组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:670 题号:18944024
盐胁迫会影响植物的生长,可用转基因技术提高植物的耐盐能力。mybx是响应盐胁迫的关键转录因子,其功能缺失突变体对150mmol·L-1的NaCl高度敏感。HKT1基因表达的Na+转运蛋白介导Na+从木质部导管到木质部薄壁细胞的运输,减少木质部的Na+含量,从而提高植物的耐盐能力。科研人员构建HKT1基因的表达载体获得HKT1基因表达菌体,构建过程如图所示。四种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题:
限制酶HindⅢBamHIXhoIBglⅡ
识别序列及切割位点A↓AGCTTG↓GATCCC↓TCGAGA↓GATCT
(1)将拟南芥细胞破碎提取RNA时,需要在溶液中加入___________,以防止RNA降解。过程③要选择合适的限制酶切割含HKT1基因的DNA片段,应选用的表中的限制酶是___________
(2)过程⑤将重组质粒导入大肠杆菌。在筛选含有HKT1基因的大肠杆菌时,除必要的营养物质,还需要在培养基中添加___________。提取重组质粒A将其导入农杆菌,用农杆菌侵染拟南芥mybz突变体花序,农杆菌的作用是___________
(3)检测转HKT1基因拟南芥mybr突变株是否表达出Na+转运蛋白时,可用___________技术进行检测。若Na+转运蛋白高度表达,还需要进一步鉴定其抗性程度,实验的思路是___________

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】请回答有关如图的问题:
      
(1)图甲中序号④所示过程叫做_________
(2)如图乙,一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,在基因尾端还必须有[2] _________;图中[3] _________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
(3)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,则构建基因表达载体时,图乙中序号[1]代表的是_________;且在图甲中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体__________的精子。
(4)为获得较多的受精卵进行研究,图甲中⑥过程一般用激素对供体做_________处理;为提高培育成功率,进行⑩过程之前,要对供体和受体动物做_________处理。
(5)用_________技术处理发育到_________期或囊胚期的早期胚胎,可获得同卵双胎或多胎。
2023-08-04更新 | 25次组卷
非选择题-实验题 | 适中 (0.65)
【推荐2】鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草愈伤组织细胞中,经组织培养,以获得抗病毒烟草。请回答下列问题:
(1)若要体外大量合成鸡干扰素基因,可采用_______技术,该技术所使用的引物实质是_____________
(2)构建重组基因表达载体需要的工具酶有___________________________;一个完整的重组基因表达载体应该包括启动子、目的基因、标记基因和终止子,其中标记基因的作用是_________________
(3)将重组表达载体导入农杆菌之前,需用Ca2+处理农杆菌,使其成为_________,以便提高转化率;重组基因表达载体导入烟草愈伤组织细胞后,该细胞主要经过_______两个阶段发育成抗病毒烟草。
(4)鸡干扰素能在烟草细胞中表达的原因是_______________________________;若要从个体水平上检测抗病毒烟草是否培育成功,可采用的方法是____________
2019-12-17更新 | 239次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐3】取同种生物的不同类型细胞,检测其基因表达,结果如图1,回答下列相关问题.

(1)基因1~8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因,则该基因最有可能是基因_____
(2)图所示细胞中功能最为近似的是细胞_____
A.1与6   B.2与5C.2与3D.4与5
(3)判断图中细胞功能近似程度的依据是_____
(4)如图2为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1Kb=1000个碱基对长度.请据图回答:
①质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是__________
②将图中的目的基因与质粒B进行重组,需要用到_____酶.如果是两两重组,可能有_____种长度的重组结果。
③在基因工程实验的过程中,检查目的基因是否重组到质粒中,也是一个重要的一步.现使用_____酶切重组质粒,完全酶切后,进行电泳检测.若电泳图谱中出现长度为1.1kb和_____kb,或者_____kb和_____kb的片段,则基本上可以判断该重组质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计)。
④下列关于基因工程常用运载体﹣﹣质粒的说法正确的是_____
A.质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子,使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B.质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C.质粒上具有多种限制酶切点,以便于切割后与目的基因连接.没有限制酶就无法使用质粒运载体
D.质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
2019-10-29更新 | 62次组卷
共计 平均难度:一般