【推荐1】鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，同时产生一些硫化氢等硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题：
(1)培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是_____。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在_____，这种培养基可以用来专一性培养硫细菌，所以称为_____培养基。
(2)在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是_____。
(3)为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为_____。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是_____。

【推荐2】“玉米塑料”的成分是聚乳酸，它是一种能全部降解的生物环保材料，其生产流程大致如下图。请回答下列问题：

（1）该流程中的玉米浆发酵需要在___________（填“有氧”或“无氧”）环境条件下进行，乳酸菌呼吸的场所为______________________。
（2）含玉米浆的培养基要满足微生物对水、___________、___________和无机盐的需求。
（3）研究人员为了提高生产效率，需要获得纯正的乳酸菌。从土壤中分离提纯乳酸菌所用的培养基从功能上看属于___________培养基。
（4）接种乳酸菌最常用的方法是平板如线法和___________。若用平板划线法，第二次及以后的划线操作应该从___________开始划线。       
（5）为了判断培养基的制作是否合格，需要将接种乳酸菌的甲培养和一个___________的乙培养都放在恒温箱中培养，分别观察并记录结果。若乙培养基中长出了菌落，说明___________。

【推荐3】鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，同时产生一些硫化氢等硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题：
（1）培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是______________。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在_________________________，这种培养基可以用来专一性培养硫细菌，所以称为__________________培养基。
（2）在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是______
（3）科学家欲研究死鲸的遗传属性，在“鲸落”中提取到了死鲸的DNA,然后可以用________技术对其DNA进行扩增，在扩增死鲸DNA的过程中，除了要加入死鲸的DNA作模板外，还需要加入_________________________（至少答两种）等物质。
（4）为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为_______________________。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是___________。

【推荐1】磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca²⁺等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：
   
(1)在步骤①过程中涉及到的无菌操作有_____(答出2点即可)。
(2)步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、(NH₄)₂SO₄、NaC1、MgSO₄-7H₂O、KCl、FeSO₄7H₂O、MnSO₄、Ca3(PO₄)₂、琼脂粉等，此培养基满足了细菌生长对_____的营养要求。加入Ca₃(PO₄)₂的目的是_____。
(3)步骤④所用的接种工具是______。⑤的接种方法在第二次及以后划线后，没有得到菌落的原因是___。
(4)经步骤③最后一次稀释后，该土壤中的微生物被稀释了_____倍。
(5)步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)比值较____的菌落。通常情况下，对④和⑤获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小、颜色等对细菌进行初步的鉴定和分类，原因是______。

【推荐2】蓝纹奶酪是成熟过程中内部生长蓝绿霉菌一类奶酪的总称，又称为青纹奶酪。回答下列问题：
（1）蓝纹奶酪的原材料为牛奶，使用的消毒方法为_____________。
（2）蓝纹奶酪制作所用的初级发酵剂为乳酸菌，初级发酵过程中不需要严格灭菌，原因是_______________________________________________。
（3）蓝纹奶酪制作过程中会向奶酪内接种二级发酵剂类地青霉，接种后需给奶酪穿刺扎孔，原因是___________________________________。类地青霉产生的蛋白酶可将奶酪中的蛋白质分解成______________________________，可增添奶酪的风味。
（4）类地青霉属于_____________ (填“细菌”或“真菌”)，实验室分离培养类地青霉通常使用_______________________ (填“牛肉膏蛋白胨”、“麦芽汁琼脂”或“马铃薯琼脂”)培养基，该培养基一般用_______________方法灭菌。

【推荐3】2013年12月5日，“韩国泡菜”申遗成功，实际上泡菜是由我国传入韩国的，在《诗经》中出现的“菹”指的就是泡菜，但由于之前的不重视使我国又失去了一项重要的非物质文化遗传，以下是有关泡菜制作的一些问题，请分析作答：
(1)工业化生产腐乳时，应对玻璃器皿进行灭菌，灭菌能够杀死物体内外的所有微生物，还包括_____。
(2)制备泡菜的盐水浓度为____________，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是______________________________________。
(3)在泡菜腌制过程中经常向坛口边缘的水槽中补充水分的目的是提供______环境。在发酵初期会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡来源于________________。
(4)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是______________________________。

【推荐1】发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答相关问题：

(1)对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了稀释涂布平板法，其可以用来计数的原理为______。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至______性。
(2)整个发酵过程的中心环节是______。
(3)过程③需要严格的灭菌，原因是______。
(4)研究发现，某些青霉菌属于维生素营养缺陷型菌株，失去合成某种维生素的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的维生素后才能生长。某研究小组筛选出某种维生素营养缺陷型菌株，为了进一步确定该菌株的具体类型，他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组，用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素，然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。结果如下：

组别	维生素组合
1	维生素A	维生素B₁	维生素B₂	维生素B₆	维生素B₁₂
2	维生素C	维生素B₁	维生素D₂	维生素E	烟酰胺
3	叶酸	维生素B₂	维生素D₂	胆碱	泛酸钙
4	对氨基苯甲酸	维生素B₆	维生素E	胆碱	肌醇
5	生物素	维生素B₁₂	烟酰胺	泛酸钙	肌醇

实验结果显示1组和2组滤纸片周围产生生长圈（图2），则该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是______。若该菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在培养基上形成菌落的位置是______。

【推荐2】谷氨酸是生物体内一种重要的有机小分子，谷氨酸钠是它的钠盐，是味精等调味品的主要成分。目前利用微生物发酵生产的氨基酸中，谷氨酸是产量最大的种类之一。请回答下列问题：

(1)我国微生物发酵工程生产谷氨酸常用的菌种有北京棒状杆菌、谷氨酸棒状杆菌和黄色短杆菌等，下列生物中与这些菌种在结构上存在明显区别的有___。

A．噬菌体

B．人类免疫缺陷病毒（HIV）

C．禽流感病毒

D．肺炎链球菌

E．酵母菌

F．硝化细菌

G．乳酸菌

(2)谷氨酸发酵的培养基成分，主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图所示。可以判断谷氨酸棒状杆菌的同化作用类型是___型。
(3)谷氨酸发酵生产过程中，需要添加氨水，它不仅是细菌生长所需的___，而且起到调节培养液___的作用，所以应该分次加入。
(4)某厂的发酵液曾不慎被噬菌体污染，菌群死亡殆尽，但人们却侥幸从中获得了少数可抵抗噬菌体的新菌种，这种新性状细菌的产生来自___。
(5)如图所示连续培养的方法，以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，此工艺流程可以大大提高生产效率，试阐述其原因是___。

【推荐3】中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。

回答下列问题：
(1)发酵工程一般包括菌种的选育、__________、培养基的配制、灭菌、接种、__________、产品的分离、提纯等方面，其中的中心环节是__________。
(2)为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的________，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为______________。培养过程中定期取样并用___________法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。
(3)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌，分析原因一是培养基的盐浓度设为60g/L，其他杂菌因___________而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌__________，生长繁殖受抑制。
(4)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_____________可能是高密度培养的限制因素。
(5)若发酵产品是单细胞蛋白，则往往采用__________、__________等方法将其分离和干燥，即可获得产品。

【推荐2】赖氨酸是人类和哺乳动物的必需氨基酸之一，机体不能自身合成，必须从食物中补充，在谷类食物如高粱中赖氨酸含量很低。
(1)全世界每年对赖氨酸有巨大的需求，主要通过谷氨酸棒状杆菌等微生物生产。这种通过微生物生产赖氨酸的技术属于_______工程。
(2)除了优化菌种外，控制适应的条件也能有效提高赖氨酸产量，需要控制的条件的是搅拌速度、________________________和营养物浓度。
(3)在发酵过程中，要随时检测培养液中的谷氨酸棒状杆菌数量。可采用_______法，以期获得多个单平板内的菌落数为____个，计算出的微生物数量相对准确。
(4)天冬氨酸激酶（AK）和二氢吡啶羧酸合酶（DHPS）是赖氨酸合成途径中两种重要的酶，并协同控制植物中游离赖氨酸的合成速率。图1为野生高粱细胞内赖氨酸合成与分解的部分过程，其中LKP和SDH是赖氨酸分解代谢的关键酶。

   

①据图1分析可知，野生高粱中赖氨酸含量较低的原因是_________（答出3点）。
②请结合图1和题干等相关知识，从基因工程或者从蛋白质工程方面考虑，再提出两种提高高粱赖氨酸含量的思路：________。

【推荐3】透明质酸是一种应用广泛的粘性多糖，研究者欲改造枯草芽孢杆菌，通过添加诱导型启动子来协调菌体生长与产物生产之间的关系。回答下列问题：
(1)为通过外源添加诱导剂来控制基因的表达，研究者选择了含木糖诱导型启动子的p质粒。透明质酸合成酶基因H以a链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5′-3′。为了使图中酶切后的H基因按照正确的方向与p质粒连接，p质粒位点1和2所对应的酶分别是___________。酶切后加入___________酶使它们形成重组质粒。

(2)为协调菌体生长与产物生产之间的关系，将构建好的重组质粒转入经___________处理后的枯草芽孢杆菌（D菌），在含___________的培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌E（E菌）。进行工业培养时，培养基应选择___________（填字母）。
A.以木糖为唯一碳源的培养基
B.以蔗糖和木糖混合为碳源的培养基
C.以蔗糖为唯一碳源的培养基，接种2小时后添加木糖
D.以蔗糖为唯一碳源的培养基，培养结束后提取培养液，添加木糖
(3)经菌种的扩大培养后进行大型发酵得到的发酵产物浓度较低，发酵液中悬浮固形物主要是菌体和蛋白质的胶状物，故最后对发酵产物进行___________，可获得所需产品。