【推荐1】图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒结构示意图，图中EcoRⅠ、SmaI、BamHI和HindIII为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。回答下列问题。
   
(1)如果对图1中的胰岛素基因与基因两端相应的限制酶识别序列一同进行扩增，应采用_____技术，该技术需用到的特殊酶是________，同时需要的图1中的两个引物是_____。
(2)不能用SmaI处理目的基因和pBR322的原因是________。可以用EcoRI处理目的基因和质粒，但用这种酶处理的缺点是_______。
(3)根据图2可知，对目的基因是否导入受体细胞进行初步筛选，所用的培养基中应加入____，能在该培养基中生存的细胞也不一定就导入了目的基因，原因是_____。

【推荐2】PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。下列不正确的是（       ）

A．加热使DNA双链打开，这一步是打开氢键，在细胞中是在解旋酶的作用下进行的

B．当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中原料是脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则

C．PCR技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有液体环境、适宜的温度和pH等三个条件

D．若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为1/16

【推荐3】强光下番茄叶片细胞内会通过促进NPQ（一种光保护机制）的激活，避免高光造成的损伤。研究发现下部叶片虽未受强光照，但其NPQ活跃程度会随之发生变化，从而使整株植物均可抵抗高光。推测是上部产生物质H并传递到下部，促进NPQ激活，且该变化受物质H的量的影响。现利用野生型番茄获得H沉默植株（A）和H过表达植株（B），并通过嫁接实验以验证上述猜测。
   
注：TRV载体引起细胞内的与其携带基因相同序列（靶基因）的mRNA降解
(1)结合信息，本实验中目的基因应选用________。该目的基因可通过________技术获得。结合普通农杆菌中Ti质粒的作用，请说出番茄A构建过程中“特殊”农杆菌的作用特点________。
(2)分子水平上，可通过________（方法）检测物质H是否生成，以确定植株A是否成功构建；若鉴定植株B的构建情况，则需检测________，以确定是否成功构建。
(3)嫁接实验设计如下：

组别	1组	2组	3组
上部叶片	植株A	野生型	Ⅰ________
下部叶片	野生型	野生型	Ⅱ________
检测下部叶片NPQ强度

①在上表横线处完善实验设计，Ⅰ、Ⅱ的番茄植株应分别选用________、________。（填“野生型”、“植株A”或“植株B”）；
②若结果为________，则证明上述推测成立。

【推荐1】（一）回答下列有关果胶酶生产及固定化应用的问题。
(1)用射线处理一些霉菌后，稀释并接种在以较低浓度果胶为______的培养基中，可获得产果胶酶的高产菌株，通过观察比较培养基上______可判断菌株是否属于同一种类。
(2)在分离高产果胶酶菌种的实验操作中，对于获得纯化的果胶酶高产菌单菌落影响最大的是______。

A．实验所用的霉菌孢子来源于多个菌种

B．涂布前涂布器未在酒精灯火焰上灼烧灭菌

C．以添加果胶的蔗糖豆芽汁培养基作为选择培养基

D．实验操作过程中未打开超净台的过滤风

(3)黑曲霉在发酵过程中除分泌果胶酶外，常还分泌蛋白酶、淀粉酶，欲检测黑曲霉在某种环境下分泌的总酶（蛋白质）量，可将提取液稀释后加入______试剂，在特定光程下测定OD值。并利用以______绘制的标准曲线定量。
(4)利用______或交联法对果胶酶进行固定化处理时，果胶酶与介质间均形成新的化学键，固定化酶在使用结束后用大量清水洗涤，其目的是______。
（二）生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面。请回答下列有关问题：
(5)限制性核酸内切酶是能够识别和切割DNA分子内一小段______的酶。早在1970年，科学家就从______中分离出了这种酶。
(6)转入了人胰岛素原基因的大肠杆菌，可合成______，经进一步加工后可获得具有生物活性的胰岛素。
(7)目前基因工程已经广泛应用于遗传育种、______和生态环境保护三大领域。
(8)1943年，科学家在致癌物的诱导下培养小鼠的结缔组织。获得了能在小鼠体内生长肉瘤的长期培养细胞菌（可连续传代的细胞）——______。
(9)胚胎分裂是指借助______技术将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母子宫中发育，产生同卵多仔后代的技术。
(10)胚胎干细胞核移植是指把胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过______，胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。

【推荐2】2018年我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，将人亨廷顿舞蹈病致病基因（HTT基因） “敲入”猪基因组内，获得了人－猪“镶嵌”HTT基因，该技术主要由Cas9蛋白和引导RNA复合物完成（如图1所示），再利用生物工程技术成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型（如图2所示）。

(1)图1中引导RNA能准确识别猪DNA特定序列，并引导Cas9蛋白切割，由此推测Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的___________酶，但Cas9蛋白的特性与该酶的区别是___________________。
(2)引导RNA在识别猪DNA特定序列时，存在的碱基配对识别有_______（填编号）
① A-T             ② U-A             ③ G-C             ④ T-T             ⑤ A-A             ⑥ U-U
(3)通过CRISPR/Cas9技术基因编辑，将含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞的细胞核导入去核的卵母细胞后发育出模型4号猪，整个过程用到了哪些工程技术___（多选）

A．转基因技术	B．动物细胞培养技术
C．动物细胞融合技术	D．细胞核移植技术

(4)图2中1-4号猪中可能成为亨廷顿舞蹈病动物模型的是______号。如果经基因编辑后，人－猪“镶嵌”HTT基因只在猪成纤维细胞的一条染色体DNA上，那么想获得纯合能稳定遗传“人－猪“镶嵌”HTT基因”的亨廷顿舞蹈病动物模型猪，你的思路是______。

【推荐3】下图是转基因抗盐烟草的培育过程。请分析回答：

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用____酶，所需的原料是____。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如下表：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及其切割位点

用图中的质粒和目的基因构建重组DNA分子，不能使用Sma I酶切割，原因是____。图中②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用____酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中④过程，为筛选出导入了重组DNA分子的农杆菌，应在培养基中加____。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，在个体水平上鉴定的具体过程是____。