种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥(2n=10)进行诱变筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序,发现野生型DAI基因发生一个碱基G到A的替换,突变后的基因为隐性基因,据此推测突变体的表型与其有关,开展相关实验。
回答下列问题:
(1)拟采用农杆菌转化法将野生型DAI基因转入突变体植株,若突变体表型确由该突变造成,则转基因植株的种子大小应与_________ 植株的种子大小相近。
(2)用PCR反应扩增DAI基因,用限制性核酸内切酶对PCR产物和_________ 进行切割,用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DAI基因可以正常表达,其上下游序列需具备_________ 。
(3)转化后,T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自由组合定律的前提下,选出单一位点插入的植株,并进一步获得目的基因稳定遗传的植株(如图),用于后续验证突变基因与表型的关系。_________ 。
②T1代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种并播种于选择培养基,选择阳性率约_________ %的培养基中幼苗继续培养。
③将②中选出的T2代阳性植株_________ (填“自交”、“与野生型杂交”或“与突变体杂交”)所得的T3代种子按单株收种并播种于选择培养基,阳性率达到_________ %的培养基中的幼苗即为目标转基因植株。为便于在后续研究中检测该突变,研究者利用PCR扩增野生型和突变型基因片段,再使用限制性核酸内切酶X切割产物,通过核酸电泳即可进行突变检测,相关信息见下,在电泳图中将酶切结果对应位置的条带涂黑_________ 。
回答下列问题:
(1)拟采用农杆菌转化法将野生型DAI基因转入突变体植株,若突变体表型确由该突变造成,则转基因植株的种子大小应与
(2)用PCR反应扩增DAI基因,用限制性核酸内切酶对PCR产物和
(3)转化后,T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自由组合定律的前提下,选出单一位点插入的植株,并进一步获得目的基因稳定遗传的植株(如图),用于后续验证突变基因与表型的关系。
②T1代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种并播种于选择培养基,选择阳性率约
③将②中选出的T2代阳性植株
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更新时间:2023-06-12 13:59:59
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【推荐1】水稻为二倍体雌雄同株植物,花为两性花,现有四个纯合的水稻浅绿叶突变体W、 X、Y、Z,这些突变体的浅绿叶性状均为单基因隐性突变(显性基因突变为隐性基因)导致, 回答下列问题:
(1)若四种突变体分别是不同基因突变的结果,则体现了基因突变具有______ 的特点。
(2)为判断这四个突变体所含的浅绿叶基因之间的位置关系,育种人员进行了杂交实验, 杂交组合及叶片色见下表。
实验结果表明,W的浅绿叶基因与突变体______ 的浅绿叶基因属于非等位基因。为进一步判断X、Y、Z的浅绿叶基因是否在同一对染色体上,育种人员将第4、5、6三组实验的F1自交,观察并统计F2的表现型及比例。不考虑基因突变、染色体变异和互换,预测如下两种情况将出现的结果:
①若突变体X、Y、Z的浅绿叶基因均在同一对染色体上,结果为______ 。
②若突变体Y、Z的浅绿叶基因在同一对染色体上,X的浅绿叶基因在另外一对染色体上,结果为____________ 。
(3)研究表明,W、X、Y、Z的相关基因编码的蛋白质,与催化叶绿素合成或转变有关,它们发生突变导致叶色的改变体现了基因与性状之间的关系有①____________ ;②____________ 。
(1)若四种突变体分别是不同基因突变的结果,则体现了基因突变具有
(2)为判断这四个突变体所含的浅绿叶基因之间的位置关系,育种人员进行了杂交实验, 杂交组合及叶片色见下表。
实验分组 | 母本 | 父本 | F1叶色 |
第1组 | W | X | 浅绿 |
第2组 | W | Y | 绿 |
第3组 | W | Z | 绿 |
第4组 | X | Y | 绿 |
第5组 | X | Z | 绿 |
第6组 | Y | Z | 绿 |
实验结果表明,W的浅绿叶基因与突变体
①若突变体X、Y、Z的浅绿叶基因均在同一对染色体上,结果为
②若突变体Y、Z的浅绿叶基因在同一对染色体上,X的浅绿叶基因在另外一对染色体上,结果为
(3)研究表明,W、X、Y、Z的相关基因编码的蛋白质,与催化叶绿素合成或转变有关,它们发生突变导致叶色的改变体现了基因与性状之间的关系有①
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【推荐2】为了适应全球气候逐渐变暖的大趋势,研究水稻耐高温的调控机制对水稻遗传改良具有重要意义。回答下列问题:
(1)研究获得一株耐高温突变体甲,高温下该突变体表皮蜡质含量较高。让甲与野生型(WT)杂交,F1自交后代中耐高温植株约占1/4,说明耐高温为_____ 性状,且最可能由______ 对基因控制。
(2)已知突变体甲的耐高温突变基因位于水稻3号染色体上,将突变体甲与缺失了一条3号染色体的野生型(WT')水稻杂交获得F1,不含控制该性状的基因的受精卵不能发育,若将上述F1进行随机交配,则F2中耐高温水稻出现的概率是_______ 。
(3)为进一步确定突变位点,研究者进行了系列实验,如下图所示。
①图1中F1在______ 期,3号染色体发生互换,产生F2中相应的植株,然后用F2植株进行自交,可获得纯合重组植株R1-R5.
②对R1-R5进行分子标记及耐高温性检测,结果如图2、图3所示。分析可知,耐高温突变基因位于______ (分子标记)之间。
(4)基因OsWR2的表达能促进水稻表皮蜡质的合成。为了验证“高温胁迫下维持较高的蜡质含量是水稻耐高温的必要条件”,研究小组以突变体甲为对照组,实验组为敲除基因OsWR2的突变体甲,将两种水稻置于_____ ,其他条件相同且适宜,培养一段时间后,检测水稻蜡质含量及耐高温性。预测实验结果____ 。
(1)研究获得一株耐高温突变体甲,高温下该突变体表皮蜡质含量较高。让甲与野生型(WT)杂交,F1自交后代中耐高温植株约占1/4,说明耐高温为
(2)已知突变体甲的耐高温突变基因位于水稻3号染色体上,将突变体甲与缺失了一条3号染色体的野生型(WT')水稻杂交获得F1,不含控制该性状的基因的受精卵不能发育,若将上述F1进行随机交配,则F2中耐高温水稻出现的概率是
(3)为进一步确定突变位点,研究者进行了系列实验,如下图所示。
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①图1中F1在
②对R1-R5进行分子标记及耐高温性检测,结果如图2、图3所示。分析可知,耐高温突变基因位于
(4)基因OsWR2的表达能促进水稻表皮蜡质的合成。为了验证“高温胁迫下维持较高的蜡质含量是水稻耐高温的必要条件”,研究小组以突变体甲为对照组,实验组为敲除基因OsWR2的突变体甲,将两种水稻置于
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【推荐3】科研人员在水稻中发现一个同时受光和低氮诱导表达的基因OsDREBIC,通过转基因手段探究了水稻的产量与该基因表达水平的关系。
(1)为构建OsDREB1C基因过度表达的水稻,科研人员将从水稻中克隆的OsDREB1C基因与外源高效启动子连接,导入水稻基因组中。为检测获得的转基因水稻中是否含有导入的OsDREBIC基因,同时避免内源OsDREB1C基因的干扰,在进行PCR扩增时,应该选择的引物组合是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/4/34677804-a3c3-4602-a4a6-f9a79dc90fe5.png?resizew=554)
(2)OsDREB1C基因以B链为转录模板链,转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。为了使该基因按照正确的方向与已被酶切的HT质粒连接,克隆该基因时在两端添加了SmaI和BamHI的酶切位点,该基因内部没有这两种酶切位点。图中酶切位点1和2所对应的酶依次是_______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/4/c5243c86-fbee-4bdc-bba9-20f746034fa4.png?resizew=383)
(3)科研人员将所构建的OsDREBIC基因过度表达的水稻以及_______ 水稻,均与_______ 水稻进行对比。结果表明,OsDREBIC基因在水稻中的高表达,使其具有光合效率高效、氨肥高效、早熟的三重效果,由此可以看出基因与性状______ (填“是”或“不是”)一一对应的关系。该研究成果为全球粮食生产的重重困境带来曙光。”
(4)科研工作者将过表达OsDREBIC基因和抗除草剂基因同时转入大豆,获得若干转基因植株,已知某高产抗除草剂转基因植株自交子一代中,高产抗除草剂44株、高产不抗除草剂21株、非高产抗除草剂22株,若给所有子一代植株喷施适量除草剂,让存活植株自交,得到的子代群体中,非高产抗除草剂的比例为________ 。
(1)为构建OsDREB1C基因过度表达的水稻,科研人员将从水稻中克隆的OsDREB1C基因与外源高效启动子连接,导入水稻基因组中。为检测获得的转基因水稻中是否含有导入的OsDREBIC基因,同时避免内源OsDREB1C基因的干扰,在进行PCR扩增时,应该选择的引物组合是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/4/34677804-a3c3-4602-a4a6-f9a79dc90fe5.png?resizew=554)
A.①+③ | B.①+② | C.③+② | D.③+④ |
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/4/c5243c86-fbee-4bdc-bba9-20f746034fa4.png?resizew=383)
(3)科研人员将所构建的OsDREBIC基因过度表达的水稻以及
(4)科研工作者将过表达OsDREBIC基因和抗除草剂基因同时转入大豆,获得若干转基因植株,已知某高产抗除草剂转基因植株自交子一代中,高产抗除草剂44株、高产不抗除草剂21株、非高产抗除草剂22株,若给所有子一代植株喷施适量除草剂,让存活植株自交,得到的子代群体中,非高产抗除草剂的比例为
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(0.4)
【推荐1】周期性共济失调是一种由常染色体上的基因控制的遗传病,致病基因导致细胞膜上正常钙离子通道蛋白结构异常,从而使正常钙离子通道的数量不足,造成细胞功能异常。患者发病的分子机理如下图所示。请据图回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/3/13/2159687886389248/2160808663367680/STEM/7fe1c075a63b49f1b7501e1e17d03a6f.png?resizew=454)
注:甲代表起始密码子,乙代表终止密码子
(1)图中的过程①是_______ ,发生的场所主要是______ ;与过程②有关的RNA种类有哪些?_____ 。如果细胞的核仁被破坏,会直接影响图中______ (填结构)的形成。
(2)图②显示正常基因和致病基因所形成的mRNA长度是一样的,但致病基因控制合成的异常多肽链较正常多肽链短,请根据图示推测其原因是______ 。
(3)图中所揭示的基因控制性状的方式是______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/3/13/2159687886389248/2160808663367680/STEM/7fe1c075a63b49f1b7501e1e17d03a6f.png?resizew=454)
注:甲代表起始密码子,乙代表终止密码子
(1)图中的过程①是
(2)图②显示正常基因和致病基因所形成的mRNA长度是一样的,但致病基因控制合成的异常多肽链较正常多肽链短,请根据图示推测其原因是
(3)图中所揭示的基因控制性状的方式是
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(0.4)
【推荐2】遗传与进化
互联网上流传着这样一则幽默:
小狗对小猫说:“你猜我手里有几块糖,猜对了两块都给你!”
小猫对小狗说:“我的 Tas1r2 基因缺失 247 个碱基对,不能合成甜味感受器蛋白,要糖干什么?”
(1)从变异类型角度看,造成小猫不能感受甜味的变异属于_____ 。
A. 基因重组 B. 基因突变 C. 染色体片段缺失 D. 染色体数目减少
(2)研究人员曾对狮子、老虎、印度豹、英国短毛猫等多种猫科动物的 Tas1r2 基因进行测序,发现它们都缺失 247 个碱基对,这可为猫科动物的进化研究提供_____ 。
A. 胚胎学证据 B. 比较解剖学证据C. 生物化学证据D. 古生物化石证据
苯硫脲(PTC)是一种白色晶体。有的人在舔尝苯硫脲时会觉得苦,称为尝味者;也有的人在舔尝苯硫脲时感觉不到苦,称为味盲者。某校高二年级研究性学习小组调查了当地多个家族的苯硫脲尝味能力遗传情况,数据如表 。
(3)根据表数据可知苯硫脲味盲是一种_________ (选填“显性”或“隐性”)性状;已知味盲基因位于常染色体上,以下能作为这一基因定位证据的有___________ 。
A. 母亲味盲,儿子尝味 B. 母亲味盲,女儿尝味
C. 父亲尝味,儿子味盲 D. 父亲尝味,女儿味盲
(4)在我国各民族中,撒拉族的苯硫脲味盲基因频率为 0.3989,而黎族的该基因频率只有 0.2150,这种差异体现了生物多样性三个层次中的_____ ,检测该种多样性最简便的方法是_____ 。
(5)在表中,属于测交的一组婚配方式是_______________________ (选填①、②或③);若一对夫妻均为尝味者,已生育一个味盲男孩,现已怀上第二胎,若想在第二个孩子出生前就确定其是尝味者还是味盲者,可采取的措施是_____________________________ 。
互联网上流传着这样一则幽默:
小狗对小猫说:“你猜我手里有几块糖,猜对了两块都给你!”
小猫对小狗说:“我的 Tas1r2 基因缺失 247 个碱基对,不能合成甜味感受器蛋白,要糖干什么?”
(1)从变异类型角度看,造成小猫不能感受甜味的变异属于
A. 基因重组 B. 基因突变 C. 染色体片段缺失 D. 染色体数目减少
(2)研究人员曾对狮子、老虎、印度豹、英国短毛猫等多种猫科动物的 Tas1r2 基因进行测序,发现它们都缺失 247 个碱基对,这可为猫科动物的进化研究提供
A. 胚胎学证据 B. 比较解剖学证据C. 生物化学证据D. 古生物化石证据
苯硫脲(PTC)是一种白色晶体。有的人在舔尝苯硫脲时会觉得苦,称为尝味者;也有的人在舔尝苯硫脲时感觉不到苦,称为味盲者。某校高二年级研究性学习小组调查了当地多个家族的苯硫脲尝味能力遗传情况,数据如表 。
双亲全为尝味者① | 双亲中只有一个尝味者② | 双亲全为味盲者③ | |
子代尝味者 | 120 | 120 | 无 |
子代味盲者 | 44 | 112 | 全部均为味盲者 |
(3)根据表数据可知苯硫脲味盲是一种
A. 母亲味盲,儿子尝味 B. 母亲味盲,女儿尝味
C. 父亲尝味,儿子味盲 D. 父亲尝味,女儿味盲
(4)在我国各民族中,撒拉族的苯硫脲味盲基因频率为 0.3989,而黎族的该基因频率只有 0.2150,这种差异体现了生物多样性三个层次中的
(5)在表中,属于测交的一组婚配方式是
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(0.4)
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【推荐3】某二倍体自花传粉植物的抗病(A)对易感病(a)为显性,高茎(B)对矮茎(b)为 显性,且两对等位基因位于两对同源染色体。
(1)两株植物杂交,F1 中抗病矮茎出现的概率为 3/8,则两个亲本的基因型为_____ 和_____ 。
(2)让纯种抗病高茎植株与纯种易感病矮茎植株杂交得 F1,F1自交时,若含 a 基因的花粉有一 半死亡,则F2的表现型及其比例是__________________ 。与 F1 相比,F2中 B 基因的基因频 率________ (填“变大”“不变”或“变小”)。
(3)由于受到某种环境因素的影响,一株基因型为 Bb 的高茎植物幼苗染色体加倍成基因型为 BBbb 的四倍体植株,假设该植株自交后代均能存活,高茎对矮茎为完全显性,则其自交 后代的表现型种类及比例为_______________ 。
(4)用 X 射线照射纯种高茎个体的花粉后,人工传粉至多株纯种矮茎个体的雌蕊柱头上,得到的 F1 共 1812 株,其中出现了一株矮茎个体。推测该矮茎个体出现的原因可能有:
① 经 X 射线照射的少数花粉中高茎基因(B)突变为矮茎基因(b);② X 射线照射导致少数花粉中染色体片段缺失,使高茎基因(B)丢失。为确定该矮茎个体产生的原因,科研小 组做了下列杂交实验。请你根据实验过程,对实验结果进行预测。注意:染色体片段缺失的雌雄配子可育,而缺失纯合子(两条同源染色体均缺失相同片段)致死。
实验步骤:
第一步:选 F1矮茎植株与亲本中的纯种高茎植株杂交,得到种子。 第二步:种植上述种子,得 F2植株,自交,得到种子第三步:种植 F2结的种子得到 F3 植株,观察并统计 F3植株茎的高度及比例。
结果预测及结论:
① 若 F3植株的高茎与矮茎的比例为_______________ ,说明 F1中矮茎个体的出现是花粉中高茎基因(B)突变为矮茎基因(b)的结果。
② 若 F3植株的高茎与矮茎的比例为_____ ,说明 F1 中矮茎个体的出现是 B 基因所在染色体片段缺失引起的。
(1)两株植物杂交,F1 中抗病矮茎出现的概率为 3/8,则两个亲本的基因型为
(2)让纯种抗病高茎植株与纯种易感病矮茎植株杂交得 F1,F1自交时,若含 a 基因的花粉有一 半死亡,则F2的表现型及其比例是
(3)由于受到某种环境因素的影响,一株基因型为 Bb 的高茎植物幼苗染色体加倍成基因型为 BBbb 的四倍体植株,假设该植株自交后代均能存活,高茎对矮茎为完全显性,则其自交 后代的表现型种类及比例为
(4)用 X 射线照射纯种高茎个体的花粉后,人工传粉至多株纯种矮茎个体的雌蕊柱头上,得到的 F1 共 1812 株,其中出现了一株矮茎个体。推测该矮茎个体出现的原因可能有:
① 经 X 射线照射的少数花粉中高茎基因(B)突变为矮茎基因(b);② X 射线照射导致少数花粉中染色体片段缺失,使高茎基因(B)丢失。为确定该矮茎个体产生的原因,科研小 组做了下列杂交实验。请你根据实验过程,对实验结果进行预测。注意:染色体片段缺失的雌雄配子可育,而缺失纯合子(两条同源染色体均缺失相同片段)致死。
实验步骤:
第一步:选 F1矮茎植株与亲本中的纯种高茎植株杂交,得到种子。 第二步:种植上述种子,得 F2植株,自交,得到种子第三步:种植 F2结的种子得到 F3 植株,观察并统计 F3植株茎的高度及比例。
结果预测及结论:
① 若 F3植株的高茎与矮茎的比例为
② 若 F3植株的高茎与矮茎的比例为
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(0.4)
【推荐1】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/3/28/1578859448180736/1578859448975360/STEM/fb994bfa806d43ea82d5a16dd3a19a1f.png?resizew=554)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/3/28/1578859448180736/1578859448975360/STEM/d47fd793a81b42709de151a4e4703ca1.png?resizew=364)
1. 若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因,现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊,研究者需将该基因通过_________ (方法)注入到羊的_________ 中,则发育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。这一过程涉及到以下哪些过程_________ 。
A.DNA自我复制B.DNA以其一条链为模板合成RNA
C.RNA自我复制D.按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
2. 限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是______________________________ 。
3. 图2中的目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得,而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点。所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):首先用a 处理质粒;然后用b 处理质粒,使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸;再用c 处理质粒,形成了的限制酶酶切割位点,它可被d 识别。则a~d处依次是_________ 。
①EcoRⅠ ②MetⅠ ③PstⅠ ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶
A.③④⑤②B.③⑤④①C.①⑤④②D.②④⑤③
4. 假设图1质粒上还有一个PstⅠ的识别序列,现用EcoRⅠ、PstⅠ单独或联合切割同一质粒,得到如下表的DNA长度片段。请在图20中画出质粒上EcoRⅠ和PstⅠ的切割位点。(标出酶切位点之间长度)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/3/28/1578859448180736/1578859448975360/STEM/15c85c45bd854d9099b71fbb79df188c.png?resizew=111)
____
5. 检测筛选是一个重要步骤。下图表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法,以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有_________ 。从筛选结果分析,含目的基因的是_____ (填编号)菌落中的细菌。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/3/28/1578859448180736/1578859448975360/STEM/fb994bfa806d43ea82d5a16dd3a19a1f.png?resizew=554)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/3/28/1578859448180736/1578859448975360/STEM/d47fd793a81b42709de151a4e4703ca1.png?resizew=364)
1. 若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因,现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊,研究者需将该基因通过
A.DNA自我复制B.DNA以其一条链为模板合成RNA
C.RNA自我复制D.按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
2. 限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是
3. 图2中的目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得,而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点。所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):首先用a 处理质粒;然后用b 处理质粒,使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸;再用c 处理质粒,形成了的限制酶酶切割位点,它可被d 识别。则a~d处依次是
①EcoRⅠ ②MetⅠ ③PstⅠ ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶
A.③④⑤②B.③⑤④①C.①⑤④②D.②④⑤③
4. 假设图1质粒上还有一个PstⅠ的识别序列,现用EcoRⅠ、PstⅠ单独或联合切割同一质粒,得到如下表的DNA长度片段。请在图20中画出质粒上EcoRⅠ和PstⅠ的切割位点。(标出酶切位点之间长度)
酶 | DNA片段长度(kb碱基对) |
EcoRⅠ | 14kb |
PstⅠ | 2.5kb、11.5kb |
EcoRⅠ+ PstⅠ | 2.5kb、5.5kb/6.0kb |
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5. 检测筛选是一个重要步骤。下图表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法,以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有
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【推荐2】研究发现,PVY-CP基因位于某种环状 DNA 分子中。将 PVY-CP 基因导入马铃薯, 使之表达即可获得抗 PVY 病毒的马铃薯。 图表示 PVY-CP 重组质粒的构建过程,相关酶切位点如下表。
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(1)步骤②选用的 klenow 酶与细胞内的__ (填酶的名称)的功能相似。步骤④应选用的限制性核酸内切酶是__________ 。
(2)若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端与 BglⅡ酶切的 DNA 末端连接,连接部位的 6 个碱基对序列为_________ ,对于该部位,这两种酶_________ (填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。
(3)若用 Sau3AⅠ切图中所示的质粒(多个),最多可能获得_____________ 种大小不同的 DNA 片段。
(4)步骤⑤获得的重组质粒通过农杆菌转入马铃薯的原生质体,并诱导形成细胞壁,再转入_________ ( A、细胞分裂素多,生长素少 B、细胞分裂素少,生长素多 C、细胞分裂素和生长素比例适合 D、细胞分裂素中等,生长素少)的培养基中培养,形成__ ,再进行生根培养,获得转基因马铃薯。
(5)可用__ 的方法,从个体水平检测马铃薯植株中 PVY-CP 基因是否成功表达。
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(1)步骤②选用的 klenow 酶与细胞内的
(2)若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端与 BglⅡ酶切的 DNA 末端连接,连接部位的 6 个碱基对序列为
(3)若用 Sau3AⅠ切图中所示的质粒(多个),最多可能获得
(4)步骤⑤获得的重组质粒通过农杆菌转入马铃薯的原生质体,并诱导形成细胞壁,再转入
(5)可用
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【推荐3】某种类型的白血病由蛋白P引发,蛋白UBC可使P被蛋白酶识别并降解,药物A可通过影响这一过程对该病起到治疗作用。为探索药物A治疗该病的机理,需构建近组载体以获得融合蛋白FLAG-P和FIAG-P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P,FLAG是一种短肽,连接在P或P△的氨基端,使融合蛋白能与含有FLAG抗体的介质结合,但不影响p或P△的功能。
(1)为构建重组载体,需先设计引物,通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是__________ 。为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,该限制酶识别序列应添加在引物的____________ 端(填“3'”或“5'”)。
(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后,与编码FLAG的序列形成一个融合基因,如图甲所示,其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后,融合基因转录出的mRNA序列正确,翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确,但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析,出现该问题的原因是_______________ 。修改扩增P基因时使用的带有EcoRⅠ识别序列的引物来解决该问题,具体修改方案是_______________ 。
(3)融合蛋白表达成功后,将FLAG-P、FLAG-P△、药物A和UBC按照图乙中的组合方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质,分离出与介质结合的物质并用UBC抗体检测,检测结果如图丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC,由①②③组结果的差异推测,药物A的作用是_______ ;由________ 组的差异推测,P△中缺失的特定序列的作用是___________ 。
(4)根据以上结果推测,药物A治疗该病的机理可能是_________ 。
(1)为构建重组载体,需先设计引物,通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是
(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后,与编码FLAG的序列形成一个融合基因,如图甲所示,其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后,融合基因转录出的mRNA序列正确,翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确,但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析,出现该问题的原因是
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(3)融合蛋白表达成功后,将FLAG-P、FLAG-P△、药物A和UBC按照图乙中的组合方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质,分离出与介质结合的物质并用UBC抗体检测,检测结果如图丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC,由①②③组结果的差异推测,药物A的作用是
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(4)根据以上结果推测,药物A治疗该病的机理可能是
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名校
解题方法
【推荐1】番茄是世界主要蔬菜之一,为严格的自花授粉作物,杂种优势能极大提高番茄的产量、抗病及抗逆表现,因此番茄生产基本上都是应用杂交种。
(1)科学家获得了位于4号染色体的ps-2基因隐性突变体,表现为雄性不育,在杂交育种时,选育雄性不育植株的优点是___________ 。
(2)番茄野生型为雄性可育,突变体甲和突变体乙均为雄性不育(均只有一对基因与野生型不同)。下表为3个不同番茄杂交组合及其子代的表型及比例。请回答下列问题:
根据杂交组合一和二可知,雄性可育性状是由_____ 性基因控制。根据杂交组合三,推测控制两个突变体的相关基因为______ (填“等位基因”或“非等位基因”)。
(3)若在雄性不育系大田中发现一株苗期绿茎隐性突变体。实验证明苗期紫茎和绿茎由一对等位基因控制,利用SSR技术可以进行基因在染色体上的定位,SSR是DNA中的简单重复序列,非同源染色体上的SSR、不同品种的同源染色体上的SSR不同,因此常用于染色体特异性标记。研究者将紫茎和绿茎杂交,F1自交后提取F2中苗期绿茎突变体50株单株的叶肉细胞DNA,利用4号染色体上特异的SSR(与ps-2基因紧密连锁的SSR标记)进行PCR扩增,实验证明苗期绿茎基因位于4号染色体上,请在下图1中画出PCR扩增、电泳后结果______________________ 。
(4)若科研人员选择纯种宽叶番茄与窄叶番茄杂交,F1全部为宽叶,F1自交,F2的性状比例为9:7.回答下列问题:
①若宽叶、窄叶由两对等位基因控制,则F2中出现宽叶和窄叶比例为9:7的原因是______ ,F2的窄叶有______ 种基因型,若F2的宽叶自花传粉,则子代中窄叶的比例为______ 。
②自然界中存在“自私基因”,即某一基因可以使同株的控制相对性状的另一基因的雄配子部分死亡,从而改变子代的性状表型的比例。若宽叶、窄叶由一对等位基因(A、a)控制,F2中出现出现宽叶和窄叶的比例为9:7是“自私基因”作用的结果,则此比例出现的原因是:F1中携带______ (填“A”或“a”)基因的雄配子,有______ 的比例死亡。
(5)我国科学家在番茄基因组中鉴定到154个在雄蕊中特异表达的基因,选取其中的一个基因SlSTR1作为靶标基因(T表示)。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对番茄的SlSTR1基因进行定向敲除获得雄性不育系(tt,绿色)。将正常功能的SlSTR1基因(T)和控制花青素合成的SlANT1基因(A表示)连锁在一起,共同转回到雄性不育系中,从而获得了紫色的转基因保持系(图2):关于图2所示转基因保持系制备过程及在农业生产的优点,下列说法正确的是 。
(1)科学家获得了位于4号染色体的ps-2基因隐性突变体,表现为雄性不育,在杂交育种时,选育雄性不育植株的优点是
(2)番茄野生型为雄性可育,突变体甲和突变体乙均为雄性不育(均只有一对基因与野生型不同)。下表为3个不同番茄杂交组合及其子代的表型及比例。请回答下列问题:
组合序号 | 后代的表型及比例 | |
一 | 野生型×突变体甲 | 全为雄性可育(杂种1) |
二 | 野生型×突变体乙 | 全为雄性可育(杂种2) |
三 | 杂种1×杂种2 | 全为雄性可育 |
(3)若在雄性不育系大田中发现一株苗期绿茎隐性突变体。实验证明苗期紫茎和绿茎由一对等位基因控制,利用SSR技术可以进行基因在染色体上的定位,SSR是DNA中的简单重复序列,非同源染色体上的SSR、不同品种的同源染色体上的SSR不同,因此常用于染色体特异性标记。研究者将紫茎和绿茎杂交,F1自交后提取F2中苗期绿茎突变体50株单株的叶肉细胞DNA,利用4号染色体上特异的SSR(与ps-2基因紧密连锁的SSR标记)进行PCR扩增,实验证明苗期绿茎基因位于4号染色体上,请在下图1中画出PCR扩增、电泳后结果
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(4)若科研人员选择纯种宽叶番茄与窄叶番茄杂交,F1全部为宽叶,F1自交,F2的性状比例为9:7.回答下列问题:
①若宽叶、窄叶由两对等位基因控制,则F2中出现宽叶和窄叶比例为9:7的原因是
②自然界中存在“自私基因”,即某一基因可以使同株的控制相对性状的另一基因的雄配子部分死亡,从而改变子代的性状表型的比例。若宽叶、窄叶由一对等位基因(A、a)控制,F2中出现出现宽叶和窄叶的比例为9:7是“自私基因”作用的结果,则此比例出现的原因是:F1中携带
(5)我国科学家在番茄基因组中鉴定到154个在雄蕊中特异表达的基因,选取其中的一个基因SlSTR1作为靶标基因(T表示)。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对番茄的SlSTR1基因进行定向敲除获得雄性不育系(tt,绿色)。将正常功能的SlSTR1基因(T)和控制花青素合成的SlANT1基因(A表示)连锁在一起,共同转回到雄性不育系中,从而获得了紫色的转基因保持系(图2):关于图2所示转基因保持系制备过程及在农业生产的优点,下列说法正确的是 。
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A.转基因保持系通过杂交可产生雄性不育系又可产生转基因品系 |
B.可通过幼苗颜色准确鉴定不育株用于杂交种子生产 |
C.该技术用于杂交制种的不育系并不含任何转基因成分 |
D.该研究策略易推广到其他蔬菜、花卉等园艺作物,具有广阔的应用前景 |
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(0.4)
【推荐2】干扰素是动物或人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白,具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤的作用。培育转干扰素基因马铃薯植株的大致流程如图所示。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/3/23/1908148154245120/1909916421898240/STEM/3ab1a7034a744ae0afbe7ecc20e9764e.png?resizew=546)
(1)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是________________ ,使用上述酶的优点是________________________ (答两点)。
(2)过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时,常用________ 处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞,最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的_________ 上。
(3)图中过程③和过程④合称为________ 技术,该技术能体现细胞的______ 。
(4)在分子水平上检测转基因是否成功包括三个方面:_________________
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(1)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是
(2)过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时,常用
(3)图中过程③和过程④合称为
(4)在分子水平上检测转基因是否成功包括三个方面:
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(0.4)
【推荐3】果胶甲酯酶具有催化水解果胶的作用,为获得高产、高纯度的胞外果胶甲酯酶,下图表示某科研小组设计的黑曲霉工程菌的构建和发酵流程图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/10/25/19dd08bb-5c85-40a3-8be6-5c21632113de.png?resizew=636)
回答下列问题:
(1)科研小组从基因数据库中获得果胶甲酯酶基因序列后,需要根据果胶甲酯酶基因设计_______________ ,以扩增出大量果胶甲酯酶基因片段。利用农杆菌进行转化,在构建重组基因表达载体时,应将果胶甲酯酶基因插入Ti质粒上的______________ 之间,确保侵染黑曲霉菌后能成功表达。为提高构建重组表达载体的成功率,在构建重组表达载体过程中加入缓冲液,其目的是______________ 。
(2)获得转基因的黑曲霉后,可以通过______________ 获得纯培养物,该过程需要______________ 作为对照。为判断高产果胶甲酯酶黑曲霉工程菌是否构建成功,可对单位量的转基因黑曲霉进行发酵产酶实验,即通过检测并比较转基因黑曲霉_______________ 。因黑曲霉自身某种蛋白质的物理和化学性质与果胶甲酯酶相似,造成提取产物纯度不高,可通过_______________ ,避免该蛋白产生,实现获得高纯度的果胶甲酯酶。
(3)获得的黑曲霉工程菌需先进行活化和______________ 培养后才能接种到发酵罐中进行大型发酵,以缩短发酵时间。发酵过程需保持______________ (至少写两点)、适宜pH、充足的氧气等条件,保证发酵过程不受杂菌污染和菌体能正常生长。
(4)发酵结束后将发酵液进行离心处理,取______________ 进行果胶甲酯酶的分离和纯化工作。在分离过程中使用一定浓度的硫酸铵处理发酵液后获得有活性的果胶甲酯酶沉淀物,原因是在一定浓度的硫酸铵条件下______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/10/25/19dd08bb-5c85-40a3-8be6-5c21632113de.png?resizew=636)
回答下列问题:
(1)科研小组从基因数据库中获得果胶甲酯酶基因序列后,需要根据果胶甲酯酶基因设计
(2)获得转基因的黑曲霉后,可以通过
(3)获得的黑曲霉工程菌需先进行活化和
(4)发酵结束后将发酵液进行离心处理,取
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