【推荐1】不对称PCR的基本原理是采用不等量的引物，产生大量的单链目标DNA。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50~1：100。在PCR反应的早期循环（约20次）中，扩增产物主要是双链DNA，当后期数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA，过程如图所示。下列相关叙述错误的是（       ）

A．PCR反应缓冲液中一般需添加Mg2+，以激活DNA聚合酶

B．复性时引物与模板链3'端的碱基序列通过互补配对结合

C．PCR进行最初20次循环的目的是增加模板DNA的量

D．不对称PCR产生的大量单链DNA是由限制性引物延伸而来

【推荐2】小鼠肿瘤转移抑制基因（kiss1基因）仅在特定组织中表达。在雌激素诱导下，细胞内信号转导系统可以与kiss1基因启动子的特定区域结合，激活kiss1基因的转录。研究者扩增了kiss1基因启动子不同长度的片段P₁、P₂、P₃和P₄，分别构建这些片段与绿色荧光蛋白基因（G）融合的载体，转入体外培养的特定细胞中，以确定不同片段的转录活性。下列说法错误的是（       ）
   

A．用PCR技术获取片段P1、P2、P3和P4所需的引物不完全相同

B．应选取有kiss1基因且能表达的小鼠细胞作为转化的受体细胞

C．绿色荧光较强的细胞中转入的片段具有较低的转录活性

D．对特定细胞进行体外培养时，培养液中应添加雌激素

【推荐3】通过引物设计，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变，如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是（       ）

A．限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的3’端

B．PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、Ca2+等

C．第2轮PCR中，引物1与图中②结合并形成两条链等长的突变基因

D．在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4