【推荐1】马铃薯是一种重要的粮食作物，但是目前栽种的马铃薯遗传背景狭窄，抗性资源少，特别是一些抗细菌性病害的基因资源贫乏。青枯病是危害马铃薯的世界性细菌病害，在温暖潮湿的环境下，病原菌极易通过土壤侵染寄主，并使寄主大面积的发病。茄子核基因中存在抗青枯病的基因资源，利用上述材料可以获得抗青枯病马铃薯新品种，具体方法有基因工程育种、植物体细胞杂交等。
(1)①当茄子核基因中抗青枯病的基因序列部分已知则可通过PCR技术获得该基因，在PCR反应体系中需加入模板、原料、_________酶和引物等，该过程包括多次循环，每个循环包括_________和延伸。将所得的抗青枯病基因与农杆菌Ti质粒连接构建_________，通过农杆菌转化法使马铃薯表现出抗性。
②下列关于基因工程操作正确的是哪几项? _________
A.限制性内切核酸酶将DNA双链切割成两条单链
B.质粒通常具有一至多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接
C.质粒具有某些标记基因如抗生素抗性基因，便于对目的基因进行检测和鉴定
D.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功表达的方法都可以用分子杂交法
(2)将两种待融合亲本叶片切成小片并分别放入酶解液中，其中含有___________酶。经过镍丝网过滤，然后将滤液离心，弃去__________，将离心下来的原生质体重新悬浮，将两种亲本原生质体悬浮液等比例混合，用__________试剂诱导融合，之后还需对杂种细胞进行鉴定和筛选。
(3)杂种细胞移至新的培养基中诱导产生愈伤组织，后将所得愈伤组织转至发芽培养基形成芽，再在另一培养基上形成根，上述几种培养基中成分的主要区别是____________。该培养过程是利用___________途径获得再生植株。将生根的组培苗从培养室取出，通过一系列措施，以提高试管苗对外部环境的适应能力，此步骤被称为____________。
(4)经上述过程所得的再生植株并非均为目标杂种植株，原因是杂种细胞在培养中可能出现___________等情况。同时，融合双亲细胞未经过任何处理，以完整的基因组进行融合，在导入优良性状的同时也会引入不利的性状，因此还需____________。有研究人员对上述过程进行了如下改进：①在融合前用紫外线处理茄子原生质体，使其染色体断裂，在融合中使茄子的染色体片段整合到马铃薯的基因组；②用代谢抑制剂（碘乙酸）等处理马铃薯细胞使其细胞质失活。这样改进后有利于茄子断裂的染色体片段整合到马铃薯基因组中，这种改进设计的意义是___________。

【推荐3】神经酸是一种不饱和脂肪酸， 是神经细胞的核心成分， 它通过改善神经细胞功能而有 益于大脑健康。 目前神经酸一般是从植物中提取， 很难大规模生产。利用转基因生物合成 神经酸已成为热门研究课题。回答以下问题：
(1)与大肠杆菌相比，酵母菌更适合作为生产真核细胞产品的工程菌， 从细胞结构角 度分析，主要原因是______________________________________________________。
(2)研究者利用 DNA 重组技术，对酿酒酵母进行基因改造，使其能够生产神经酸， 相关设计如下：
① 构建基因表达载体时， 需在目的基因的_____________(填位置)添加 β-雌二醇诱 导型启动子。利用成功转化后的酿酒酵母进行生产时， 需要向培养基中添加_________ ，以 提高神经酸合成基因的表达量。
②酵母菌的 Elo2 基因会降低神经酸合成量， 现利用基因组编辑技术 (CRISPR/Cas9) 将 Elo2 基因完全敲除，其工作原理是一条单链“向导”核糖核酸(gRNA) 引导核酸内切 酶 Cas9 到一个特定的基因位点进行切割，如图所示。

其中 gRNA 是根据_________基因特定核苷酸序列设计而成的短链 RNA 。Cas9 能够在特定位置断开______________，实现敲除该基因的目的。为确定酿酒酵母是否成功敲除了 Elo2 基因， 应根据 Elo2 基因的部分序列设计引物进行 PCR，再结合电泳技术对其产物加以鉴定， 若________(填“出现”或“未出现”) 相应的条带， 则说明敲除成功。
(3)成功改造的工程菌需采用______   (填“固体”或“液体”)培养基进行扩大培养，并严格控制 pH 、________、 ______等发酵条件， 从而生产更多的神经酸。