-TIC超级复合体的实验过程不能破坏其结构

C．TOC-TIC超级复合体对叶绿体的生成以及稳态至关重要

D．叶绿体合成的淀粉可通过TOC-TIC超级复合体进入细胞质基质

E．核基因编码的叶绿体蛋白在叶绿体内成熟

(5)在解析出TOC-TIC超级复合体清晰结构的基础上，提出可进一步研究的问题________。

【推荐3】延迟栽培可使产品上市错开高峰期，提高经济效益，已经成为葡萄产业发展的新趋势和新方向。为解决延迟栽培中叶片的衰老问题，科研人员进行了相关实验。请回答问题：
(1)叶绿体中的光合色素分布在______上，能够吸收、传递和转化光能。光反应阶段生成的______参与暗反应阶段，合成有机物提高果实品质。
(2)为研究光质对葡萄叶片衰老的影响，科研人员从8月1日起开始对葡萄进行红光和蓝光补充光照处理，以未补光的作为对照，定期观察叶绿体的超微结构，9月24日结果如下图所示。与对照组相比，红光处理组出现的两个明显变化是______；蓝光处理组比对照组______（提前/滞后）表现出衰老特征。

注：S代表淀粉粒，L代表脂质球（脂质球的出现是叶片衰老的主要特征）
(3)叶绿素含量下降也是叶片衰老的显著特征，科研人员继续测定了叶绿素的含量，结果如下表。

注：“—”代表叶片已脱落，未采样
据表可知，9月24日后，叶绿素的含量呈下降趋势，补充红光组叶绿素含量始终______对照组，表明红光延缓了叶片的衰老；比较补充蓝光组和对照组的叶绿素含量，表明蓝光______。
(4)该实验从______水平研究了光质对葡萄叶片衰老的影响。综上所述，______可以有效解决延迟栽培中叶片的衰老问题。

【推荐1】回答与生物技术有关的下列两小题：
Ⅰ.甘蓝型油菜引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14）进行体细胞杂交，培育抗病毒的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系，过程如图1。

(1)甘蓝型油菜与菘蓝的体细胞经__________酶处理后获得原生质体，再经__________诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和__________的培养基上，经__________过程形成愈伤组织，发育形成完整的再生植株F₁。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有：__________。（至少答出两个）
(2)将F₁与甘蓝型油菜回交，获得BC₁，其染色体组成为__________（只用字母表示）。用BC₁与甘蓝型油菜再一次回交，得到的BC₂植株群体的染色体数目范围是_______。
(3)研究人员从BC₂筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系（A、B、C、D、E、F、G）。为探究甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在抗新冠病毒（SARS-CoV-2）中的作用，研究人员用其提取物处理动物细胞，24h后感染新冠病毒，一段时间后收集病毒细胞培养液，检测病毒的含量，结果如图2。

   

①作为标准参考的GADPH蛋白表达量__________，可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明：__________。
③尝试说出建立甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在育种方面的意义：__________。（答出两个方面）
Ⅱ.母源因子是初级卵母细胞在减数分裂Ⅰ前期的后段开始产生并积累的mRNA和蛋白质，其对于调控动物早期胚胎的发育十分重要。为研究不同母源因子的功能，相应母源突变体的培育显得尤为重要。
(4)母源因子由母源效应基因通过基因__________过程产生，其产生并积累的时期由于同源染色体未分离，因此只有纯合突变的雌性个体的后代才是母源突变体。
(5)获得母源突变体的传统方法是反复交配与筛选。以母源效应基因A为例，科学家利用基因编辑技术将斑马鱼的一个A基因敲除后获得杂合子，记作（+/-）。如图1是获得母源突变体的杂交方案，请补全下图__________。

(6)传统交配筛选的方法存在耗时长、纯合的合子突变体的致死率高等缺陷。为了解决上述问题，科学家在CRISPR/Cas9基因编辑系统的基础上进行了改进。
①sgRNA编码序列能与相应靶基因序列发生碱基互补配对。为构建含有sgRNA编码序列的重组质粒，需对含有特定sgRNA编码序列的DNA用__________处理，然后将其插入到经相同酶处理过的质粒上。斑马鱼的卵母细胞与精子受精前停滞在减数分裂Ⅰ前期，此时还未开始合成母源因子，在此阶段前对卵母细胞进行基因敲除可避免母源因子的积累。
②为了实现卵母细胞中基因的特异性敲除，如图2所示，科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上，形成新的重组质粒后导入卵母细胞。

注：eflap—能够驱动基因广泛表达的启动子；EGFP—增强型绿色荧光蛋白基因；I-SecI一归位内切酶，可将质粒随机插入到斑马鱼的基因组中。
从理论上分析，一个sgRNA便能实现靶基因的敲除，请分析3个sgRNA串联有何优势，请答出2点__________。
(7)I-SecI介导的基因插入率并不能达到100%，请根据上述研究分析如何在斑马鱼早期胚胎中筛选出突变体，并说明理由_____。

【推荐3】玉米的祖先——野生玉米，名叫“大刍草”，经过9000多年人工驯化，被改造成现代玉米。我国中科院科学家经过长达10年不懈努力，从野生玉米“大刍草”中，成功找回玉米人工驯化过程中丢失的一个控制高蛋白含量的优良基因THP9，克隆出来并将此高蛋白基因转移到玉米细胞内，获得了转基因高蛋白玉米新品种。请回答相关问题：
(1)若科研人员获得了THP9基因对应核苷酸序列，则可利用DNA合成仪直接合成目的基因，该种获取目的基因的方法是____。
①化学合成法②PCR法③基于大规模筛选的方法
(2)构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基因整合到质粒上，如图，已知图中THP9基因转录方向为从左往右，应使用限制酶____切割如图中质粒，使用限制酶____切割图中含THP9基因的DNA片段，以获得能正确表达THP9基因的重组质粒。

EcoRI	BamHI	KpnI	MfeI	HindⅢ

(3)限制酶来源于原核生物，不会切割本身的DNA分子是因为____。
(4)TPH9基因转录的模板链是____。利用PCR技术对THP9基因进行扩增的原理是____，子链的延伸方向是____。
(5)研究人员欲对THP9基因的mRNA进行RT-PCR（逆转录PCR），已知其mRNA的序列为5'-UGAACGCUA…（中间序列）…GUCGACUCG-3'。为了便于将扩增后的基因和载体成功构建成重组质粒，用于PCR扩增的引物应为____。
①5'-TGAACGCTA…②5'-CGAGTCGAC…
③5'-GAATTCTGA…④5'-AAGCTTCGA…
(6)为了检测转基因技术是否成功，科研工作者在个体水平上的检测方法是____。

【推荐1】采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd 富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd 的含量。为提高植物对Cd 污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd 转运蛋白（YCF1）基因导入受试植物，并检测了相关指标。回答下列问题：
(1)为获取YCF1 基因，将酵母细胞的全部DNA 提取、切割后与载体连接，该过程所需要的两种酶是________________。
(2)将DNA 序列插入Ti 质粒构建重组基因表达载体时，重组基因表达载体中含有启动子、标记基因等，启动子的 作用是____________，标记基因的作用是______________________。
(3)进行前期研究时，将含有YCF1 基因的重组基因表达载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是 ________。 研究者进一步获得了转YCF1 基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是 _____________________。
(4)将长势－致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd 污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1 可知，与野生型比，转基因植株对Cd 具有更强的_________（填“耐性”或“富集能力”）；据图2 可知， 对转基因植株的_____________进行后续处理对于缓解土壤Cd 污染最为方便有效。

(5)已知YCF1 特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd 环境的 原因是__________________________。

【推荐2】IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷〈SCID）患儿IKK基因编码区第1183位碱基T突变为C，导致IKK上第395位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制，研究人员利用纯合野生鼠应用大引物PCR定点诱变技术培育出SCID模型小鼠（纯合），主要过程如图甲、乙、分析回答下列问题：
   


(1)在图甲获取突变基因过程中，需要以下3种引物：

引物A	5'-CCCAACCGGAAAGTGTCA-3' （下划线字母为突变碱基）
引物B	5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3' （下划线部分为限制酶HindⅢ识别序列）
引物C	5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3' （下划线部分为限制酶SacⅠ识别序列）

则PCR₁中使用的引物有______，PCR₂中使用的引物有______和图中大引物的______（填“①”或“②”）链。
(2)将突变基因导入小鼠受精卵最有效的方法是______。
(3)研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠F₀，并确认突变基因已经稳定同源替代IKK基因。利用杂交鼠F，通过杂交获得SCID模型鼠，请将实验步骤补充完整；
①杂交亲本：______，杂交得F₁；
②______得F₂；
③提取F₂每只小鼠的基因组DNA，采用分子生物学方法，利用IKK基因探针和突变基因探针进·行筛选，则______的为模型鼠。

【推荐3】温顺的小羊深受孩子们的喜爱。山羊的毛色有白色和黑色。技术人员让多只白色公羊与白色母羊交配繁殖，进行毛色遗传实验，并将子代毛色数据绘制成柱形图。请分析回答：

（1）由图中的信息推知羊的黑毛是_________性状，判断的理由是_______________________；亲代为白色，在子代中出现白色和黑色，这种现象在生物学称为___________。
（2）将子代中的一只白色公羊与多只黑色母羊进行交配繁殖，如果子二代全部是白羊，则这只白色公羊的基因组成为_________（控制毛色的基因用A、a表示）。   
（3）假设黑色公羊的体细胞内有N条染色体，那么它产生的精子内有_________条染色体；受精时公羊产生的精子与卵细胞识别并结合体现了细胞膜具有______________功能。山羊的性别是由细胞中的X和Y染色体决定的，黑色公羊可产生_________种性染色体类型的精子，它与杂合白色母羊生出一只白色雄性小羊的概率为________。
（4）中国科学院和上海复旦大学遗传所合作，培育出5只含有人体某种基因的转基因羊，这些羊的乳汁中含有人凝血因子，可用于治疗血友病。该技术原理是_________。
（5）1996年7月5日诞生的克隆羊多莉，曾经引起世界的极大关注。小羊多莉的实例说明 ___________具有全能性。