【推荐1】如图为四种生物的基本结构单位，据图回答：

（1）最有可能属于病毒的是____，它在结构上不同于其他三种图示的显著特点是_________；病毒的生活及繁殖必须在_________内才能进行。
（2）图中属于原核细胞的是_______，原核细胞结构上不同于真核细胞的最显著特点是______________，与真核细胞的统一性表现在_________________。
（3）图中能进行光合作用的是_____，能完成此生理过程的物质基础是因为其内含有_______________。
（4）甲、乙、丁细胞中都具有的细胞器是__________。
（5）甲细胞的DNA主要存在于_______________（填名称）中。

【推荐2】研究人员从金环蛇毒液中分离得到一种新型抗菌肽 CBF，其抗菌活性强、安全性好，同时具有抗炎作用，是抗生素的潜在替代品。
(1)运用基因工程技术，大规模生产抗菌肽，首先要从采集的麦秸秆垛底层土样分离枯草芽孢杆菌。制备的土壤悬液可采用____法分离纯化枯草芽孢杆菌。
(2)选用枯草芽孢杆菌为受体菌，通过转化法将构建好的基因表达载体导入枯草芽孢杆菌。目的基因在受体菌中能表达，但在对抗菌肽 CBF 功能进行检测时发现其功能异常，推测可能的原因是____（答一点即可），请你试提出一个相应的解决方案____。
(3)由于抗菌肽的抗菌特性使得它们对宿主菌具有潜在的致命毒性，影响抗菌肽的产量。利用SUMO融合技术（原理如图1：SUMO-CBF融合基因可以编码融合蛋白）在枯草芽孢杆菌中重组表达并制备具有活性的重组抗菌肽CBF可以减弱其对宿主菌的毒性。

SUMO-CBF融合基因可以拼接成功的理论基础是____（答两点即可）。
(4)为探究重组抗菌肽CBF-化学合成抗菌肽CBF联合抗菌机理，科学家利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄球菌细胞内的超微结构，结果如图2。请据图回答问题。

结果显示：
（a）未加抗菌剂：细菌菌体较小，其细胞质分布均匀；
（b）化学合成抗菌肽CBF处理：细胞壁和细胞膜等结构不光滑，略显粗糙；
（c）重组抗菌肽CBF处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象；
（d）重组抗菌肽 CBF-化学合成抗菌肽 CBF联合处理：细胞壁及细胞膜等结构发生破裂，细胞质出现了严重的固缩及空泡化现象。
①设置 a组的目的是____。
②由此推测与c组比较，d组使金黄色葡萄球菌细胞质出现严重固缩及空泡化现象的机理是____。

【推荐3】下列各图分别表示几种生物的基本结构单位，请据图回答下面的问题。

（1）图中最可能是病毒的是________，病毒的生活及繁殖必须在_____________内才能完成。
（2） 图中属于原核细胞的是______，它在结构上不同于真核细胞的最显著特点是没有____________。
（3） 图A是_________细胞,判断的理由是其有_______________。
（4）用标号回答:具有单层膜结构的细胞器有____________，与分泌蛋白合成有关的细胞器有___________。（少答错答均不给分）
（5） 在玉米田中有时会出现极少量的白化苗,该白化苗由于不能进行光合作用而很快死亡,你认为这是由于细胞中[     ]_____________发育异常导致的。 “霜叶红于二月花”,与之有关的细胞结构是[        ]____________。

【推荐1】基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程。两位女科学家因发现“CRISPR / Cas9基因剪刀”而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9系统可对基因组进行定点编辑，其工作原理如图1所示。人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径如图2所示。请回答下列问题：

(1)据图1可知，在sgRNA1和sgRNA2的引导下，Cas9使基因中的_____键断裂，最终实现对靶基因序列的编辑。但该技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越_____（填“高”或“低”）。
(2)获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取总RNA合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因（5′CTTCGAAATTC﹣HSA基因﹣TCTCCCGATCGG 3′ ） ，根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是_____（填字母）。若一条单链 cDNA在 PCR仪中进行4次循环，则需要消耗_____个引物。
A．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
B．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣TCTCCCGATCGG﹣3′
C．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣AGAGGGCTAGCC﹣3′
D．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
(3)下图甲为获取的含有目的基因（HAS基因）的DNA片段，Sau3A Ⅰ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。

若用BamHⅠ切割图甲所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_____切割图丙所示质粒，以便构建基因表达载体，上述方案存在一定缺陷，故切割图甲所示DNA片段的最佳方案是选用_____酶。 用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒_____（选填“能”、“不能”或“不一定能”）被Bam HⅠ切割。
(4)启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____（填字母）。

A．人血细胞启动子	B．水稻胚乳细胞启动子
C．大肠杆菌启动子	D．农杆菌启动子

(5)若利用乳腺生物反应器来生产rHSA，则应将重组HSA导入_____。为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_____的生物学功能一致。

【推荐2】γ射线照射可诱导大豆发生基因突变和染色体变异，是构建大豆突变体库 常用的诱变方法。研究者在大豆突变体库中筛选出叶皱缩型的纯合突变体甲，并对其 展开研究。
(1)以突变体甲与野生型大豆为亲本，进行正反交获得 F₁ 。采用特异性引物对两亲本基 因组 DNA 进行 PCR 扩增，电泳后得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。
下图是用该引物对双亲及 F₁ 植株(记为 1-10)基因组进行 PCR 扩增后电泳的结果。

据结果判断，1～ 10 中____________________是杂交成功获得的 F₁ 植株。F₁ 中出现其 它植株的原因可能是______________________________________________________。
(2)研究发现突变体甲是 7 号染色体片段缺失导致的。预测该缺失范围内有 6 个基因(记 为基因 1～6)最有可能与甲的叶皱缩有关，而这 6 个基因在 8 号染色体上均有功能类 似的基因(记为基因 1＇ ～6＇ )。为确定基因 1～6 中与甲的叶皱缩直接相关的基因， 研究者从野生型___________细胞中提取总 RNA，经___________过程获得__________ 作为 PCR 模板，根据上述基因设计引物进行扩增。结果发现只扩增出基因 1～4，以 及基因 1＇、3＇ 、5＇ 、6＇ ，故锁定基因____________作为重点研究对象，后命名为基因 P 和基因 Q。
(3)研究者将同为叶皱缩表型的突变体乙与突变体甲杂交，子代均表现为叶皱缩，说明 突变体乙与突变体甲的突变位点是____________ (填“相同”或“不同”)的。进一步 对突变体乙的基因测序，发现仅有基因Q 发生突变。请简要说出进一步证实基因Q 与 叶片正常发育直接相关的实验思路： ________________________________。

【推荐3】我国科学家利用农杆菌介导法，将含高赖氨酸蛋白基因sb401的表达载体导入玉米细胞，最终培育出“转高赖氨酸蛋白基因sb401玉米”。结合图示回答问题：

（1）构建基因表达载体时，为了便于sb401基因与Ti质粒连接，应怎样处理含该基因的DNA分子和质粒？_____________________________________________。
（2）为了使③过程顺利进行，常用一定的方法处理农杆菌，使其处于_________________，以利于质粒的导入。为了培养出能稳定遗传的高赖氨酸转基因玉米，应将目的基因插入到农杆菌的_________上，便于使目的基因整合到水稻的___________上，通过组织培养得到转基因植株后，再进行____________即可得到稳定遗传的高赖氨酸转基因玉米。
（3）⑤为__________过程，除了为其提供适宜的温度、pH、必需的营养条件、植物激素、无菌条件外，通常还需_________________。

【推荐1】采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd 转运蛋白（YCF1）（其基因序列内含有1个↓GATC一序列）基因导入受试杨树，并检测了相关指标。回答下列问题：
(1)通过生物信息学分离得到的YCF1基因可通过PCR进行扩增，扩增过程中DNA聚合酶具有_____的特点，某次PCR扩增产物电泳结果显示：实验组和对照组都没有任何条带，从引物角度分析可能的原因有_____。
(2)利用下图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_____酶切割质粒，酶切后的载体和目的基因片段，通过_____酶作用后获得重组质粒。转入了重组质粒的受体菌，在分别含有四环素和氨苄青霉素的培养基中的生长情况分别为_____，从平板上长出的菌落中提取质粒利用Sau3AⅠ进行酶切，最多可以得到_____种大小不同的DNA片段。
   

限制酶	BamHI	XmaI	BclI	SmaI	Sau3AI
识别序列及切割位点	-G↓GATCC-	-C↓CCGGG-	-T↓GATCA-	-CCC↓GGG-	-↓GATC-

(3)进行前期研究时，将含有YCF1基因的_____导入大肠杆菌。研究者进一步获得了转YCF1基因的雄性不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是_____。
(4)进行前期研究时，将含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜，常用的方法是_____。研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是_____。
(5)将长势一致的野生型和转基因杨树苗移裁到Cd污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的_____（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的_____进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。
   
(6)已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是_____有利于植株吸水。

【推荐2】GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。

（1）一个GDNF基因含有___个游离的磷酸基团，理论上而言，与GDNF基因含有相同碱基数的DNA分子共有_____种不同的排序。
（2）限制酶的特点是___________________________，构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的______限制酶进行酶切。
（3）下列有关基因工程的运载体中标记基因的说法正确的是_______。             
A．可检测重组DNA分子是否导入了受体细胞
B．可指示受体细胞是否导入运载体
C．可指示运载体中是否插入了外源DNA片段
D．可检测目的基因在受体细胞中是否成功表达
（4）通常使用限制酶后会产生黏性末端，对下图所示黏性末端的说法正确的是______。

A．甲、乙、丙黏性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的
B．甲、乙具相同的黏性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能
C．DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
D．切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
（5）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第_____泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。