【推荐2】臭鳜鱼是利用新鲜鳜鱼为原料，配以食盐、花椒等辅料，由乳酸菌等多种微生物共同发酵制得的发酵鱼制品，主要的制作流程如下：

a.取新鲜鳜鱼，用鱼鳞刷刷去鱼体表面鱼鳞，再经剖腹宰杀，去除内脏和鱼鳃，用自来水和10%盐水先后清洗一次。沥水待用。 b.将鱼平整码放于鳜鱼发酵专用装置内，一桶约码放30kg，每码一层，撒上若干粒干炒过的花椒（花椒总量为鱼重量的0.1%），码放结束后在上层鱼体上放置按压板。 c.向桶内加入提前配制好的腌制液，即8%（w/v）食盐溶液，以刚好浸没按压板为宜，按压板上放置扁圆状砝码（按压重量为鱼重量的40%），用以将鱼体全部浸压于腌制液液面以下。 d.合上发酵装置顶盖，以厌氧发酵方式，8℃发酵16d。

(1)臭鳜鱼制作过程中花椒的作用有______，压板和圆状砝码将鱼体全部浸压于腌制液液面以下的目的是______。
(2)乳酸菌生长的最适宜的温度范围在25~37℃之间，但发酵温度却控制为8℃，是因为在8℃条件下______。

(3)科研人员尝试从自然发酵的臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如上图：
a.步骤②需充分振荡20min的目的是______。步骤③将菌悬液稀释了______倍。
b.步骤③④分离纯化微生物的方法叫______。
c.步骤④⑤所用的MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂，其中为微生物提供氮源的成分有______。⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现______。
(4)科研人员采用以下实验流程检测分离出的一株清酒乳杆菌的代谢产物，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假单胞菌等4种病原菌的抑制效果：
①取10mL灭菌的琼脂倾注于A、B、C、D培养皿底层，待琼脂凝固后在其上均匀放置4个牛津杯。
②将4种病原菌悬液分别与营养琼脂等比例混合，取20mL分别倾注于A、B、C、D培养皿内，待琼脂凝固后拔下牛津杯，留下的小孔分别标注为1、2、3、4号（如图）。
③向1号孔中加入？作为对照，向2、3、4号孔中分别加入100μL含有清酒乳杆菌代谢产物的液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，结果如下图：

步骤③中“？”加入的液体是______，根据实验结果可以得出的结论是______。

【推荐3】珠海市生活垃圾分类管理条例自2021年6月起施行，要求单位及个人按可回收物、有害垃圾、厨余垃圾、其他垃圾四类进行定时定点投放。废纸作为可回收利用的废弃物资源之一，由于其纤维素含量高、价格低廉、来源广泛及生产量大等特点具有良好的开发应用潜力。
中科院近代物理研究所的研究人员利用经重离子束处理选育的长枝木霉突变菌株LC-M4进行废纸碳源发酵产酶的相关实验，结果发现选用的办公废纸、餐巾废纸、杂志纸和硬纸板纸中，硬纸板纸发酵产生的相关酶活性最高。
(1)纤维素酶是一类复合酶，至少包括______________________。
(2)通过研究废纸结构和组成，科研人员发现不同废纸中纤维素为主要成分，造纸过程中添加的碳酸钙等填料可以为菌株生长提供_______________________。接种LC-M4可以使用_____________法。
(3)纤维素酶的发酵方法有___________和_________________两种。
(4)上述突变菌株LC-M4进行废纸碳源发酵产酶的相关实验中，除可直接测定酶活性外，还可以通过刚果红染色法来比较不同废纸碳源发酵产生纤维素酶活性的高低，请简要写出相关实验思路：________________________。

【推荐1】超氧化物歧化酶（SOD）是能够清除细胞内氧自由基的金属氧化酶，根据螯合金属不同分为Fe-SOD、Zn-SOD、Mn-SOD、Cu-SOD等，其中Fe-SOD（黄色，两条多肽链组成）只存在于原核细胞中。科研人员利用凝胶色谱法从伤寒沙门氏菌中分离出Fe-SOD，并用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。回答下列问题：
(1)为获得充足的生物材料，研究人员采用____法（接种方法）在LB____（填物理状态）培养基上纯化并对伤寒沙门氏菌进行计数。
(2)研究人员对纯化的伤寒沙门氏菌样品进行了处理和粗分离，过程如下：纯化得到细菌→破壁→离心收集____（填“上清液”或“沉淀物”）→透析，其中透析的目的是____。
(3)研究人员利用凝胶色谱法进行Fe-SOD的分离，在分离蛋白质过程中，如果____均匀一致地运动，说明色谱柱制作成功。如图所示为凝胶色谱分离结果，图中蛋白质相对分子质量最小的是____。

   

(4)科研人员用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定时，得到1个电泳条带且相对分子质量为20000Da，由此可确定Fe-SOD相对分子质量是____Da。