动物细胞培养时需要在培养液中加入动物血清。为了研究不同“层次”血清对细胞增殖的影响,科研人员做了以下实验。将分离出的牛血清装入专用血清瓶后,放入冰箱中直立静置一段时间。取三支带刻度的吸管,将血清从上到下轻轻吸成均等的三份,分别装入消毒后的瓶中,标记为上、中、下,再分别从三个瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中,混合均匀备用。分别取等量的不同“层次”的血清和混合血清加入新配制的动物细胞培养液中,再接种小鼠上皮细胞(接种细胞密度为5×104个·mL-1),在适宜条件下培养72h后,进行计数,结果如下表,回答下列问题:
(1)在吸取血清的过程中,要严格禁止摇晃或震动血清瓶,目的是_____ 。
(2)动物细胞培养时,通常采用松盖培养瓶或_____ ,并将它们置于含有_____ 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。若培养的细胞来自哺乳动物,则细胞培养时应将温度控制在_____ 为宜。
(3)用血细胞计数板计数细胞时,统计出来的数据比实际活细胞数往往偏_____ ,原因可能是_____ 。
(4)从表中结果可以看出,不同“层次”的血清对细胞增殖的影响不同,造成这种结果的主要原因是_____ 。
组别 | 上 | 中 | 下 | 混合 |
72h后细胞数/(个·mL-1) | 9.75×104 | 1.04×105 | 7.5×104 | 1.85×105 |
(2)动物细胞培养时,通常采用松盖培养瓶或
(3)用血细胞计数板计数细胞时,统计出来的数据比实际活细胞数往往偏
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更新时间:2023-04-18 21:24:08
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【推荐1】为获得高效产酸的醋酸菌用于果醋制作,某兴趣小组以苹果皮为材料,进行实验,实验流程如下,回答下列相关问题:
培养基:米曲汁乙醇碳酸钙培养基——米曲汁1000mL,CaCO310g,95%乙醇30mL(灭菌后加入)。在该培养基上,醋酸菌菌落周围会形成透明圈。(1)微生物的培养、分离必须严格无菌操作处理,培养基无菌处理的方法是_________ ,培养皿、锥形瓶的无菌处理方法是___________ 。
(2)①过程通常需在___________ °C进行________ (填“静置”或“振荡”)培养,原因是_______________________________ 。
(3)②过程需采用__________ 接种,应选择________________________ 的菌落作为菌种进一步培养。
培养基:米曲汁乙醇碳酸钙培养基——米曲汁1000mL,CaCO310g,95%乙醇30mL(灭菌后加入)。在该培养基上,醋酸菌菌落周围会形成透明圈。(1)微生物的培养、分离必须严格无菌操作处理,培养基无菌处理的方法是
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【推荐2】[生物——选修1:生物技术实践]
乙草胺是除草剂中常见的化学成分,在土壤和水体中存在时间长,难以降解。请回答下列问题:
(1)实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌,需将土壤样品置于以___________ 为唯一碳源的培养基中进行富集培养。
(2)该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释,分别取103、104和105稀释倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上,每个稀释倍数涂布三个平板,结果各平板的菌落数分别为(286、298、297),(35、32、31),(36、7、2)。
①不活会用干计数的为_______________ 倍数的稀释液,另外两组稀释倍数得到的细菌数不一致的原因可能是______________________ 。
②某同学认为,要防止杂菌的污染,可在培养基中加入青霉素,你觉得该同学的说法是否正确?_________ ,理由是_________________________________ 。
(3)实验小组从土壤中筛选出两株乙草胺降解菌D1和D2,温度对两株降解菌的生长的影响如下图所示。对温度适应范围更广的是菌株___________ ,温度会影响菌株的生长状况的原因是______________________ 。
乙草胺是除草剂中常见的化学成分,在土壤和水体中存在时间长,难以降解。请回答下列问题:
(1)实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌,需将土壤样品置于以
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【推荐3】土壤中含有能分解淀粉的细菌,某生物兴趣小组欲从土壤中分离此细菌并进行计数。请回答:
(1)鉴定淀粉可用________ 染色。欲把能分解淀粉的细菌从土壤中分离出来,需使用以淀粉为唯一________ 源的选择培养基。配制好的培养基需用______________ 法进行灭菌。
(2)用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目________ (填“少”或“多”),原因是________________________________________________________________________ 。
(3)获取淀粉分解菌的一段DNA后可采用PCR技术进行扩增。PCR反应中高温解开模板DNA双链的过程称为________ ,子链延伸需要_____________ (填酶的名称)催化。PCR反应中需靠____________________ 维持酸碱度。
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【推荐1】人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题:
(1)动物细胞培养时,培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外,往往还需加入一定量的_______________ ,以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是___________________________ 。
(2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_______________ 。为了防止有害代谢物的积累,可采用_______________ 的方法,以便清除代谢物。
(3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是_______________ ,最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的化学诱导因素是_______________ 。
(4)甲、乙、丙中,只含杂交瘤细胞的是_______________ ,②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得_________________________ 。
(5)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如图所示:
据图分析,固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是__________________ ,可通过测定________ 来判断待测抗原量。
(6)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的,具有化学性质单一、特异性强的特性。单克隆抗体在临床上的主要用途有_______________________ (至少举一例)。
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【推荐2】器官移植中供体器官的严重缺乏一直是困扰需要器官移植患者的问题。中山大学眼科中心主任葛坚领导的研究小组培育出了猴鼠嵌合体——“猴鼠”,期待成果可用于人体角膜等器官的移植。根据科研过程示意图回答有关问题:
(1)图中①体外培养时,应将培养皿或松盖培养瓶置于含______________ 的混合气体的培养箱中进行培养。为了防止杂菌污染要在培养基中加入一定量的___________ ;而由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全弄清楚,所以还要加入_________________ 。
(2)应将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的_______________ 部位,才能伴随其发育成某种组织。猴鼠嵌合体中体细胞的基因型_________ (相同或不同)。
(3)若想进一步提高胚胎的利用率,可采用_______________________ 技术,要注意的是_________________________ ,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(1)图中①体外培养时,应将培养皿或松盖培养瓶置于含
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【推荐3】秀丽隐杆线虫的fat-1基因,编码ω-3PUFAs脱氢酶,能将ω-6PUFAs转化为ω-3PUFAs。人类食物中的ω-3PUFAs是极度缺乏的,若提升食物中的ω-3PUFAs比例,对健康更有利。本研究试图通过转基因技术将fat-1基因转入绵羊的基因组,再用动物克隆技术创造能产生ω-3PUFAs的转基因绵羊,生产具有保健功能的羊肉,技术流程如图所示。回答下列问题:
(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是____________ ,应用____________ 法将fat-1基因导入绵羊胎儿成纤维细胞。
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过____________ 的方法,为细胞提供无毒的环境,并将细胞置于含有____________ 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有____________ 且形态良好的卵母细胞进行去核处理,再将供体细胞注入去核的卵母细胞中,通过____________ 法使两细胞融合,形成重构胚。
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行____________ 处理,可通过____________ 技术检测fat-1基因是否成功表达。
(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行
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