CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术，Cas9基因表达的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA（SgRNA）引导下，切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示，下列分析正确的是（ ）
| A．构建重组质粒时，SgRNA编码序列需要插入到质粒的启动子上游 |
| B．SgRNA和Cas9蛋白形成复合体后，其功能类似于DNA聚合酶 |
| C．根据目标DNA设计相应的SgRNA，可实现对目标DNA的定点切割 |
| D．CRISPR/Cas9识别目标DNA序列主要与Cas9蛋白的特异性相关 |
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更新时间：2023-05-18 12:46:39
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名校
【推荐1】下图为不同限制性核酸内切酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述正确的是（ ）
| A．若DNA上的碱基随机排列，Not I限制酶切割位点出现频率较其他三种限制酶高 |
| B．能被BamH I识别的序列也一定能被BglⅡ识别 |
| C．图示4种限制酶有的可能识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 |
| D．一个DNA分子用EcoR I切成两个片段时会发生8个氢键的断裂 |
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名校
解题方法
【推荐2】在噬菌体和宿主漫长的“军备竞赛”中，为抵御噬菌体的入侵，细菌进化出了多种系统进行防御，其中一类为“限制—修饰”系统，如图所示。下列说法不正确的是（ ）
| A．该噬菌体侵染细菌实验能说明噬菌体的遗传物质是DNA |
| B．细菌A的DNA序列可能不含限制酶的识别序列而使自身DNA得以保护 |
| C．若极少数噬菌体发生了这种防御逃逸，噬菌体的DNA可能被甲基化修饰 |
| D．发生了这种防御逃逸的噬菌体，对治疗具有多药耐药性的致病细菌引起的疾病是不利的 |
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名校
【推荐1】下列关于基因工程技术的说法，错误的是（ ）
| A．天然的质粒、噬菌体和动植物病毒一般不可以直接用作运载体 |
| B．PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 |
| C．载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 |
| D．目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达 |
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名校
【推荐2】生长激素是医学实验及生物实验中常用的重要物质，最初生长激素是从牛和猪脑垂体中提取出来的，但副作用过多。而化学合成的方法效率较低，没有实用价值，因此，采用基因工程方法大规模生产人生长激素是满足临床大量需求的重要手段。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如下图1、图2所示，下列相关叙述错误的是（ ）
（限制性核酸内切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）
（限制性核酸内切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）
| A．图1质粒中没有标注出来的基本结构是复制原点 |
| B．BamHⅠ酶和BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位用酶Sau3AⅠ一定能切开 |
| C．用Sau3AⅠ切图1所示的质粒A得到DNA片段对RNA聚合酶有一定的亲和力 |
| D．生长激素基因也可以嵌入羊基因组的任何位置，以得到转基因羊并对生长激素进行大规模生产 |
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真题
名校
【推荐1】近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见图）。下列相关叙述错误的是
| A．Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成 |
| B．向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则 |
| C．向导RNA可在逆转录酶催化下合成 |
| D．若α链剪切点附近序列为……TCCACAATC……，则相应的识别序列为……UCCACAAUC…… |
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名校
【推荐2】人工基因驱动是以基因编辑技术为核心发展来的，可用于消灭携带疟疾的按蚊。决定野生型按蚊能携带疟原虫的基因组成为aa，科学家合成了使按蚊不能携带疟原虫的基因A。将由“A基因”“Cas9蛋白基因”和“可转录出sgRNA（可识别a基因的RNA序列）的基因”组成的基因驱动器转入野生型按蚊受精卵中，基因驱动器被整合到含a基因的同源染色体（1和1＇）中的1上，使a基因改造成A基因，随后sgRNA识别并引导Cas9蛋白将1＇上的a基因切除，切除部位的DNA会以1上同一位点未断裂的DNA为模板完成修复。下列说法错误的是（ ）
| A．Cas9蛋白作用于双链DNA分子中特定部位的磷酸二酯键 |
| B．经过人工基因驱动改造的野生型按蚊的基因型为Aa |
| C．可利用显微注射将基因驱动器注入野生型按蚊受精卵中 |
| D．若人工基因驱动中的目的基因使按蚊只能繁衍雄性后代，则一段时间后按蚊物种将灭绝 |
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【推荐3】长效抗逆转录病毒疗法（ART）是目前治疗HIV感染的普遍办法，但是它并不能完全清除病毒。患者必须每天服用药物以保持病毒抑制。科学家利用CRISPR-Cas9基因编辑技术，对表达CCR5（HIV病毒进入T细胞的途径）受体基因进行编辑，降低CCR5受体的表达水平。并从宿主基因组中去除整合的HIV病毒DNA.此方法有望完全清除HIV病毒。下列说法正确的是（ ）
| A．HIV病毒是一种DNA病毒 |
| B．CCR5受体可以识别HIV病毒并使病毒进入T细胞 |
| C．HIV病毒中仅包含蛋白质外壳和遗传物质 |
| D．CRISPR-Cas9基因编辑技术可以通过改变HIV的碱基序列来改变遗传信息 |
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