【推荐1】科研人员拟用同源重组的方法敲除金黄色葡萄球菌的SigB基因。回答下列问题：
(1)同源重组的原理如图1所示。图中剪刀代表的是一种核酸内切酶。当DNA被切开后，细胞中具有修复功能的酶可将这些切开DNA片段进行重新连接，这样SigB基因就能被其它碱基序列替换，实现SigB基因的敲除。结合图1的信息，为实现基因的敲除，供体DNA片段的碱基序列应为____________。

   

(2)科研人员设计了供体DNA片段，作为目的片段构建重组质粒，导入金黄色葡萄球菌中，敲除金黄色葡萄球菌的SigB基因。
①实验中可替换SigB基因的片段是卡那霉素抗性基因，卡那霉素抗性基因的作用是_______。
②科研人员需将SigB基因上游、卡那霉素抗性基因、SigB基因下游利用____________扩增技术实现供体DNA片段的构建。构建过程如图2所示。

   

由图2可知，SigB基因上游和卡那霉素抗性基因变性后再复性，SiB基因上游和卡那霉素抗性基因单链能够通过____________原则形成局部双链结构，然后在____________催化作用下形成SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段。按照此操作，可将SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段与SigB基因下游融合构建出供体DNA片段。
③通过设计引物可以使卡那霉素抗性基因扩增后，两侧应含有与SigB基因上、下游相同的碱基序列。从图3的p1~p4中选取的引物组合是____________，该引物组合要如何改造才能使其两侧含有与SigB基因上、下游相同的碱基序列____________。

   

(3)有人提出：“可以用这个方法，将人受精卵中新冠病毒受体基因进行敲除，使得不受病毒感染。”你是否同意这种观点，从安全和伦理的角度分别写出理由_____（分别答出一点即可）。

【推荐3】临床上亮氨酸的检测及亮氨酸氨基肽酶活性的检测常用到亮氨酸脱氢酶。为提高亮氨酸脱氢酶产量，研究人员在亮氨酸脱氢酶基因中加入某种酵母菌基因的强启动子Pax，以探究双启动子对亮氨酸脱氢酶产量的影响。大致过程如图所示，回答下列问题。

(1)组成亮氨酸脱氢酶基因的单体是_________，利用PCR技术扩增此基因时，有人根据基因的碱基序列设计了“5'-ATGGAG-3'、5'-AAATGT-3'”的一对引物，结果未获得此目的基因，从引物的角度分析可能的原因是_________（写出2点）。
(2)由图2分析，为保证强启动子和质粒1正确连接，利用PCR扩增Pax时需要在引物的5'端添加限制酶的识别序列，添加的序列由5'→3'的序列分别为_________。进行①时，需用到相应限制酶和DNA连接酶，其中连接酶作用的底物为下图中的_________（填“A”或“B”或“A和B”）。
A.             B.
(3)将构建的重组质粒导入经_________处理的大肠杆菌中，然后接种到添加有卡那霉素的培养基上进行筛选。从功能角度看这种培养基属于_________培养基，为了便于筛选，作为受体细胞的大肠杆菌满足的条件是_________。
(4)对比导入了质粒1和重组质粒的大肠杆菌，后者亮氨酸脱氢酶的产量显著提高。有人认为还不足以说明双启动子能显著提高亮氨酸脱氢酶的产量，原因是_________。