基因驱动是指特定基因有偏向性地遗传给下一代的自然现象。科学家借助CRISPR/Cas9基因编辑技术,研发出人工基因驱动系统,并在拟南芥和蚊子等生物中实现了外部引入的基因多代遗传。在作物快速育种、根除疟疾等方面具有广阔的前景。请回答下列问题:
(1)为研发拟南芥蓝光受体CRY1基因驱动系统,科学家首先构建了基因驱动元件,将基因驱动元件精确插入到一条染色体上的CRY1基因中,过程如下图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/24/2986332139479040/2987041274822656/STEM/225687ec-75e6-44eb-be81-acf06871cbbd.png?resizew=408)
①将基因驱动元件导入拟南芥细胞,在细胞中表达Cas9/gRNA复合物,该复合物通过________________ 识别和结合DNA特定序列,并引导Cas9酶切断DNA双链的____________________ ,从而将基因驱动元件插入到CRY1基因中,该过程属于定点____________________ (基因突变/染色体变异)。
②为确定基因驱动元件是否插入CRY1基因,选择引物P1和P4进行PCR-电泳,结果如图。条带1的大小约为7800bp,条带2的大小约为3200bp。其中M加样孔加入的是____________________ ,基因驱动元件成功插入的是条带____________________ ,基因驱动元件的大小约为____________________ 左右。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/24/2986332139479040/2987041274822656/STEM/932cfd3c-2680-4e2e-b8a3-94a6d4348c4e.png?resizew=130)
(2)当携带基因驱动元件的动物与野生型动物交配时,它们的后代从父母中各获得一份DNA 副本:自然版本和基因驱动版本。受精后,来自不同亲本的染色体排列在一起时,基因驱动DNA中的CRISPR被激活。它能识别对侧染色体上自然基因的拷贝,并在胚胎发育开始前引导Cas9酶切除自然拷贝。一旦自然基因受损,细胞的特殊修复机制就会启动,修复丢失的DNA,但它使用未断裂的染色体(携带基因驱动的染色体)作为模板。所以当修复完成后,两条染色体都携带一份基因驱动的拷贝。此过程被称为同源定向修复。
①用CRY1基因纯合突变体作为母本与野生型父本杂交,F1中有多达8%的植株为纯合突变体。纯合突变体产生的原因是F1中来自母本的基因驱动序列通过同源定向修复,使来自父本的____________________ (部位)上也插入CRY1基因驱动元件。
②用基因驱动技术改造传播疟疾的按蚊X染色体上的A基因获得a基因,已知含a基因的精子不能成活。用改造后的纯合雌蚊突变体与野生型雄蚊交配获得子一代,子一代相互交配,子二代中的性别组成为_____ ,且子二代中含有a基因的比例____________________ (填“大于”“等于”或“小于”)1/2。若将基因驱动雌蚊释放到疟疾疫区,可通过____________________ 降低按蚊的种群密度。
(1)为研发拟南芥蓝光受体CRY1基因驱动系统,科学家首先构建了基因驱动元件,将基因驱动元件精确插入到一条染色体上的CRY1基因中,过程如下图所示。
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①将基因驱动元件导入拟南芥细胞,在细胞中表达Cas9/gRNA复合物,该复合物通过
②为确定基因驱动元件是否插入CRY1基因,选择引物P1和P4进行PCR-电泳,结果如图。条带1的大小约为7800bp,条带2的大小约为3200bp。其中M加样孔加入的是
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(2)当携带基因驱动元件的动物与野生型动物交配时,它们的后代从父母中各获得一份DNA 副本:自然版本和基因驱动版本。受精后,来自不同亲本的染色体排列在一起时,基因驱动DNA中的CRISPR被激活。它能识别对侧染色体上自然基因的拷贝,并在胚胎发育开始前引导Cas9酶切除自然拷贝。一旦自然基因受损,细胞的特殊修复机制就会启动,修复丢失的DNA,但它使用未断裂的染色体(携带基因驱动的染色体)作为模板。所以当修复完成后,两条染色体都携带一份基因驱动的拷贝。此过程被称为同源定向修复。
①用CRY1基因纯合突变体作为母本与野生型父本杂交,F1中有多达8%的植株为纯合突变体。纯合突变体产生的原因是F1中来自母本的基因驱动序列通过同源定向修复,使来自父本的
②用基因驱动技术改造传播疟疾的按蚊X染色体上的A基因获得a基因,已知含a基因的精子不能成活。用改造后的纯合雌蚊突变体与野生型雄蚊交配获得子一代,子一代相互交配,子二代中的性别组成为
更新时间:2022-05-25 15:33:56
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【推荐1】有一对表现正常的夫妻(Ⅲ-11、Ⅲ-12),丈夫的家族中有人患甲遗传病(相关基因用A、a表示),他的祖父和祖母是近亲结婚;妻子的家族中有人患乙遗传病(相关基因用B、b表示),她有一个年龄相差不多且患21三体综合征的舅舅。已知该对夫妻均不携带对方家族的致病基因,两个家族的系谱图如图所示。请回答下列相关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/8/21/2273709340008448/2274381961699329/STEM/d8bb1c51-c21a-4d8b-81f1-5d67be8b8d8f.jpg)
(1)甲病是_________ 遗传病,乙病是_________ 遗传病。(填染色体类型及显隐性)
(2)丈夫的基因型是_________ 。
(3)该对夫妻再生一个女孩患病的概率是_________ ,生出患病男孩的概率是_________ 。
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(1)甲病是
(2)丈夫的基因型是
(3)该对夫妻再生一个女孩患病的概率是
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解题方法
【推荐2】某种家鸡(2n=78)是一种适宜散养的优良品种,体型匀称,肉蛋鲜美,营养价值高。该种家鸡的正常眼对豁眼是显性性状,由 Z 染色体上的一对等位基因 B/b 控制;黄羽对白羽是显性性状,由常染色体上的一对等位基因 E/e 控制。回答下列问题:
(1)要研究该家鸡的基因组序列,需要测定该家鸡的_____ 条染色体的DNA 序列。
(2)豁眼雌鸡正常减数分裂时某个细胞中 W 染色体的数目可能是_____ 。
(3)若用白羽正常眼雌鸡与纯合黄羽豁眼雄鸡作为亲本,采用孟德尔豌豆杂交实验模式, 则 F2 中的白羽正常眼产蛋鸡出现的概率是____________________ 。
(4)请写出对 F1 正常眼测交遗传图解(要求:写出配子及基因型、表型及比例)__________________ 。
(1)要研究该家鸡的基因组序列,需要测定该家鸡的
(2)豁眼雌鸡正常减数分裂时某个细胞中 W 染色体的数目可能是
(3)若用白羽正常眼雌鸡与纯合黄羽豁眼雄鸡作为亲本,采用孟德尔豌豆杂交实验模式, 则 F2 中的白羽正常眼产蛋鸡出现的概率是
(4)请写出对 F1 正常眼测交遗传图解(要求:写出配子及基因型、表型及比例)
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【推荐3】荷兰猪的皮毛富有光泽,是制作上等裘皮衣帽的材料。某养殖场为探究一荷兰猪品种毛色遗传的特点,进行了如下杂交实验:
已知荷兰猪的毛色由等位基因C/c控制,且黑色是显性,回答下列问题:
(1)由上述实验可知,控制荷兰猪毛色的基因位于____________ 染色体上。如果对F1中雌性个体进行测交,则测交后代中灰色个体占____________ 。
(2)如果将实验二中F1的雌雄个体互相交配后产生的白色个体淘汰后再随机交配,则子代的表现型及比例是____________ ,如此随机交配若干代,判断荷兰猪的种群是否发生进化并说出理由:_______________ 。
(3)基因D可抑制C基因的表达,取两只白色的纯种荷兰猪进行杂交得到F1,F1雌雄个体间相互交配得到F2,结果如下:
①C/c基因与D/d基因在遗传时____________ (填“是”或“否”)遵循自由组合定律,理由是__________ 。
②雌性与雄性亲本的基因型分别是____________ ,F2中白色纯合个体占____________ 。
实验一 | 实验二 | |
亲本 | 黑色(♀)×白色(♂) | 黑色(♂)×白色(♀) |
F1 | 灰色(♀):灰色(♂)= 1:1 | 灰色(♀):灰色(♂)=1:1 |
已知荷兰猪的毛色由等位基因C/c控制,且黑色是显性,回答下列问题:
(1)由上述实验可知,控制荷兰猪毛色的基因位于
(2)如果将实验二中F1的雌雄个体互相交配后产生的白色个体淘汰后再随机交配,则子代的表现型及比例是
(3)基因D可抑制C基因的表达,取两只白色的纯种荷兰猪进行杂交得到F1,F1雌雄个体间相互交配得到F2,结果如下:
亲本 | 白色(♀)×白色(♂) | |
F1 | 白色(♀):白色(♂)=1:1 | |
F2 | ♀ | ♂ |
白色 | 黑色:灰色:白色=1:2:5 |
①C/c基因与D/d基因在遗传时
②雌性与雄性亲本的基因型分别是
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(0.4)
解题方法
【推荐1】基因驱动是指特定基因有偏向性地遗传给下一代的自然现象。研究发现,叶用莴苣(俗称生菜)细胞中的FANCM蛋白能够阻止减数分裂过程中互换的发生,科学家借助CRISPR/Cas9基因编辑技术(如图1所示,CRISPR/Cas9基因编辑系统包含Cas9编码基因和gRNA编码序列gRNAs),研发出人工FANCM基因驱动系统,从而在叶用莴苣中实现了外部引入的基因多代遗传。图2表示利用基因驱动技术获得FANCM突变基因的过程,利用同源定向修复功能,可以使另一条同源染色体上也插入基因驱动元件,从而获得FANCM基因纯合突变体。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/24/83be7583-a4a1-4248-8e88-e3219c27dd72.png?resizew=821)
(1)图1中gRNA的作用是________ ,为确定图2中基因驱动元件是否完整插入FANCM基因,最好选择的两组引物是________ (从图2中P1~P4四种引物中选择)进行PCR。
(2)PCR反应体系的成分中,能够决定复制特定DNA片段的是________ (填“模板”、“引物”或“taq酶”);为保证目的基因正确插入质粒中,需要在引物的________ (填“3'端”或“5'端”)添加限制酶的识别序列。在PCR过程中需要加入引物的原因是________ 。
(3)用FANCM基因纯合突变体作为母本与野生型父本杂交,F1中有多达7%的植株为纯合突变体。请解释纯合突变体产生的原因是________ 。利用基因驱动技术获得FANCM基因突变纯合体,在叶用莴苣遗传育种中的应用价值是________ 。
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(1)图1中gRNA的作用是
(2)PCR反应体系的成分中,能够决定复制特定DNA片段的是
(3)用FANCM基因纯合突变体作为母本与野生型父本杂交,F1中有多达7%的植株为纯合突变体。请解释纯合突变体产生的原因是
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【推荐2】双酚A(BPA)是一种含碳有机物,是重要的工业原料,在环境中不易降解,科研人员对土壤中细菌等微生物降解BPA进行了相关研究。
(1)BPA 由多种途径进入环境,沿着_____________ 在生态系统中传递,并逐级积累,产生_____________ 现象。
(2)为探究BPA对土壤中的细菌数量及种类的影响,科学家进行了以下实验。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/15/2958949406826496/2959528973262848/STEM/8a7355e2-bb74-4efd-ac47-ebaf09afbc0a.png?resizew=224)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/15/2958949406826496/2959528973262848/STEM/e2442174-0536-4122-b67c-d652e35aa04a.png?resizew=170)
①首先测定不同浓度 BPA 对土壤细菌生长情况的影响,结果如图 1 所示,实验结果表明__________________________ 。
(注:电泳条带宽度与细菌相对数量的多少有直接关系)
②16S rDNA基因存在于所有细菌中,该基因包含多个恒定区和可变区,恒定区序列在所有细菌间无显著差异,可变区序列具有种的特异性。为探究BPA对细菌群落多样的影响,利用16SrDNA基因的__________ (选填“恒定区”或“可变区”)序列设计引物,PCR扩增16S rDNA 片段,电泳结果如图 2。如图A、B、C条带是各处理所共有的,说明各处理土壤中具有相同的细菌种类。不同浓度BPA处理出现了特有的_____________ 条带,说明BPA处理形成了新种类的细菌。且共有条带中如 C 宽度不同,可推测不同浓度 BPA 导致_______________________________ ,该细菌群落在发生_____________ 。
(3)经过筛选,科研人员得到3株具有降解BPA能力的菌株,下列叙述正确的是_____________。
(1)BPA 由多种途径进入环境,沿着
(2)为探究BPA对土壤中的细菌数量及种类的影响,科学家进行了以下实验。
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①首先测定不同浓度 BPA 对土壤细菌生长情况的影响,结果如图 1 所示,实验结果表明
(注:电泳条带宽度与细菌相对数量的多少有直接关系)
②16S rDNA基因存在于所有细菌中,该基因包含多个恒定区和可变区,恒定区序列在所有细菌间无显著差异,可变区序列具有种的特异性。为探究BPA对细菌群落多样的影响,利用16SrDNA基因的
(3)经过筛选,科研人员得到3株具有降解BPA能力的菌株,下列叙述正确的是_____________。
A.分离BPA降解菌的培养基需要以BPA为唯一碳源 |
B.培养BPA降解菌时,通常需要将培养基调至中性或弱碱性 |
C.比较3株菌株降解BPA能力后,剩余菌液可直接倒掉 |
D.依据菌落的形状、大小、颜色等可进行菌种的初步鉴定 |
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【推荐3】截止2020年5月,新冠病毒(2019-nCoV)已在全球210多个国家和地区蔓延传播,引发了全球性的“防疫大战”。在防疫战中,尽早确诊并及时隔离是防止新冠病毒过度传播的有效手段。在现有的检测新冠病毒的方法中,最常用的是“荧光PCR法”。其基本原理是:将新冠病毒RNA逆转录为DNA,通过采用多重荧光RT一PCR技术,以2019—nCOV的两个独立基因ORF1ab基因和N基因的保守区为靶位点设计特异性的引物和一定量的荧光标记的DNA探针,单管双检同时测定新型冠状病毒两个独立基因,消除由于病毒变异带来的漏检风险。
请回答下列问题:
(1)“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有:___________ 、___________ 、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。
(2)如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来,则在试剂盒中的引物应该有___________ 种,下图为“基因ORFlab”对应的cDNA片段结构示意图,则与之对应的引物结合的部位应该是图中的___________ (用图中数学作答)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/8/2480182933053440/2480252637528064/STEM/07945454a18346a2a776fcd93817c196.png?resizew=377)
(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图(如图)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/8/2480182933053440/2480252637528064/STEM/1c6994af38f34e8d9be5080c5965906f.png?resizew=271)
①“平台期”出现的最可能原因是:______________________ 。
②理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈___________ (填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般会设定“双链荧光强度”的阈值(如图虚线),即达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本,在检测过程中都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释(试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确):______________________ 。
(4)某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”,但这显然是不攻自破的,因为任何热爱和平的国家、组织和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年,中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中,重申:______________________ 。
请回答下列问题:
(1)“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有:
(2)如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来,则在试剂盒中的引物应该有
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/8/2480182933053440/2480252637528064/STEM/07945454a18346a2a776fcd93817c196.png?resizew=377)
(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图(如图)。
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①“平台期”出现的最可能原因是:
②理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈
(4)某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”,但这显然是不攻自破的,因为任何热爱和平的国家、组织和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年,中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中,重申:
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(0.4)
【推荐1】两位女性科学家因对"CRISPR/Cas9 基因编辑技术"的贡献而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9系统由向导RNA和Cas9蛋白组成,由向导RNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程,其工作原理如下图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/1/15/2636612630183936/2637927758626816/STEM/19cb2496-db3e-461c-9160-15e6d93e6403.png?resizew=454)
(1)由于Cas9 蛋白没有特异性,用 CRISPR/Cas9 系统切割靶基因,向导 RNA的识别序列应具有的特点是_____ 。识别后在 PAM 序列(几乎存在于所有基因中)上游切断DNA双链的_____ 键。
(2)如果要获得基因敲除动物个体,应以_____ 作为受体细胞,用_____ 法导入 CRISPR/Cas9 基因表达载体。
(3)研究人员担心基因编辑发生"脱靶效应",导致其他非目标基因发生错误剪接和编辑。为检测脱靶率,研究者在小鼠受精卵分裂为两个细胞时,向其中一个细胞注入基因编辑工具,之后将此胚胎移植入母鼠子宫,待其发育到14.5 天时,将胚胎取出,把胚胎的细胞全部分散开,分成基因编辑细胞后代和非基因编辑细胞后代两个细胞群,分别提取DNA,测序、比对。
①用同一受精卵分裂形成的两个细胞作为处理对象和对照,优点是_____ 。
②为方便将基因编辑细胞后代和非基因编辑细胞后代分开,可在构建基因表达载体时利用某种荧光蛋白基因作为_____ 。
③将胚胎细胞分散开需要利用_____ 酶的作用。
实验结果发现 CRISPR/Cas9 技术的脱靶率很低,但人们仍然反对进行人类基因编辑的理由除了考虑到伦理道德方面的问题外,还有可能是敲除基因对接受基因敲除的婴儿的发育有不可预见性的影响,理由是生物体内的基因和性状并非一一对应,被敲除基因可能存在_____ 的现象。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/1/15/2636612630183936/2637927758626816/STEM/19cb2496-db3e-461c-9160-15e6d93e6403.png?resizew=454)
(1)由于Cas9 蛋白没有特异性,用 CRISPR/Cas9 系统切割靶基因,向导 RNA的识别序列应具有的特点是
(2)如果要获得基因敲除动物个体,应以
(3)研究人员担心基因编辑发生"脱靶效应",导致其他非目标基因发生错误剪接和编辑。为检测脱靶率,研究者在小鼠受精卵分裂为两个细胞时,向其中一个细胞注入基因编辑工具,之后将此胚胎移植入母鼠子宫,待其发育到14.5 天时,将胚胎取出,把胚胎的细胞全部分散开,分成基因编辑细胞后代和非基因编辑细胞后代两个细胞群,分别提取DNA,测序、比对。
①用同一受精卵分裂形成的两个细胞作为处理对象和对照,优点是
②为方便将基因编辑细胞后代和非基因编辑细胞后代分开,可在构建基因表达载体时利用某种荧光蛋白基因作为
③将胚胎细胞分散开需要利用
实验结果发现 CRISPR/Cas9 技术的脱靶率很低,但人们仍然反对进行人类基因编辑的理由除了考虑到伦理道德方面的问题外,还有可能是敲除基因对接受基因敲除的婴儿的发育有不可预见性的影响,理由是生物体内的基因和性状并非一一对应,被敲除基因可能存在
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【推荐2】研究者在大豆突变体库中筛选出纯合突变体甲,并对其展开研究。
(1)γ射线照射可诱导大豆发生基因突变或__________ ,是构建大豆突变体库常用的诱变方法。突变体甲表现为叶皱缩型,如图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/27/3b90f475-125a-490f-b7ce-1648136046d5.png?resizew=214)
(2)以突变体甲与野生型大豆为亲本,进行正反交获得F1。采用特异性引物对两亲本基因组DNA 进行扩增得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及F1植株进行PCR扩增的结果。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/27/09812839-58b6-4681-b358-d72dfde13c49.png?resizew=454)
据结果判断,1~10中__________ 是杂交成功获得的F1植株;推测F1中出现其它植株的原因是__________ 。F1自交收获F2,发现突变型124株、野生型380株,说明突变体甲叶型突变的遗传符合孟德尔的__________ 定律。
(3)研究发现突变体甲是7号染色体片段缺失导致的,预测该缺失范围内有6个基因(记为基因1~6)最有可能与甲的叶皱缩有关,而这6个基因在8号染色体上均有功能类似的基因(记为基因1'~6')。为确定基因1~6中与甲的叶皱缩直接相关的基因,研究者从野生型__________ 细胞中提取总RNA,逆转录获得DNA作为PCR模板进行扩增。结果发现只扩增出基因1~4,以及基因1'、3'、5'、6',故锁定基因__________ 作为重点研究对象,后命名为基因P和基因Q。
(4)研究者将同为叶皱缩表型的突变体乙与突变体甲杂交,子代均表现为叶皱缩,说明突变体乙与突变体甲的突变位点是__________ (相同/不同)的。进一步对突变体乙的基因测序,发现仅有基因Q发生突变。为确定基因Q的功能,将该基因转入__________ 的大豆中,若发现__________ ,则可证实基因Q与叶片正常发育直接相关。
(5)研究发现基因Q与大豆叶表皮角质层的发育过程有关,角质层具有保水、抵抗病菌和昆虫侵袭等作用。请预期该研究的应用价值:______________________ 。
(1)γ射线照射可诱导大豆发生基因突变或
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/27/3b90f475-125a-490f-b7ce-1648136046d5.png?resizew=214)
(2)以突变体甲与野生型大豆为亲本,进行正反交获得F1。采用特异性引物对两亲本基因组DNA 进行扩增得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及F1植株进行PCR扩增的结果。
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据结果判断,1~10中
(3)研究发现突变体甲是7号染色体片段缺失导致的,预测该缺失范围内有6个基因(记为基因1~6)最有可能与甲的叶皱缩有关,而这6个基因在8号染色体上均有功能类似的基因(记为基因1'~6')。为确定基因1~6中与甲的叶皱缩直接相关的基因,研究者从野生型
(4)研究者将同为叶皱缩表型的突变体乙与突变体甲杂交,子代均表现为叶皱缩,说明突变体乙与突变体甲的突变位点是
(5)研究发现基因Q与大豆叶表皮角质层的发育过程有关,角质层具有保水、抵抗病菌和昆虫侵袭等作用。请预期该研究的应用价值:
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非选择题-实验题
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较难
(0.4)
名校
【推荐3】科研人员以酵母菌为受体细胞,通过转基因技术研究水稻某种病毒的蛋白P与水稻蛋白的相互作用。
(1)实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸,培养时在培养基中需添加____________________ ,酵母菌才能在细胞内的核糖体上合成生长所需的__________ 。
(2)将蛋白P基因连接在质粒K(具有色氨酸合成基因)上的BD蛋白合成基因之后,构建含有BD-P融合基因的__________ 。将其导入缺陷型酵母菌,用不含__________ 的选择培养基筛选转化的酵母菌获得目的菌落,从这些菌落中可筛选得到基因成功表达BD-P融合蛋白的酵母菌A。
(3)为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用,科研人员提取水稻细胞的mRNA,在逆转录酶作用下获得cDNA,用限制酶切后再将其与质粒T(具有亮氨酸合成基因)上的AD蛋白合成基因连接,形成具重组质粒T,构建水稻cDNA文库。然后取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到__________ 中,将转化后的酵母菌接种在不含__________ 的培养基中培养,获得了分散的多个单菌落。经检测这些酵母菌中含有4种水稻蛋白,说明这4种水稻蛋白能够____________________ 。
该实验的实验原理是:在实验用酵母菌细胞内,组氨酸合成基因的转录受到调控(如下图所示),若被测的水稻蛋白能与病毒的蛋白P结合,则BD、AD两个蛋白可以充分接近,组氨酸合成基因才能转录。
(1)实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸,培养时在培养基中需添加
(2)将蛋白P基因连接在质粒K(具有色氨酸合成基因)上的BD蛋白合成基因之后,构建含有BD-P融合基因的
(3)为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用,科研人员提取水稻细胞的mRNA,在逆转录酶作用下获得cDNA,用限制酶切后再将其与质粒T(具有亮氨酸合成基因)上的AD蛋白合成基因连接,形成具重组质粒T,构建水稻cDNA文库。然后取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到
该实验的实验原理是:在实验用酵母菌细胞内,组氨酸合成基因的转录受到调控(如下图所示),若被测的水稻蛋白能与病毒的蛋白P结合,则BD、AD两个蛋白可以充分接近,组氨酸合成基因才能转录。
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