据报道,书本上分布大量的微生物。某科研人员通过实验调查书页上微生物的种类和量,结果如下图所示。回答下列问题:
(1)该实验利用牛肉膏蛋白胨培养基来培养微生物。培养基配制完,采用____________ 法灭菌,牛肉膏提供的主要营养是____________ 等,蛋白胨提供的主要营养是______________ 等。
(2)该科研人员采取的接种方法是____________ ,该方法使用的接种工具是_____________________________ 。
(3)该科研人员实验时,宜选取菌落数目稳定时的记录作为结果,理由是________________________ ,可根据____________ 来判断微生物的种类。
(4)该科研人员用消毒棉签取一页书上微生物,配成10mL菌液,并对其进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释一定倍数的样品接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数并经计算平均为124,经计算该菌液中微生物的数量为1.24×105个,则所取样液的稀释倍数是________________________________________ 。
(1)该实验利用牛肉膏蛋白胨培养基来培养微生物。培养基配制完,采用
(2)该科研人员采取的接种方法是
(3)该科研人员实验时,宜选取菌落数目稳定时的记录作为结果,理由是
(4)该科研人员用消毒棉签取一页书上微生物,配成10mL菌液,并对其进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释一定倍数的样品接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数并经计算平均为124,经计算该菌液中微生物的数量为1.24×105个,则所取样液的稀释倍数是
更新时间:2022-06-04 17:08:48
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【推荐1】如图1是在发酵罐内利用三孢布拉氏霉发酵生产β胡萝卜素过程中,菌体生物量及β胡萝卜素产量随时间变化的曲线图。图2是样品层析结果及与β胡萝卜素标准样品的比对。请回答下列问题:
(1)发酵罐内玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供______________ 。
(2)图1中,菌体的最快增长出现在第________ h左右,菌体的生物量到达最大值后下降,其原因是______________ 。
(3)β胡萝卜素常用的提取方法为______________ 法,实验表明,石油醚的提取效果远好于丙酮和酒精,原因是___________________
(4)将萃取的胡萝卜素样品与β胡萝卜素标准样品进行比对,结果如图2。从图中分析可知,色带________ 为β胡萝卜素。
(1)发酵罐内玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供
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【推荐2】将没有吃完的西瓜,盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。
(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、___________ 和_________ 。一般采用____________ 法对培养基进行灭菌。
(2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板___________ (填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用__________ 法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在_________ 附近进行。
(3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜的浸出液中有________ (填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说明西瓜被细菌污染的程度越_________ (填“高”或“低”)。
(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、
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【推荐3】新冠疫情过后很多人养成了佩戴口罩的习惯,这是预防病原体感染的有效措施之一。使用过的口罩,如果没有妥善处理会对生态环境造成巨大威胁。某科研团队欲从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纤维)的细菌。请据下图回答下列问题:
(1)该科研团队设计了一个对照实验,请将以下实验步骤补充完整:
①采集来自不同环境的等量土壤,编号为A、B、C、D。将同型号等量的一次性口罩经____________ 处理后埋入各组土壤中。
②在相同且适宜条件下培养一段时间后,观察各组中口罩的腐烂程度。
③从口罩腐烂程度____________ (选填“最大”或“最小”)的一组中采集细菌样品。
(2)分离纯化目的菌时,培养基应以____________ 作为唯一的碳源,同时还需要添加水和_______ 、______ 等营养物质。配置好的培养基常放入____________ 中进行灭菌。
(3)上图所用的接种方法是____________ ,该法除了能接种还能计数,统计的菌落数往往比活菌的实际数目____________ (选填“多”或“少”),这是因为____________ 。
(1)该科研团队设计了一个对照实验,请将以下实验步骤补充完整:
①采集来自不同环境的等量土壤,编号为A、B、C、D。将同型号等量的一次性口罩经
②在相同且适宜条件下培养一段时间后,观察各组中口罩的腐烂程度。
③从口罩腐烂程度
(2)分离纯化目的菌时,培养基应以
(3)上图所用的接种方法是
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【推荐1】乐果是一种广泛使用的有机磷农药,对被乐果污染的土壤进行微生物修复一直是科学家研究的热点。现在从土壤中筛选能有效降解乐果的微生物,请回答下列问题:
(1)用于筛选的样品应来自_________ 的土壤。为避免杂菌污染,取样和稀释土样时应注意:__________ 。
(2)微生物驯化是指在培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中,所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。上述驯化培养基按功能分属于__________ 培养基。培养基冷凝后要将平板倒置,既可防止__________ ,又可避免培养基中的水分快速挥发。驯化后含有微生物的菌液通过__________ 法进行接种,从分离得到的单菌落中挑取待筛选的菌株。研究人员通常根据菌落的__________ 特征来初步区分不同种的微生物。
(3)若要进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力,请写出简要的实验思路:__________ 。
(1)用于筛选的样品应来自
(2)微生物驯化是指在培养过程中,逐步加入某种物质,让其逐渐适应,得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中,所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。上述驯化培养基按功能分属于
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解题方法
【推荐2】在过去半个多世纪里,陆地生物是新抗生素的主要来源。随着研究的不断深入,从陆地生物中发现新的抗生素的机会将大大减少。海洋生物是巨大的潜在药物资源,具有广阔的开发应用前景。科学家采用分离纯化技术获得一株具有一定抑菌活性的海洋真菌S9,并对该菌株的抑菌性能进行初步鉴定。通过对该菌的一些基本特性、培养条件进行初步研究,以期获得具有较高抗菌活性的物质。回答下列问题:
(1)为探究S9的最适培养条件,科学家设置了多种实验条件(如表1所示),其中A为碳源(质量浓度为5g·L-1)、B为氮源(蛋白胨,g·L-1)、C为pH、D为培养时间(d),以培养液中的蛋白质(该真菌的次生代谢产物)含量相对值(K)为检测标准进行培养。然后分别以A、B、C、D为自变量设置甲、乙、丙、丁实验,每组实验又设置I、Ⅱ、Ⅲ3个实验组,实验结果如表2所示。由图可知,当碳源为__________ 、氮源质量浓度为__________ g·L-1、pH和培养时间分别为__________ 和__________ 时,更有利于S9次生代谢产物的产生。
实验条件
表1
表2
(2)为探究S9的次生代谢产物具有的抗菌作用、科学家把离心后的真菌培养液加入察氏培养基,待凝固后,将稀释后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌接种于平板上,于25℃条件下培养48h,结果如表3所示。
表3
①培养基一般使用____________ 法进行灭菌。表3中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌的接种方法是_________________ 。
②由表3得出的实验结论是______________________ 。
(1)为探究S9的最适培养条件,科学家设置了多种实验条件(如表1所示),其中A为碳源(质量浓度为5g·L-1)、B为氮源(蛋白胨,g·L-1)、C为pH、D为培养时间(d),以培养液中的蛋白质(该真菌的次生代谢产物)含量相对值(K)为检测标准进行培养。然后分别以A、B、C、D为自变量设置甲、乙、丙、丁实验,每组实验又设置I、Ⅱ、Ⅲ3个实验组,实验结果如表2所示。由图可知,当碳源为
实验条件
表1
水平 | A | B | C | D |
1 | 葡萄糖 | 1.25 | 5.0 | 8 |
2 | 乳糖 | 1.50 | 6.5 | 10 |
3 | 蔗糖 | 1.75 | 8.0 | 12 |
组别 | 甲 | 乙 | 丙 | 丁 |
变量 | A | B | C | D |
Ⅰ | 1 | 1 | 1 | 1 |
Ⅱ | 2 | 2 | 2 | 2 |
Ⅲ | 3 | 3 | 3 | 3 |
K1 | 0.58 | 0.59 | 0.62 | 0.60 |
K2 | 0.63 | 0.66 | 0.63 | 0.70 |
K3 | 0.67 | 0.62 | 0.61 | 0.57 |
(2)为探究S9的次生代谢产物具有的抗菌作用、科学家把离心后的真菌培养液加入察氏培养基,待凝固后,将稀释后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌接种于平板上,于25℃条件下培养48h,结果如表3所示。
表3
大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 白念珠菌 | |
察氏培养基(含离心真菌培养液) |
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察氏培养基(不含离心真菌培养液) |
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②由表3得出的实验结论是
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【推荐3】如图表示用影印法筛选缺陷型突变菌株的过程。缺陷型菌株为在基本培养基中能生长的菌株经过诱变处理后丧失了对某种物质的合成能力,必须在基本培养基中添加该物质才能生长的菌株。请回答下列问题:
注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸。
(1)图中①过程采用的接种方法为______ 。②过程是将丝绒布上的菌落分别接种到两个培养基上,接种时应注意_______ 。图中筛选出的缺陷型菌株的菌落为______ 。
(2)如表为分别添加了五种氨基酸的五种培养基,若将筛选出的缺陷型菌株制成悬液分别接种在这五种培养基中,在适宜且相同条件下培养一段时间,发现只在C、D培养基上长出了菌落,则该缺陷型菌株不能合成______ 。
(3)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、______ 、______ 和无机盐。无菌操作是微生物培养成功的保证,通常对培养基、培养皿、接种环等采用的灭菌方法依次为________ 。
(4)在纯化菌种时需要用到选择培养基,选择培养基的特点是__________ 。
注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸。
(1)图中①过程采用的接种方法为
(2)如表为分别添加了五种氨基酸的五种培养基,若将筛选出的缺陷型菌株制成悬液分别接种在这五种培养基中,在适宜且相同条件下培养一段时间,发现只在C、D培养基上长出了菌落,则该缺陷型菌株不能合成
培养基 | 所含氨基酸 | ||||
A | 组氨酸 | 苏氨酸 | 谷氨酸 | 天冬氨酸 | 亮氨酸 |
B | 精氨酸 | 苏氨酸 | 赖氨酸 | 甲硫氨酸 | 苯丙氨酸 |
C | 酪氨酸 | 谷氨酸 | 赖氨酸 | 色氨酸 | 丙氨酸 |
D | 甘氨酸 | 天冬氨酸 | 甲硫氨酸 | 色氨酸 | 丝氨酸 |
E | 半胱氨酸 | 亮氨酸 | 苯丙氨酸 | 丙氨酸 | 丝氨酸 |
(3)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、
(4)在纯化菌种时需要用到选择培养基,选择培养基的特点是
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【推荐1】为了提取当地环境中的独特菌种,某研究小组以优质高粱、上等小麦为原料,制作培养基,搜集、分离空气中的微生物。他们还尝试制作其他一些发酵产品。请回答下列问题:
(1)培养基在接种微生物前,必须先进行________ (灭菌方式),培养基按照用途分成________ 培养基和_________ 培养基。
(2)将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后,取10g该培养基,用无菌水制成100mL样品溶液,再将样品溶液稀释103倍后,各取样品溶液0.1 mL在5个细菌培养基平板上接种,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是________ ,每克培养基样品中的细菌数量为______ ×107个;与血细胞计数板相比,此计数方法测得的细菌数目较实际值____ ,原因是___________________________
(3)制作葡萄果酒的主要微生物是_______ ,其代谢类型是_______ ,其产物乙醇与______________ 试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验。
(4)如果把葡萄果酒制成葡萄果醋,要适时进行充气,因为醋酸菌将酒精变成醋酸时需要______ 的参与。
(5)制作泡菜时,应选用火候好、无裂纹、无砂眼的泡菜坛,坛盖边沿的水槽应注满水,并且要时常补充水槽中的水,因为乳酸菌需要______ 的环境。泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜主要是由_______ 的繁殖造成的。
(1)培养基在接种微生物前,必须先进行
(2)将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后,取10g该培养基,用无菌水制成100mL样品溶液,再将样品溶液稀释103倍后,各取样品溶液0.1 mL在5个细菌培养基平板上接种,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是
(3)制作葡萄果酒的主要微生物是
(4)如果把葡萄果酒制成葡萄果醋,要适时进行充气,因为醋酸菌将酒精变成醋酸时需要
(5)制作泡菜时,应选用火候好、无裂纹、无砂眼的泡菜坛,坛盖边沿的水槽应注满水,并且要时常补充水槽中的水,因为乳酸菌需要
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【推荐2】某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________ 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________ 。甲、乙培养基均属于______________ 培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________ 倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是________________ (答出1点即可)。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是
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【推荐3】农业生产中,研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下图所示程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂是一种含氮有机物,在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。请回答下列问题。
(1)图中接种的工具是_________ ,需对接种工具灼烧灭菌__________ 次。接种的平板需要倒置培养的原因是_________ 。
(2)在上图选育过程中,应将土壤浸出液接种于以_________ 为唯一氨源的固体培养基上,此固体培养基中还应包括_________ 基本营养。在此培养基上形成的菌落中,__________ 的菌落是能高效分解该除草剂的最理想菌落。
(3)某小组用稀释涂布平板法测定该菌株数目,在稀释度为10-5的3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上菌落数分别是38、42、40,且对照的空白平板上菌落数为0,则可以推测1g土壤中的活菌数约为_________ 个。
(4)科研人员用射线处理该细菌,获得两个突变株A和B,然后对A和B进行实验,结果如下表:
将突变株A和B混合接种于一般培养基中,无需添加营养物质甲和乙,也能生长的原因可能是_________ 。
(1)图中接种的工具是
(2)在上图选育过程中,应将土壤浸出液接种于以
(3)某小组用稀释涂布平板法测定该菌株数目,在稀释度为10-5的3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上菌落数分别是38、42、40,且对照的空白平板上菌落数为0,则可以推测1g土壤中的活菌数约为
(4)科研人员用射线处理该细菌,获得两个突变株A和B,然后对A和B进行实验,结果如下表:
接种的菌种 | 一般培养基 | 实验处理及结果 |
A | 不生长 | 添加营养物质甲,能生长 |
B | 不生长 | 添加营养物质乙,能生长 |
A+B | 能生长 | 无需添加营养物质甲和乙,能生长 |
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【推荐1】自生固氮菌能独立完成固氮作用,在农业生产中具有广泛的用途,研究人员欲从土壤中筛选出自身固氮菌菌株。请回答下列问题:
(1)培养微生物的培养基中,一般都含有水、________________ 、氮源和无机盐。对培养基进行灭菌的常用方法是________________ ,要从土壤样品中分离出自身固氮菌,在获得土壤浸出悬液后,可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于缺________________ 的培养基上进行筛选。
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不易过多的原因是________________ ,涂布培养四天后,可通过观察________________ 的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。
(3)纯化自身固氮菌培养的接种方法主要有稀释涂布平板法和________________ 法两种。
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行________________ 处理后,才能扔掉。
(1)培养微生物的培养基中,一般都含有水、
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不易过多的原因是
(3)纯化自身固氮菌培养的接种方法主要有稀释涂布平板法和
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行
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解题方法
【推荐2】牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌,设计了如下实验。请分析并回答下列问题。
实验步骤:
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌
①配制全营养LB固体培养基,配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂(一种凝固剂)。
②配制尿素固体培养基,配方:水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。
Ⅲ.制备瘤胃稀释液并接种,如图1所示。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
(1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质:____ 。
(2)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下,利用稀释涂布平板法进行分离,需要用到图2中的实验器材有____ 。
(3)为检测该培养基灭菌是否彻底,应采用的检测方法是______ 。为了判断尿素培养基是否具有选择作用,实验时还需要同时接种全营养平板,如果同一浓度梯度下,尿素培养基上的菌落数____ (填“大于”“等于”或“小于”)全营养培养基上的菌落数,则说明尿素培养基具有选择作用。
(4)为了避免混淆,本实验中使用的平板需要在培养皿的____ (填“皿盖”或“皿底”)做好标记。
(5)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养,培养后平板上出现的菌落数如图1所示,则10 mL瘤胃样品中约含有目标活菌______ 个。该方法统计获得的菌落数往往比实际的活菌数____ ,原因是_______ 。
实验步骤:
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌
①配制全营养LB固体培养基,配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂(一种凝固剂)。
②配制尿素固体培养基,配方:水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。
Ⅲ.制备瘤胃稀释液并接种,如图1所示。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
(1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质:
(2)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下,利用稀释涂布平板法进行分离,需要用到图2中的实验器材有
(3)为检测该培养基灭菌是否彻底,应采用的检测方法是
(4)为了避免混淆,本实验中使用的平板需要在培养皿的
(5)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养,培养后平板上出现的菌落数如图1所示,则10 mL瘤胃样品中约含有目标活菌
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(0.65)
名校
【推荐3】牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况,有人做了如下图所示的实验。请回答下列有关问题:
(1)微生物培养操作过程中,玻璃器皿和金属用具等可以放入____ 内,在160-170℃加热1-2 h可达到灭菌的目的。例平板时,需要等待平板冷却后,将平板______ 放置。
(2)微生物接种的方法,最常用的是_____ 和稀释涂布平板法,后者是将菌液进行一系列的_____ 然后将各组菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(3)从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养菌中加入______ ,培养后菌落呈现___ 色的可以认定为大肠杆菌。
(4)若上图所示操作涂布了 3个培养皿,菌落数分别为40个、41个、39个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为____ 个。运用这种方法统计的结果往往较实际值______ (填“偏大”成“偏小”),原因是______ 。
(1)微生物培养操作过程中,玻璃器皿和金属用具等可以放入
(2)微生物接种的方法,最常用的是
(3)从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养菌中加入
(4)若上图所示操作涂布了 3个培养皿,菌落数分别为40个、41个、39个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为
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