【推荐1】为积极应对全球气候变化，我国政府在2020年的联合国大会上宣布，中国于2030年前确保碳达峰（CO₂排放量达到峰值），力争在2060年前实现碳中和（CO₂排放量与减少量相等），这是中国向全世界的郑重承诺，彰显了大国责任。回答下列问题：
（1）在自然生态系统中，植物等从大气中摄取碳的速率与生物的呼吸作用和分解作用释放碳的速率大致相等，可以自我维持___________。自西方工业革命以来，大气中CO₂的浓度持续增加，引起全球气候变暖，导致的生态后果主要是___________。
（2）生态系统中的生产者、消费者和分解者获取碳元素的方式分别是___________，消费者通过食物网（链）取食利用，___________。
（3）全球变暖是当今国际社会共同面临的重大问题，从全球碳循环的主要途径来看，减少___________和增加___________是实现碳达峰和碳中和的重要举措。

【推荐2】鱼塘养殖户通过高密度放养和大量投放饵料饲养鱼苗来获得最大经济效益，但易造成水体富营养化，严重破坏鱼塘生态环境。为寻找净化鱼塘水质的生态方法，科研人员将鱼塘水泵入藕塘进行研究。
（1）鱼塘生态系统中所有的草鱼属于一个__________。莲藕在藕塘生态系统组成中属于__________。
（2）鱼塘富营养化的水体中氮、磷等化合物的含量升高，还可能出现有害硫化物。这些硫化物最可能是来自饵料中_____________的分解。
（3）科研人员从上午 9：00 开始将富营养化的鱼塘水从进水口泵入藕塘，从出水口引回，进行循环处理6h（如图所示）。6h 循环水量为鱼塘总水量的 10%，每隔 2h 从进水口和出水口分别采集水样，测定相关指标，结果如下表。

时间 位置 指标(mg/L)	11：00		13：00		15：00
	进水口	出水口	进水口	出水口	进水口	出水口
总磷含量	0．39	0．36	0．35	0．31	0．39	0．34
总氮含量	2．19	2．06	2．21	2．02	2．16	1．91
化学耗氧量(COD)	10．08	8．42	10．08	8．56	9．35	7．92

                                        
①化学耗氧量（COD）是指水体中的有机物等在一定条件下进行化学氧化过程中所消耗氧化剂的量，在一定程度上能够反映水体的污染程度。COD 值越高，污染程度_________。
②据表推测，循环藕塘处理可以改善富营养化的鱼塘水质，判断依据是__________________________。
③结合所学知识，分析藕塘能够改善鱼塘水质的原理是_________________________。（答出 2 条即可）

【推荐1】人缺乏凝血因子Ⅷ会引发凝血机能障碍，某研究小组利用羊乳腺生产重组人凝血因子Ⅷ，请分析回答：
（1）利用血细胞为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库。两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是基因组文库中含有该生物的全部基因，而cDNA文库中只含____________。获得的cDNA与细胞中对应的基因结构比较，缺少__________________（至少答出2点）部分。
（2）利用PCR技术可从人基因组中定点克隆出人凝血因子Ⅷ基因，实现定点克隆最关键之处是要设计____________。将PCR扩增得到的人凝血因子Ⅷ基因导入受体细胞时，科学家选用改造后的腺病毒作为运载体，你认为科学家选腺病毒作为运载体的理由主要是：______________________________（答出2点）。
（3）为证明获得的重组人凝血因子Ⅷ有医用价值，须确认重组人凝血因子Ⅷ与____________的生物学功能一致。研究发现，通过对人凝血因子Ⅷ的末端连接特定的短酞片段，能有效延长人凝血因子Ⅷ的半衰期，现欲通过基因工程生产改良后的人凝血因子Ⅷ，请写出这种技术的基本流程：________________________。

【推荐2】科研人员通过转基因技术培育出超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，含P基因的DNA片段以及Ti质粒的酶切位点如下图所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。请回答下列问题。

限制酶	识别序列
ClaⅠ	5′AT↓CGAT3′
BamHⅠ	5′G↓GATCC3′
HindⅢ	5′A↓AGCTT3′
EcoRⅠ	5′G↓AATTC3′
KpnⅠ	5′GGTAC↓C3′
SacⅠ	5′GAGCT↓C3′

(1)以RNA为模板，通过RT-PCR技术可获取P基因。进行RT–PCR时一般要加入4种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，其原因是_______________，同时需加入的酶有_______________。为了特异性扩增P基因序列，需根据_______________设计特异性引物。
(2)在构建基因表达载体时，应优先选用的限制酶是_______________和_______________，这样操作不仅使P基因在玉米植株中超量表达，还可利用T-DNA的_______________特性，最终使P基因_______________。
(3)将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养时，培养基中需加入_______________，筛选出的愈伤组织经再分化过程形成丛芽，最终获得转基因玉米植株。
(4)对转基因再生玉米植株进行鉴定时发现，有些植株虽有P基因，但几乎没有P蛋白，造成该现象的原因可能有_______________。

【推荐3】如图为人体内的造血干细胞增殖分化形成过程，其中microRNA （miRNA）是一类崭新的调控性非编码小分子RNA。

（1）图中造血干细胞属于_____干细胞，它最初来源于_____。
（2）图中所示的miRNA（X）和miRNA（1﹣4）的作用分别是_____和_____。
（3）据研究造血干细胞的增殖和分化除受到图中显示的因子调控以外，还受到其他基因的调控．其中某调控基因从未成熟的造血干细胞中获取并在体外扩增出来，该技术称为_____（中文）。
（4）如图所示，人体内的造血干细胞可不断分裂分化成红细胞、血小板、碱性粒细胞、单核粒细胞等，下列有关叙述不正确的是_____。
A．粒细胞已完全失去继续分化的能力
B．血小板、粒细胞的基因选择性表达产物完全不同
C．细胞分化导致细胞内的遗传物质发生变化
D．分化的细胞不再进行细胞的分裂和生长
（5）正常人体内的造血干细胞能分化产生各种血细胞．在体外某些因素的诱导下，却可以分化为神经细胞和肝细胞．其根本原因是这些造血干细胞_____。
A．旺盛的分裂能力             B．能合成神经细胞或肝细胞需要的蛋白质
C．已经进行了分化             D．具有与受精卵相同的全套遗传基因
（6）从上述造血干细胞增殖分化过程可见，细胞核的功能可概括为_____。

【推荐2】将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

表几种限制酶识别列及切割位点数

限制酶	Abul	Ecor I	PstⅠ	SmaⅠ
切割位点

请根据以上图表回答下列问题：
（1）根据表，图步骤③所用的DNA连接酶对所连接的平末端两端的碱基序列是否有专一性要求？_________（填“有”或者“没有”）。限制酶断开的化学键名称是________________________
（2）图步骤⑤中用_________处理农杆菌，使其成为___________细胞。农杆菌转化法的原理是：在农杆菌的Ti质粒上存在________________片段，它具有可以整合到受体细胞____________________的特点，使目的基因进入植物细胞并稳定维持和表达。
（3）画出用PstI酶切得到的两个黏性末端___________________________
（4）对符合设计要求的重组质粒 T 进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开， 请根据图中标示的酶切位点和表所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用 EcoRⅠ和 PstⅠ酶切，得到_______种 DNA 片段。
②采用 EcoRⅠ和 SmaⅠ酶切，得到_______种 DNA 片段。

【推荐3】新冠病毒，即2019—nCoV病毒，是一种RNA病毒，其结构模式图如下。其中S蛋白是2019—nCoV病毒表面主要抗原，利用S蛋白可以制作相应的抗体，据此回答下列问题：

（1）采用基因工程的方法，可以获取大量S蛋白。获取方法是提取2019—nCoV病毒的 RNA，通过______过程获取相应的eDNA。
（2）通过基因工程技术获取S蛋白，最关键的一步是______。
（3）将S蛋白注入小鼠等动物体内，通过单克隆技术，即可获得抗S蛋白的单克隆抗体。 与新冠肺炎康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗S蛋白的单克隆抗体的优点是______
（4）在对新冠疑似患者的检测中，利用核酸检测方法，有时会出现假阴性现象，在分子水平上还可以利用______方法进行检测。
（5）在修复新冠肺炎重症患者的肺损伤方面，干细胞被寄予厚望。因此干细胞治疗成为一种可能，人的ES细胞在培养液中加入______，就可诱导分化成不同类型的细胞，达到治疗目的。

【推荐1】人体白细胞中的干扰素基因能特异性表达产生干扰素，干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病，对治疗乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等也有一定的疗效。干扰素基因两端的碱基序列如下图所示，表中为常见的几种限制酶及碱基识别序列。请回答下列问题：

限制酶	识别序列
Apal	5'GGGCC'C3'
BamHl	5'G`GATCC 3'
Hindlll	5'A`AGCTT3'
Sacl	5'GAGCT'C3'
EcoRl	5'G'AATTC3'
xhol	5'C'TCGAG3'

(1)干扰素除了对乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等有一定的疗效，还可用于治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎，其理论依据是____。
(2)传统生产干扰素往往是从人体的____细胞内提取，但产量很低。1993 年，我国批准并以侯云德院士为首的研究人员，成功研制出我国第一个基因工程药物——重组人干扰素 α-1b，该基因工程操作中，需要用相同的限制酶切割干扰素基因和质粒，表中合适的限制酶是____，选择的理由是____。
(3)干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸（密码子：UGU、UGC）变成丝氨酸（密码子: UCU、UCC、UCA、UCG），可在-70℃的条件下保存半年。请依据蛋白质工程的基本原理，设计最为简单的方案，获取能在体外保持的干扰素，写出简要的设计思路____。

【推荐2】为制备抗病毒A的单克隆抗体，某研究小组进行了如图甲所示实验，并基于获得的杂交瘤细胞，研制出能同时与α、β两种抗原结合的双特异性单克隆抗体（如图乙所示）。回答下列问题：

(1)制备单细胞悬液前，宜用病毒A作_________处理小鼠甲。所获得的B淋巴细胞能产生抗病毒A的抗体，与基因的_________有关。
(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞需经诱导才能发生融合，常用的诱导融合的方法有_________（答2点）等。若只考虑细胞的两两融合，融合细胞有_________种类型，故需要进行筛选1以获得杂交瘤细胞，还需要进行筛选2，原因是_________。获得的能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，既可以在培养基中培养，也可以在_________内培养。
(3)双特异性单克隆抗体的两个可变区能结合不同的抗原，这_________（填“能”或“不能”）说明其没有特异性。若抗原α是某类癌细胞高表达的膜蛋白，而抗原β是T细胞表面受体CD28（已知T细胞的激活依赖于受体CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集），则该双特异性单克隆抗体可用于治疗该类癌症，理由是_________。通过_________工程技术，可以对双特异性单克隆抗体的可变区进行设计改造，使其更符合人类的需求。

【推荐3】胰岛素是治疗糖尿病的特效药，但天然胰岛素在人体内的寿命只有几个小时。重症患者每天需要注射多次药物，增加了痛苦。通过蛋白质工程改变蛋白质的空间结构，以延长蛋白质的半衰期，可得到长效胰岛素，还可以增强其稳定性。下图是通过蛋白质工程获得长效胰岛素的过程。请分析回答：

(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新蛋白质模型的主要依据是_______。
(2)通过人工合成DNA形成的新基因应与_______结合后，转移到______中，才能准确表达。
(3)若要利用大肠杆菌生产上述长效胰岛素，需要用到的生物工程有________和发酵工程。
(4)图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是______。