随着塑料产业的发展及塑料制品的广泛使用和消耗，“白色污染”日益严重。合成塑料作为一种非天然的石油基塑料，由于其分子量过大且疏水而难以通过生物膜，因此很难被微生物降解。近年来，研究人员在从土壤中分离聚乙烯（PE）降解菌方面有了较为积极的成果，后又发现某些昆虫的肠道内也存在PE降解细菌，为PE的生物降解提供了一种新途径。
(1)现欲从昆虫的肠道中分离能够高效降解塑料的微生物菌株，其研究思路如下图所示。
选择培养步骤中为达到扩大培养的目的，所使用的培养基为______ 培养基；同时应加入PE作为唯一碳源，目的是________________________ 。划线纯化操作时，第二次及以后的划线总是从上一次划线的末端开始的原因是________________________ 。
(2)某研究团队从食塑料蜡虫肠道中分离出能够降解PE的两种细菌（YT1和YP1），将其分别在PE薄膜培养液中培养，培养液中细胞数量变化以及PE失重率（PE重量损失变化比率）变化如下图所示。
其中对照组的培养基加入______ ；实验组两种细菌种群数量变化呈______ 增长，分解PE的能力比较强的是______ 细菌。
(3)除降解塑料的微生物菌株的分离提纯应用外，开发新的塑料替代品也是解决“白色污染”的重要途径。羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。由于嗜盐细菌能够在高pH、高NaCl浓度下正常生长，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，该系统不需灭菌的关键设置是______ ，其原因是________________________ 。研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株细胞增殖和pHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中______ 可能是高密度培养的限制因素。
(1)现欲从昆虫的肠道中分离能够高效降解塑料的微生物菌株，其研究思路如下图所示。
选择培养步骤中为达到扩大培养的目的，所使用的培养基为
(2)某研究团队从食塑料蜡虫肠道中分离出能够降解PE的两种细菌（YT1和YP1），将其分别在PE薄膜培养液中培养，培养液中细胞数量变化以及PE失重率（PE重量损失变化比率）变化如下图所示。
其中对照组的培养基加入
(3)除降解塑料的微生物菌株的分离提纯应用外，开发新的塑料替代品也是解决“白色污染”的重要途径。羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。由于嗜盐细菌能够在高pH、高NaCl浓度下正常生长，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，该系统不需灭菌的关键设置是
更新时间：2023-05-11 15:59:15
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【推荐1】某些老陈醋会出现产气现象，原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）、未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：
(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________ 。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________ 。
(2)实验小组初步筛选出了A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，筛选过程如下图所示。
①过程a的接种方法是__________ ，判断依据是__________ 。
②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________ ，或培养时间太长导致__________ 。
③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路：__________ 。
(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：
该实验的目的是__________ 。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是__________ 、__________ 。
(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种
(2)实验小组初步筛选出了A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，筛选过程如下图所示。
①过程a的接种方法是
②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致
③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路：
(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：
细菌 | 不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm | ||||
5/（μg·mL-1） | 7.5/（μg·mL-1） | 10/（μg·mL-1） | 15/（μg·mL-1） | 20/（μg·mL-1） | |
A1 | 0.2 | 2 | 8 | 13 | 17 |
A2 | 7 | 10 | 12 | 15 | 16 |
A3 | 5 | 6 | 5 | 6 | 6 |
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【推荐2】白假丝酵母可利用培养液中的糖产生酸和二氧化碳，酸性环境又促进白假丝酵母的增殖与发育。为研究X物质在有氧和缺氧条件下对白假丝酵母增殖和产酸的抑制作用，以酵母菌数和培养液pH值为测定指标，完善实验思路，设计实验结果记录表并分析讨论。
（要求：不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜）
回答下列问题：
（1）完善实验思路：
①取若干培养瓶，分组如下：
甲组：含X物质的酵母菌培养液+白假丝酵母菌菌液，有氧条件下37℃振荡培养
___ ……
②0、12、24、36、48小时用____ 检测各组菌液的浑浊度，同时测pH值并记录。
③____ 。
（2）设计有氧条件下的实验结果记录表____
（3）分析与讨论
① 本实验采用浑浊度作为检测指标的原因是____ 。
② 鉴定酵母菌的死活可使用美蓝染料（氧化型为蓝色，还原型为无色；使用的美蓝为氧化型，且能进入细胞）的原因是：____ 。
③ 白假丝酵母能在口腔中增殖并引起一定危害，而X物质可减少这种危害，则X物质作用原理可能是____ 。
（要求：不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜）
回答下列问题：
（1）完善实验思路：
①取若干培养瓶，分组如下：
甲组：含X物质的酵母菌培养液+白假丝酵母菌菌液，有氧条件下37℃振荡培养
②0、12、24、36、48小时用
③
（2）设计有氧条件下的实验结果记录表
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① 本实验采用浑浊度作为检测指标的原因是
② 鉴定酵母菌的死活可使用美蓝染料（氧化型为蓝色，还原型为无色；使用的美蓝为氧化型，且能进入细胞）的原因是：
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【推荐3】碱法嫩化是一种传统的牛肉嫩化工艺，中国自古以来就有在炖煮牛肉中加入纯碱来提高牛肉嫩度的做法。为了探究牛肉嫩化的最佳条件，某研究小组进行了如下实验（剪切力越小，牛肉嫩度越高；Na2CO3溶液用自来水配制）：
实验结果如下表所示：
表：不同浓度Na2CO3溶液对牛肉pH及剪切力的影响
请回答下列问题：
(1)实验设计图中，横线处的处理方式为_________ ；从上表的实验数据可以得出，处理所用的Na2CO3溶液浓度与牛肉嫩度的关系是_____________ 。
(2)为了解碱法嫩化的原理，实验小组同学查阅了相关文献，并统计出如下结果：
根据图2、图3的结果，推测碱法嫩化的原理是Na2CO3通过_________________ 而提高肌肉嫩度，以达到嫩化目的；该研究小组中一位同学据此对实验设计提出改进方案，认为不应该用鲜嫩M9和牛牛排，而应该用_________ 更高的老牛肉进行实验，以观察到更明显的嫩化效果。
(3)利用生姜对牛肉进行腌制也可以起到一定的嫩化效果。该研究小组中一位同学想到：可以将生姜蛋白酶（最适pH=6.5；pH>8时失活）和0.4mol/LNa2CO3（pH≈12）溶液共同使用，以达到更好的嫩化效果，但随即否定了自己的想法，理由是________________ ；而同组另一位同学认为这种想法可行，他想到的方法是________________ 。
实验结果如下表所示：
表：不同浓度Na2CO3溶液对牛肉pH及剪切力的影响
Na₂CO₃浓度/（mol·L⁻¹） | pH | 剪切力/kg |
0 | 5.55±0.00 | 15.00±0.47 |
0.25 | 6.10±0.02 | 14.36±0.27 |
0.30 | 6.30±0.01 | 12.82±0.36 |
0.35 | 6.43±0.01 | 9.31±0.37 |
0.40 | 6.81±0.00 | 8.63±0.40 |
(1)实验设计图中，横线处的处理方式为
(2)为了解碱法嫩化的原理，实验小组同学查阅了相关文献，并统计出如下结果：
根据图2、图3的结果，推测碱法嫩化的原理是Na2CO3通过
(3)利用生姜对牛肉进行腌制也可以起到一定的嫩化效果。该研究小组中一位同学想到：可以将生姜蛋白酶（最适pH=6.5；pH>8时失活）和0.4mol/LNa2CO3（pH≈12）溶液共同使用，以达到更好的嫩化效果，但随即否定了自己的想法，理由是
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【推荐1】一些细菌可以产生抑制金黄色葡萄球菌繁殖的物质，某同学欲从土壤中分离并筛选出能高效抑制金黄色葡萄球菌的菌株。回答下列问题：
(1)在分离筛选目的菌株的过程中，应将土壤浸出液稀释后接种于涂满_________ 的培养基上，从而对菌株进行筛选。
(2)微生物的分离、培养过程需要严格的无菌环境，接种环和涂布器的灭菌方法是_________ 。
(3)下图表示某培养基中的部分菌落，其中白色部分为抑菌圈，黑点代表大小不同的菌落。
①图中培养基中的接种方式为_________ 。
②已知四个培养基上的菌落数分别为36、44、18和40，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，涂布时每个培养基滴加的样液体积为0.1mL，则土壤浸出液的稀释倍数为_________ 倍。
③图中的甲、乙、丙三个菌落中的细菌，对金黄色葡萄球菌抑制效果最好的是_________ 。
(1)在分离筛选目的菌株的过程中，应将土壤浸出液稀释后接种于涂满
(2)微生物的分离、培养过程需要严格的无菌环境，接种环和涂布器的灭菌方法是
(3)下图表示某培养基中的部分菌落，其中白色部分为抑菌圈，黑点代表大小不同的菌落。
①图中培养基中的接种方式为
②已知四个培养基上的菌落数分别为36、44、18和40，每升土壤浸出液中的该细菌活菌数约为4×109个，涂布时每个培养基滴加的样液体积为0.1mL，则土壤浸出液的稀释倍数为
③图中的甲、乙、丙三个菌落中的细菌，对金黄色葡萄球菌抑制效果最好的是
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【推荐2】木质素是一类复杂的有机聚合物，在细胞壁的形成中特别重要，赋予木材和树皮刚性且不容易腐烂的特性。科研人员从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如图所示。回答下列问题：_________ mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了___________ 倍。
(2)实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和___________ 。在涂布平板时，接种的菌悬液一般不超过0.1mL，原因是菌悬液过多会使细菌数量增多，不易形成_________ 。
(3)若培养得到了如步骤⑥所示的菌落，已知这些细菌均为异养型细菌，则步骤⑥所用的培养基是__________ （填“以木质素为唯一碳源”或“添加了木质素的牛肉膏蛋白胨”）的培养基，原因是_________ 。
(4)木质素分解菌能将纤维素分解生成葡萄糖等小分子糖类，木质素分解菌可用葡萄糖作为碳源，进入细菌细胞内的葡萄糖的主要作用是_________ 和__________ 。
(2)实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和
(3)若培养得到了如步骤⑥所示的菌落，已知这些细菌均为异养型细菌，则步骤⑥所用的培养基是
(4)木质素分解菌能将纤维素分解生成葡萄糖等小分子糖类，木质素分解菌可用葡萄糖作为碳源，进入细菌细胞内的葡萄糖的主要作用是
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【推荐3】橙汁能帮助人体排毒，延缓人体衰老，深受消费者追捧。但生产过程中感染脂环酸芽孢杆菌，橙汁的品质会受到影响。为优化橙汁生产的质量监控工艺，技术人员设计了如下流程，开展脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定。请回答：
(1)步骤①从果园中取土壤10克，制备土壤稀释液。土样应取自____________ （填“表层”或“深层”）土壤，依据是____________ ；步骤②制备土壤稀释液需充分振荡20min，主要目的是____________ 。
(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了_______ 倍，步骤④需要用到的接种工具是____________ 。
(3)将④中分离得到的可疑菌株制成菌悬液，80℃水浴热处理10min，再取0.1mL热处理后的菌液涂布接种到培养基平板上，45℃培养48h。该操作的目的是____________ 。
(4)为研究控制脂环酸芽孢杆菌生长的方法，科研人员进行了如下设计：①称取一定量的抑菌剂，配制成不同浓度的抑菌液。②将上图得到的菌株原液稀释。③分别取不同浓度的抑菌液和菌株稀释液，加入到相对应的培养液中形成菌悬液（三种液体均等量）。一段时间后，将菌悬液分别接种到适宜的培养基平板上。经后来论证发现，该设计不够严谨，理由是_____________ 。
(1)步骤①从果园中取土壤10克，制备土壤稀释液。土样应取自
(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了
(3)将④中分离得到的可疑菌株制成菌悬液，80℃水浴热处理10min，再取0.1mL热处理后的菌液涂布接种到培养基平板上，45℃培养48h。该操作的目的是
(4)为研究控制脂环酸芽孢杆菌生长的方法，科研人员进行了如下设计：①称取一定量的抑菌剂，配制成不同浓度的抑菌液。②将上图得到的菌株原液稀释。③分别取不同浓度的抑菌液和菌株稀释液，加入到相对应的培养液中形成菌悬液（三种液体均等量）。一段时间后，将菌悬液分别接种到适宜的培养基平板上。经后来论证发现，该设计不够严谨，理由是
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【推荐1】将葡萄球菌在含卵黄的固体培养基上培养时，葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，形成的菌落周围会出现特有的乳白色乳浊环。某兴趣小组欲通过实验室培养和计数来检测某果汁中的葡萄球菌密度。回答下列问题：
（1）配制分离葡萄球菌的培养基时，在培养基中加入--定量的卵黄液，卵黄液除了能给微生物提供_______ 、水和无机盐等营养物质外，还具有的作用是________ 。在配制培养基时若加入高浓度的NaCl溶液，就更容易筛选出葡萄球菌来，最可能的原因是______ 。
（2）检测果汁中的葡萄球菌密度时，需先将果汁稀释。若要制成101倍的稀释样液，可取待检测果汁2．5 mL加入______ mL无菌水中。稀释后的样液需用_______ 法接种在固体培养基上，利用这一方法进行活菌计数的原理是_______ 。
（3）将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度，还需要知道的一个重要数据是_______ 。
（1）配制分离葡萄球菌的培养基时，在培养基中加入--定量的卵黄液，卵黄液除了能给微生物提供
（2）检测果汁中的葡萄球菌密度时，需先将果汁稀释。若要制成101倍的稀释样液，可取待检测果汁2．5 mL加入
（3）将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度，还需要知道的一个重要数据是
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【推荐2】我国传统酿造技术历史悠久，其中包括腐乳的制作、泡菜的腌制、果酒的发酵和果醋的酿造等，传统工艺中白酒的发酵和醋的酿造主要生产工艺流程如图。回答下列问题：
（1）在酒精发酵阶段，发酵罐要先__________________ ，目的是__________________ ，然后密闭，有利于获得更多的酒精产物，可使用__________________ 检测酒精。
（2）在酒精发酵期间，对发酵罐中的酵母菌密度进行调查统计时，可以使用光学显微镜和______________ 等工具进行计数，如果取样时未摇匀，若从底部取样，则会使测定值_______ （填“偏大”“偏小”或“无影响”）。
（3）在醋酸发酵阶段，要将温度严格控制在___________ 范围内，并注意适时充气。
（4）为了测定醋酸菌活菌的数量，可以采用________________ （填“稀释涂布平板法”“平板划线法”或“标志重捕法”），为保证结果准确，一般选择菌落数为____________ 的平板进行计数。
（1）在酒精发酵阶段，发酵罐要先
（2）在酒精发酵期间，对发酵罐中的酵母菌密度进行调查统计时，可以使用光学显微镜和
（3）在醋酸发酵阶段，要将温度严格控制在
（4）为了测定醋酸菌活菌的数量，可以采用
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【推荐3】请回答下列与微生物培养以及植物组织培养有关的问题：
（1） 为降低称量误差，在配制MS培养基时，通常先将各种药品配制成一定倍数的__________ ，用时稀释。MS培养基中的Na2-EDTA的主要作用是_________ ，其中的蔗糖除了作为碳源和能源物质外，还具有__________ 作用，这对于离体组织和细胞的正常生长和发育也是非常重要的。
（2）植物组织培养的MS培养基可采用_________ 灭菌。形成愈伤组织的过程中，除需无菌、营养和激素外，_________ 等外界条件也很重要。
（3）某研究小组欲从土壤中筛选出能降解不透明含氮有机物W的细菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________ ，分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成如图菌落。如果要得到目标菌，应该选择___________ 菌落进一步纯化，选择的依据是_______________________________________ 。
（1） 为降低称量误差，在配制MS培养基时，通常先将各种药品配制成一定倍数的
（2）植物组织培养的MS培养基可采用
（3）某研究小组欲从土壤中筛选出能降解不透明含氮有机物W的细菌，所用选择培养基中的氮源应该是
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