组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 目的基因的获取 > PCR扩增的原理与过程
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:262 题号:18062261
将外源多酚氧化酶基因 (POT33) 的同源片段与载体结合,构建反义表达载体,通过基因工程 技术导入马铃薯,产生的反义 RNA 可有效降低马铃薯内源多酚氧化酶基因的表达水平(原理见图 1),从而改善薯块的损伤褐化现象,提高马铃薯的食用和加工品质。图 2 为马铃薯内源多酚氧化酶基因的反义表达载体的结构示意图。回答下列相关问题:

(1)图 1 中的靶 mRNA 与反义 RNA 结合能在__________水平上抑制马铃薯内源多酚氧化酶基因的表达。图 2 中的启动子为特异性启动子,是__________识别和结合的部位,可驱动基因的转录,则该启动子应在马铃薯的________(器官)中启动基因的转录。
(2)获取马铃薯POT33基因的同源片段:根据马铃薯POT33基因的__________ 设计一对特异性引物,在引物的5'端加入限制性内切核酸酶的________________ 以满足 目 的基因连接到载体的需要,再通过PCR获取马铃薯POT33基因的同源片段。
(3)有人认为酸性溶液可能会抑制多酚氧化酶的活性,某同学设计了如下实验方案进行探究,请完善实验方案。
①实验材料:新鲜马铃薯若干、pH 为 1.7 的缓冲液、清水、恒温设备等。
②实验步骤:
将同种的新鲜马铃薯随机均分为两组,其中A 组加__________,B 组加等量清水,两组都在 __________ (填“常温”或“低温”) 条件下保存;
③实验结果和结论:
a.___________________
b.____________________

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名校
【推荐1】蛛丝是由蜘蛛的蛛腺细胞特异性表达的一种具有超强收缩性能的天然蛋白纤维,可制成人造韧带和人造肌腱、防弹背心等。但是由于蜘蛛天性相互残杀导致笼养困难,人工条件下无法通过大规模、高密度养殖蜘蛛来获得大量天然蛛丝,科学家尝试了三种生产蛛丝蛋白的方法,具体如下:

请回答下列问题:
(1)方法1和方法2都采用了基因工程技术。若蛛丝蛋白基因部分序列已知,步骤①可以用_____方法获得并扩增该基因,该方法从DNA上获得该基因的起点和终点是由_____决定的。步骤②中需要使用的基因工程的工具酶是_____
(2)方法1中,为使重组蛛丝蛋白基因通过③导入受体细胞,通常用_____处理大肠杆菌,使细胞膜通透性改变,成为_____细胞。为了缩短菌种在⑤过程的发酵时间,需将获得的工程菌种进行_____,并控制好发酵条件。
(3)方法2中,将重组蛛丝蛋白基因通过⑥导入受体细胞最常用的方法是_____,步骤⑦中需要运用到的技术有_____。该方法是利用转基因羊的乳腺作为生物反应器,为了使目的基因只在乳腺表达,可以在重组蛛丝蛋白基因前添加_____,利用该反应器从乳汁中获得蛛丝蛋白有哪些优点?_____(至少答2点)。
(4)方法3是尝试用_____方法获得蛛腺细胞株,科研人员尝试用昆虫培养基添加生长因子作为基础培养基,再加 _____以提供必要的营养和生长调节物质,培养蛛腺细胞,以期从培养液中获得蛛丝蛋白,但是最终未能获得细胞株,失败的原因是_____
(5)若想继续提高蛛丝品质,则可通过_____对上述基因进行改造并最终获得所需的高品质蛛丝。
2024-04-21更新 | 241次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
真题 名校
【推荐2】二十大报告提出“种业振兴行动”。油菜是重要的油料作物,筛选具有优良性状的育种材料并探究相应遗传机制,对创制高产优质新品种意义重大。
(1)我国科学家用诱变剂处理野生型油菜(绿叶),获得了新生叶黄化突变体(黄化叶)。突变体与野生型杂交,结果如图甲,其中隐性性状是___________

   

(2)科学家克隆出导致新生叶黄化的基因,与野生型相比,它在DNA序列上有一个碱基对改变,导致突变基因上出现了一个限制酶B的酶切位点(如图乙)。据此,检测F2基因型的实验步骤为:提取基因组DNA→PCR→回收扩增产物→___________→电泳。F2中杂合子电泳条带数目应为___________条。

   

(3)油菜雄性不育品系A作为母本与可育品系R杂交,获得杂交油菜种子S(杂合子),使杂交油菜的大规模种植成为可能。品系A1育性正常,其他性状与A相同,A与A1杂交,子一代仍为品系A,由此可大量繁殖A。在大量繁殖A的过程中,会因其他品系花粉的污染而导致A不纯,进而影响种子S的纯度,导致油菜籽减产。油菜新生叶黄化表型易辨识,且对产量没有显著影响。科学家设想利用新生叶黄化性状来提高种子S的纯度。育种过程中首先通过一系列操作,获得了新生叶黄化的A1,利用黄化A1生产种子S的育种流程见图丙。

   

①图丙中,A植株的绿叶雄性不育子代与黄化A1杂交,筛选出的黄化A植株占子一代总数的比例约为_______________
②为减少因花粉污染导致的种子S纯度下降,简单易行的田间操作用____________________________
2023-06-28更新 | 6355次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富,因此,微卫星DNA可以作为分子标记,并有着广泛应用。

(1)为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记,可以用生物素标记的特定简单重复序列作为探针,与该生物的___________文库进行杂交,然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。
(2)扩增分离到的微卫星DNA序列的PCR反应体系中含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物及热稳定DNA聚合酶等。其中dNTP的作用是__________________;该技术的前提是_________________,以便根据这一序列合成引物,所以引物应选用图中________(填图中标号)。
(3)PCR的基本反应步骤为_____________________________,其产物量以___________形式扩增。
(4)根据“微卫星DNA”的特点判断,这种分子标记可应用于__________(填字母)。
A. 人类亲子鉴定     B. 种群遗传多样性研究     C. 诱导基因突变     D. 冠状病毒遗传物质测序
2020-05-16更新 | 209次组卷
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