无氮培养基是一种缺乏结合态无机或有机氮源的培养基,可使自生固氮菌在保证有有机碳源和无机营养供应的情况下正常生存繁殖,从而达到富集分离的效果。配制该培养基所用的材料包括:水、甘露醇、KH2PO4、NaCl、CaSO4·2H2O、CaCO3,蒸馏水、琼脂粉。现用该培养基对固氮微生物进行分离提纯并计数,回答下列问题:
(1)固氮微生物可利用空气中的_____________ 合成自身需要的含氮有机物,从功能上看,该无氮培养基是一种___________ 培养基,从物理性质上看,该培养基为____________ 培养基,培养基中的碳源为____________ 。
(2)上述培养过程用______________ 法进行菌种纯化,以分离菌种并计数。用平板培养细菌时一般需要将平板倒置,其目的是___________ (答出2点)。
(3)培养一段时间后可根据____________ (答出2项)等菌落特征判断是否得到了固氮菌,原因是___________ 。
(1)固氮微生物可利用空气中的
(2)上述培养过程用
(3)培养一段时间后可根据
更新时间:2023-03-29 20:44:38
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【推荐1】细菌培养是微生物培养的基础技术,回答下列与细菌培养与分离相关的问题:
(1)在细菌培养时,培养基能同时提供碳源、氮源的成分是_______ (“蛋 白胨”“葡萄糖”“牛肉膏”)。通常制备培养基是要根据所培养细菌的不同来调节培养基的 pH,其原因是___________ 。
(2)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________________________ 然后,将1mL水样稀释100 倍,在3个平板上用涂布法分别接入 0.1mL 稀释液;经适当培养后,3 个平 板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为_____ 个。
(3)用平板培养细菌时一般需要将平板_____ (“倒置”“正置”)。
(4)在液体培养基培养细菌时发现,振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快,分析原因是_____________________________ 。
(1)在细菌培养时,培养基能同时提供碳源、氮源的成分是
(2)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是
(3)用平板培养细菌时一般需要将平板
(4)在液体培养基培养细菌时发现,振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快,分析原因是
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【推荐2】研究人员采用下图所示流程获得高耐酒精的高产醋酸菌。回答下列问题:
(1)从培养基成分可知:醋酸菌属于_____ (填“自养”或“异养")微生物,理由是_____ 。培养基中KH2PO4的作用是_____ (答出两点即可)。培养基使用前要进行灭菌,灭菌的方法是_____ 。
(2)扩大培养时,进行振荡培养的目的是_____ (答出一点即可)。
(3)纯化培养所用培养基由于加入碳酸钙而不透明。接种扩大培养后的菌种之后,培养结果如图,其中产醋酸能力最强的菌落是_____ (填“A”或“B”或“C”),理由是_____ 。
(4)科研人员利用固定化细胞生产食醋。固定化细胞常采用_____ 法,原因是_____ 。
(1)从培养基成分可知:醋酸菌属于
(2)扩大培养时,进行振荡培养的目的是
(3)纯化培养所用培养基由于加入碳酸钙而不透明。接种扩大培养后的菌种之后,培养结果如图,其中产醋酸能力最强的菌落是
(4)科研人员利用固定化细胞生产食醋。固定化细胞常采用
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【推荐3】2-苯乙醇是一种具有玫瑰花香的芳香醇,大量应用于日用化学和食品工业中。酵母菌生物合成是生产天然2-苯乙醇的有效途径之一,但高浓度2-苯乙醇(≥3g/L)对酵母菌生长的抑制作用严重限制了2-苯乙醇的产量。研究小组通过对酿酒酵母菌株CWY132进行紫外诱变处理,获得2-苯乙醇耐受性和产量都明显提高的突变菌株CWY132-10,过程如图1。请回答问题。
(1)实验中所用的液体培养基和固体培养基都需要_________ ℃、__________ kPa下灭菌20min,这两类培养基在组成成分上的差异主要表现在___________ (不考虑2-苯乙醇);发酵培养基的主要成分如下:葡萄糖20g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾5g/L、苯丙氨酸5g/L,苯丙氨酸为酵母菌株的生长提供__________ 。
(2)与其他野生型酵母菌株相比,作为诱变出发菌株的CWY132应具有对2-苯乙醇耐受性相对__________ (填“较高”或“较低”)的特点,理由是_________________________________________________ 。
(3)摇床振荡培养的目的是______________________________________________________________ 。
(4)为研究苯丙氨酸浓度对合成2-苯乙醇的影响,研究小组继续进行相关实验,结果如图2:
根据实验结果推测,利用筛选出的酵母菌生产2-苯乙醇时,应将苯丙氨酸浓度控制在__________ g/L,理由是____________________________________________ 。
(1)实验中所用的液体培养基和固体培养基都需要
(2)与其他野生型酵母菌株相比,作为诱变出发菌株的CWY132应具有对2-苯乙醇耐受性相对
(3)摇床振荡培养的目的是
(4)为研究苯丙氨酸浓度对合成2-苯乙醇的影响,研究小组继续进行相关实验,结果如图2:
根据实验结果推测,利用筛选出的酵母菌生产2-苯乙醇时,应将苯丙氨酸浓度控制在
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【推荐1】莠去津又名阿特拉津,是一种含氮的有机化合物,它是世界上使用最广泛的除草剂之一,由于其在环境中残留期长(4~57周),是近年备受关注的疑似持久性有机污染物,为修复被其污染的土壤,按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答问题:
(1)由图推断,本实验将菌种接种到固体培养基的方法是____________ 法,从A瓶到C瓶液体培养的目的是_____________ 。
(2)一段时间后,培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落,在固体培养基中,无透明带菌落利用的氮源主要是氮气,有透明带菌落利用的氮源主要是______________ ,据此可筛选出目的菌。
(3)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,要如何设置对照组?____________ 。
(4)某同学计划统计C瓶中“目的菌”的总数,他选用10-4稀释液进行涂布分离,且设置了3个培养皿的实验组。该同学得到的3个平板的菌落数分别是21、212和256,并以这3个平板上菌落的平均数作为统计结果,你认为合理吗?_____________ 。如何解释3个平板上的数据差异____________ 。
(1)由图推断,本实验将菌种接种到固体培养基的方法是
(2)一段时间后,培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落,在固体培养基中,无透明带菌落利用的氮源主要是氮气,有透明带菌落利用的氮源主要是
(3)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基,要如何设置对照组?
(4)某同学计划统计C瓶中“目的菌”的总数,他选用10-4稀释液进行涂布分离,且设置了3个培养皿的实验组。该同学得到的3个平板的菌落数分别是21、212和256,并以这3个平板上菌落的平均数作为统计结果,你认为合理吗?_
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【推荐2】回答下列与微生物的培养与利用有关的问题:
(1)下图是利用________ 法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得________ 菌落。接种后培养基应________ 放在37 ℃恒温培养箱中进行培养。
(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________ ,并加入________ 和________ 物质。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________ 将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色。
(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,________ 同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是________ 。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量________ 。
(1)下图是利用
(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的
(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,
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【推荐3】1 月 14 日,国家卫健委举行新闻发布会,根据观测数据显示,新冠病毒感染可能在本月出现回升,提醒群众继续保持良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,坚持戴口罩。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂),请回答下列问题。
(1)熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有 C、H 两种元素),为制备用于筛选的固体培养基,除需加入水、氮源、无机盐和琼脂等,还应加入经过处理的聚丙烯粉末作为________ 。为检验已灭菌的培养基是否合格,常用的检测方法为________________ 。
(2)目的细菌大多分布在距地表约 5cm~10cm 的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般______________ 。在培养基中加入能与 PP 结合而显色的染色剂,目的菌的作用可使目的菌落周围出现透明圈,应当选择______________ 的菌落作为目的菌群,接种于液体培养基中再进行扩大培养。
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,接种时,应采用的方法是________ 。最终的测量值与实际值相比一般会偏小,原因是____________________ 。
(4)已知目的菌分解 PP 需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解 PP 时,通常采用_________ 法来固定目的菌。影响目的菌降解熔喷布效果的因素有温度、pH 以及______________ 等(答出两点即可)。
(1)熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有 C、H 两种元素),为制备用于筛选的固体培养基,除需加入水、氮源、无机盐和琼脂等,还应加入经过处理的聚丙烯粉末作为
(2)目的细菌大多分布在距地表约 5cm~10cm 的潮湿土壤层, 因此土壤取样时,一般
(3)若要测定土壤中能降解一次性口罩(熔喷布)的细菌细胞数,接种时,应采用的方法是
(4)已知目的菌分解 PP 需要多种酶的共同参与,目的菌比酶分子大得多,工厂化降解 PP 时,通常采用
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【推荐1】牛奶是微生物培养的良好培养基,牛奶在饮用前都要经过消毒,以杀死有害微生物,牛奶也可以加工制成酸奶,请回答下列问题:
(1)牛奶常用的消毒的方法是_______ ,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是_______ 。
(2)利用_______ 可以对生鲜牛奶中细菌进行计数,运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小的原因是:_______ 。
(3)生鲜牛奶加工成酸奶的过程中利用的是乳酸菌,常见的乳酸菌有_______ ,其代谢类型是_______ 。
(4)在进行乳酸菌分离纯化时,科研人员将酸奶稀释后涂布在含溴甲酚绿(遇酸变色)的_______ (“选择”或“鉴别”)培养基上,厌氧培养一段时间后,选择周围变色的菌落临时保存。获得的乳酸菌如需要长期保存时,菌液中常需要加入一定量的_______ 置于-20℃条件下保存。
(1)牛奶常用的消毒的方法是
(2)利用
(3)生鲜牛奶加工成酸奶的过程中利用的是乳酸菌,常见的乳酸菌有
(4)在进行乳酸菌分离纯化时,科研人员将酸奶稀释后涂布在含溴甲酚绿(遇酸变色)的
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【推荐2】酸奶由牛奶经过发酵制成,口味酸甜细滑,营养丰富,深受人们喜爱,同学甲和乙在学习了传统发酵技术的应用后,在家进行了酸奶制作的实践,具体操作如下:
一、同学甲买了酸奶机(相当于恒温培养箱,能够将其内容物加热至42℃并保持恒温),按如下步骤自制酸奶:
第一步:将约1L鲜奶倒进锅里加热至沸腾,将酸奶机的内胆放在开水中煮5min。
第二步:将沸腾后的鲜奶倒入酸奶机的内胆里,然后立即加入约100mL酸奶。
第三步:盖上酸奶机盖子,让内部处于密封状态,打开电源开关。
第四步:8h后打开酸奶机盖子。
二、同学乙的具体操作步骤如下:
第一步:将瓶身、瓶盖、勺子放在锅中加热煮沸10min。
第二步:待瓶子稍冷却后向其中倒入鲜奶并加入一定量的蔗糖,再放入锅中沸水浴约10 min。
第三步:待牛奶冷却至不烫手时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”,用勺子搅拌均匀,拧紧瓶盖。
第四步:将温度调至40℃,继续保温7~8h。
回答下列问题:
(1)从微生物培养角度看,鲜奶相当于培养基,同学甲和乙在鲜奶中加入酸奶相当于_____ 。同学甲和乙在制作酸奶时对鲜奶均采用的消毒方法是_____ ,而工业生产中制作酸奶时对鲜奶常采用巴氏消毒法,该方法的优点是
_____ 。
(2)同学乙成功制得酸奶而同学甲没有,原因是_____ 。
(3)同学乙在制作酸奶时,还会在鲜奶中加一定量的蔗糖,其目的是_____ ,该同学在第三步中拧紧瓶盖的原因是
_____ 。
(4)同学乙想检测自己制得的酸奶中乳酸菌1 mL的数量,将其带进实验室进行了如图所示的实验:同学乙在过程③所用的方法为_____ ,用该方法统计样本菌落数时,需要同时做A、B、C三个培养皿,目的是_____ 。实验检测时,各取0.1mL已稀释10倍酸奶分别接种到图示A、B、C培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每毫升酸奶样品中的乳酸菌数为_____ 个。
一、同学甲买了酸奶机(相当于恒温培养箱,能够将其内容物加热至42℃并保持恒温),按如下步骤自制酸奶:
第一步:将约1L鲜奶倒进锅里加热至沸腾,将酸奶机的内胆放在开水中煮5min。
第二步:将沸腾后的鲜奶倒入酸奶机的内胆里,然后立即加入约100mL酸奶。
第三步:盖上酸奶机盖子,让内部处于密封状态,打开电源开关。
第四步:8h后打开酸奶机盖子。
二、同学乙的具体操作步骤如下:
第一步:将瓶身、瓶盖、勺子放在锅中加热煮沸10min。
第二步:待瓶子稍冷却后向其中倒入鲜奶并加入一定量的蔗糖,再放入锅中沸水浴约10 min。
第三步:待牛奶冷却至不烫手时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”,用勺子搅拌均匀,拧紧瓶盖。
第四步:将温度调至40℃,继续保温7~8h。
回答下列问题:
(1)从微生物培养角度看,鲜奶相当于培养基,同学甲和乙在鲜奶中加入酸奶相当于
(2)同学乙成功制得酸奶而同学甲没有,原因是
(3)同学乙在制作酸奶时,还会在鲜奶中加一定量的蔗糖,其目的是
(4)同学乙想检测自己制得的酸奶中乳酸菌1 mL的数量,将其带进实验室进行了如图所示的实验:同学乙在过程③所用的方法为
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【推荐3】牛肝菌中含有丰富的维生素、蛋白质、脂肪、碳水化合物和矿物质,是一种营养丰厚的食材。引导农户种植牛肝菌可增加收入,助力脱贫。下表是某公司研发的一种培养牛肝菌菌种的培养基配方。回答下列相关问题。
(1)从生态系统的组成成分上看,牛肝菌属于______________ 。
(2)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,采用___________________ 法对培养基进行灭菌;若根据用途划分,该培养基属于___________ (填“选择”或“鉴别”)培养基;若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必须怎样更改?_____________________ 。
(3)图1和图2是纯化培养牛肝菌菌种的结果图,其对应的接种方法是________ 和__________ 。
(4)分离菌种时通常用固体培养基,原因是________________________________________ 。
成分 | 蛋白胨 | 葡萄糖 | MgSO4 | K2HPO4 | 琼脂 | 指示剂 | 水 |
含量(g) | 2.0 | 20.0 | 0.5 | 1.0 | 20.0 | 0.2 | 1000.0 |
(1)从生态系统的组成成分上看,牛肝菌属于
(2)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,采用
(3)图1和图2是纯化培养牛肝菌菌种的结果图,其对应的接种方法是
(4)分离菌种时通常用固体培养基,原因是
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【推荐1】吃腐烂的水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或者更严重的症状,这可能与微生物代谢产生的毒素有关。某研究小组为了寻找腐烂的苹果中可安全食用的区域,开展以下探究实验。选取苹果的腐烂部位、距离腐烂部位1cm和2cm的组织做实验材料,检测不同区域中微生物的种类和数量。已知苹果的pH为3.5~4,操作流程如下图。回答下列问题:(1)根据题意,本实验选用的接种方法是_____ 。
(2)制备步骤③中的培养基,配方中应含有水、氮源、无机盐、_____ ,接种后的平板应放在恒温培养箱中_____ 培养。
(3)每隔24h统计一次菌落数目,待菌落数目稳定时统计的菌落数往往比活菌的实际数目少的原因是_____ 。
(4)统计腐烂部位的菌落数目发现,青霉菌、曲霉菌等真菌的数量较多,细菌数目很少。细菌数目很少可能的原因_____ (答出1点即可)。
(5)分析数据发现,距离腐烂部位越远,微生物的数量越少;距离腐烂部位2cm的样品中微生物数量极少。有人认为,不能仅凭这个实验就得出距离腐烂部位2cm的部分可安全食用的结论,还需要进一步补充检测_____ 。
(2)制备步骤③中的培养基,配方中应含有水、氮源、无机盐、
(3)每隔24h统计一次菌落数目,待菌落数目稳定时统计的菌落数往往比活菌的实际数目少的原因是
(4)统计腐烂部位的菌落数目发现,青霉菌、曲霉菌等真菌的数量较多,细菌数目很少。细菌数目很少可能的原因
(5)分析数据发现,距离腐烂部位越远,微生物的数量越少;距离腐烂部位2cm的样品中微生物数量极少。有人认为,不能仅凭这个实验就得出距离腐烂部位2cm的部分可安全食用的结论,还需要进一步补充检测
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【推荐2】产脂肪酶酵母菌可用于含油废水的处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株,科研人员开展了相关研究。回答下列问题:
(1)下列常规微生物实验中用到的物品及其灭菌方法正确的是______ (填编号)。
(2)称取1.0g某土壤样品,转入99mL无菌水中,制备成菌悬液,经______ 后,获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上,其中10倍稀释的菌悬液经培养后平均长出了128个酵母菌菌落,则该样本中每克土壤约含酵母菌______ 个。
(3)为了进一步提高酵母菌的产酶能力,可对分离所得的菌株采用射线辐照的方法育种,该育种方法依据的生物学原理是______ 。将辐照处理后的酵母菌涂布在以______ 为唯一碳源的固体培养基上,培养一段时间后,假设有两个菌落产生的分解圈(底物被分解后产生的圆形区域)相同,应选择出直径______ (填“较小”或“较大”)的菌落进行纯化后即能获得降解脂肪能力强的菌株。
(1)下列常规微生物实验中用到的物品及其灭菌方法正确的是
编号 | ① | ② | ③ | ④ |
物品 | 培养基 | 接种环 | 涂布器 | 培养皿 |
灭菌(消毒)方法 | 干热 | 酒精 | 火焰灼烧 | 煮沸 |
(2)称取1.0g某土壤样品,转入99mL无菌水中,制备成菌悬液,经
(3)为了进一步提高酵母菌的产酶能力,可对分离所得的菌株采用射线辐照的方法育种,该育种方法依据的生物学原理是
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【推荐3】(一)科学家用植物细胞杂交方法,将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合,成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株,如图1所示,其中①~⑤表示过程,英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2。据图回答下列问题:
(1)实现过程②的原理是_____________ ,从④到⑤需要更换新的培养基,原因是_____________ 。
(2)过程②后,在光学显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_____________ (细胞器)存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内最多含_____________ 条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_____________ 倍体植株。
(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞,那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是_____________ 处理。
(二)随着新冠疫情的持续,人类消耗了大量的一次性口罩,这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌,设计了如图所示的流程。回答下列问题:
(5)筛选目的菌的培养基应以______ 为唯一碳源。
(6)图中“甲”指的是_______________ ,目的是____________ 。
(7)已知目的菌分解聚丙烯纤维需要多种酶的共同参与,如果用凝胶色谱法分离其中的酶,相对分子质量小的酶移动速度______ 。目的菌比酶分子大得多,工厂化降解聚丙烯纤维时,通常采用______ 法来固定目的菌。影响目的菌降解聚丙烯纤维效果的因素有温度、pH以及_________________ 等(答出两点即可)。
(8)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL,培养一段时间,平板上菌落数分别为35个、33个、34个,则可推测每克土壤样品中的细菌数为______ 个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是_______________ 。
(1)实现过程②的原理是
(2)过程②后,在光学显微镜下观察融合的活细胞中有供体的
(3)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内最多含
(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞,那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是
(二)随着新冠疫情的持续,人类消耗了大量的一次性口罩,这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌,设计了如图所示的流程。回答下列问题:
(5)筛选目的菌的培养基应以
(6)图中“甲”指的是
(7)已知目的菌分解聚丙烯纤维需要多种酶的共同参与,如果用凝胶色谱法分离其中的酶,相对分子质量小的酶移动速度
(8)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL,培养一段时间,平板上菌落数分别为35个、33个、34个,则可推测每克土壤样品中的细菌数为
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