【推荐2】2022年诺贝尔生理学或医学奖授予斯万特·帕博，以表彰他在“关于已灭绝人类基因组和人类进化的发现”方面的贡献，斯万特·帕博及其团队从古骨遗骸中分离DNA并进行DNA测序，从而进一步研究人类进化的进程。DNA测序常用双脱氧链末端终止法，其基本原理如图所示。ddNTP是一种类似于正常dNTP的双脱氧核苷三磷酸，具有终止DNA单链延伸的作用，它能随机渗入合成的DNA链，一旦渗入，合成立即终止，于是得到各种不同大小的片段。请回答下列问题：

(1)双脱氧链末端终止法进行DNA测序的主要原理是____________，图中过程①需要的条件为______，目的是____________。
(2)据图可知该反应体系中除引物、模板DNA、4种dNTP和DNA聚合酶外还需要加入______，以获得不同长度的DNA单链片段。PCR反应过程中，引物的作用是____________。据图中的电泳结果可确定DNA的碱基序列，其原理是____________。
(3)斯万特·帕博团队为研究智人与已知最近、但已灭绝的亲属尼安德特人之间的关系，决定先分析尼安德特人线粒体的DNA而不是核DNA，原因是____________。（答出两点即可）

【推荐3】2020年诺贝尔化学奖授予新型基因编辑技术CRISPR/Cas9的研发者。研究发现，细菌细胞中的一种适应力免疫系统可以侦测到病毒DNA并消灭它。病毒感染细菌后，细菌通过向导RNA把Cas9蛋白引导到外源DNA并与之结合，然后利用Cas9蛋白的DNA内切酶活性将病毒DNA分解，阻断病毒在细菌体内的繁殖。在利用基因工程生产Cas9蛋白的过程中，可以由mRNA反转录形成Cas9的cDNA。回答下列问题：
(1)Cas9的cDNA合成过程需要用到___酶，形成RNA-DNA杂交分子，核酸酶H破坏___键使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解，使之成为单链DNA，在合成另一条链形成双链DNA时___（填“会”或“不会”）形成DNA-蛋白质复合体，原因是___。
(2)获取Cas9的cDNA作为目的基因后需要通过PCR技术扩增，该技术的前提是___，以便合成引物，在___酶的作用下从引物起始进行互补链的合成。
(3)基因工程的核心是___。质粒中插入的目的基因的上下游应分别具有___才能使目的基因表达和发挥作用。

【推荐1】若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请回答下列问题：

I.同源四倍体的紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病；二倍体的百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。如果上图为我国科学家利用紫花苜蓿和百脉根为材料，培育抗鼓胀病的苜蓿新品种进行的实验流程图，请回答以下问题：
(1)本研究主要利用____技术，C细胞再生出细胞壁后需要通过____技术才能发育成杂种植株。
(2)若A、B分别是紫花苜蓿和百脉根的原生质体，则①过程需使用的酶是____。其中过程②称为____，与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为____，过程⑤涉及的细胞分裂方式为____。
Ⅱ.若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的部分步骤，请回答以下问题：
(3)若B细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则A细胞表示____细胞，本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自____。②过程的常用方法与诱导植物原生质体融合相比，特有的诱导方法为____诱导法。
(4)③过程为第一次筛选，只有____细胞才能生长，然后经过④过程中的克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的E 细胞，E细胞的特点是____。

【推荐2】双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组 DNA 或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图 1 是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2 是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。

(1)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是_______________________________。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上，_________________________细胞不能生长。
(2)过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用__________________原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有_____________________________________________________________________________。
(3)图1注射长春碱后，要获取单克隆杂交—杂交瘤细胞，方框内至少需要经过________次筛选。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为___________________________________________________________________（答 2 点）等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______________________________________________________________________。

【推荐3】已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但其能不断分裂增殖。如图是科研人员为制备抗新冠病毒单克隆抗体而设计的流程图。回答下列问题：
   
(1)图中“免疫处理”的具体含义是________ 。过程①符合要求的淋巴细胞具有_____的特点。
(2)过程②的诱导方法有________________（答3种）等。过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入_____等天然成分；除此之外，还必须加入________。
(3)从④中筛选出所需细胞的思路：____________。
(4)制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的诊断，其优点是________。