表皮生长因子受体（EGFR）是原癌基因表达的产物。EGFR 由胞外区、跨膜区、胞内区三部分组成， EGFR与其配体结合后能引起一系列基因活化，导致肿瘤细胞增殖。DNEGFR 基因是EGFR基因缺失了胞内区的突变基因，科研人员研究了DNEGFR基因表达和定位情况，流程如下图， 请回答：
   
(1)从人结肠癌组织中提取总RNA，经_________过程合成cDNA。根据人EGFR 前体cDNA的序列设计合成引物，扩增得到 DNEGFRcDNA，其表达产物因缺失胞内区而没有信号转导功能，但其能够与_________竞争结合配体，从而达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。
(2)RT-PCR 过程所用引物如下，据上图可知，构建重组质粒时使用的两种限制酶是_________。研究人员将DNEGFR 和y融合在一起的目的是_________。
   
(3)本实验将EGFP 序列融合在 DNEGFR序列的下游而不是上游，原因是若将 EGFP 序列放在上游， ______________。
①DNEGFR基因表达的前体蛋白的信号肽段不能发挥定位作用
②会影响配体与胞外区的结合
③会影响 EGFP 基因的表达
④会影响质粒的复制
(4)向感受态细菌悬浮液中加入重组质粒混匀。扩大培养后取菌液涂布于卡那霉素筛选LB平板上，37℃正向放置0.5h，正向放置0.5h的目的是_________，然后倒置平皿37℃培养12~16h。挑选菌落分别扩增、鉴定，待鉴定正确后大量提取质粒。
(5)将重组质粒pEGFP-N1-DNEGFR包裹到主要由_________构成的脂质体内，与动物细胞发生融合，重组质粒最终发生转化。72h后再利用光谱激光扫描共聚焦显微镜观测结果见下图A，检测表明融合蛋白成功锚定于_________，细胞质存在少量荧光的原因可能是_________。为了让结果更加严谨，设置B、C两组对照，推测 B组的处理方式是_________。