【推荐1】某二倍体植物是杂合子，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：

(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的_____________过程，②表示的是__________过程，X代表的是_______________，③表示的是_____________过程，④表示的是诱导_____________过程。
(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中______________的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为___________________植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有___________________。
(3)对植株进行_____________，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过___的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是____植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为_____________种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为____________种。花药培养在育种上的特殊意义是____________，从而开辟育种新途径。

【推荐2】细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答有关问题：
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。

材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)从经过免疫处理的小鼠体内分离的B淋巴细胞群能合成并分泌____________（填“一种”或“多种”）抗体。诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，采用的化学诱导试剂是____________。经特定的选择培养基培养筛选得到杂交瘤细胞，该细胞具有____________的特点，再进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，才能获得足够数量的能分泌____________的杂交瘤细胞。该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1mL细胞稀释液，其目的是____________。
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是________________________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低____________。
(3)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到____________阶段，然后从____________（填细胞器）中提取茶碱；经植物组织培养培育成植株的方式属于____________（填“有性生殖”或“无性生殖”）。

【推荐3】回答下列（一）（二）小题
（一）生物碱是玛卡（十字花科的一种植物）的有效成分之一。黑色玛卡被公认为效果最好的玛卡，产量极少，应用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：

请回答：
（1）选用黑色玛卡营养芽进行组织培养时，需先将材料在____ 的乙醇中浸泡10分钟，再用5%次氯酸钠溶液浸泡以达到____ 的目的。
（2）将原球茎置于 ____（A．LB培养基   B．MS培养基+NAA/6-BA=1：10   C．MS培养基+NAA/6-BA=10：1   D．MS培养基+NAA/6-BA=1：1)上可长成丛状苗。经过炼苗的幼苗移栽到实验室外前需要洗苗，目的是洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，洗苗时用____ （自来水、无菌水）。
（3）由于玛卡在生长过程中需要吸收土壤中大量的有机养分，因而每耕种过一季的土地，必须休耕 6到 7年，否则难以生长出好的玛卡来，这属于农业生产上的_____技术。
（二）浙江省部分村镇的农民率先建起了以沼气池为中心的生态工程。如图是某同学绘制的一个庭院生态工程示意图，分析并回答下列问题：

（1）农业主要包括 ____，是人类食物生产系统的两大支柱。庭院生态工程_____（属于、不属于）农业生态工程。
（2）该生态系统中的生产者是 ____，构建这种以沼气池为中心的生态模式时所依据的最主要的生态学原理是_____。
（3）生态农业是一个在生态上能自我维持的农业生产系统，其特点是在保持和改善系统内的生态平衡、不对其周围环境造成大的影响的情况下，求得最大生产力和可持续发展。下列关于生态农业的叙述不正确的是_____。
A．生态农业中食物链的各营养级之间的能量传递效率大大提高了
B．生态农业比传统农业的自我调节能力强
C．生态农业设计时需要考虑社会效益、经济效益和生态效益
D．生态农业属于人工生态系统，对病虫害一般采用生物防治的方法

【推荐1】非细胞合成技术是一种运用合成生物学方法，在细胞外构建多酶催化体系，获得目标产物的新技术，其核心是各种酶基因的挖掘、表达等。中国科学家设计了4步酶促反应的非细胞合成路线（如图），可直接用淀粉生产肌醇（重要的医药食品原料），以期解决高温强酸水解方法造成的严重污染问题，并可以提高产率。

回答下列问题：
(1)研究人员采用PCR技术从土壤微生物基因组中扩增得到目标酶基因。此外，获得酶基因的方法还有_______。（答出两种即可）
(2)高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一。在制备高质量DNA模板时必须除去蛋白，方法有________。（答出一种即可）
(3)研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细胞、pET20b为表达载体分别进行4种酶的表达。表达载体转化大肠杆菌时，首先应制备_______细胞。为了检测目的基因是否成功表达出酶蛋白，需要采用的方法有_______。

【推荐2】微生物农药是指以细菌、真菌、病毒和原生动物或经基因修饰的微生物活体为有效成分，防治病、虫、草、鼠等有害生物的生物源农药。研究发现，萝卜抗真菌蛋白（Rs-AFPs）由Rs-AFP2基因序列控制合成，是一类富含半胱氨酸的碱性蛋白质，具有抗丝状真菌活性，是天然免疫体系中的重要效应分子。萝卜抗真菌蛋白能够保护种子的正常萌发以及保护植物组织免受病原菌的危害而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达Rs-AFPs的转基因大肠杆菌作为微生物农药，相关研究如下。

(1)科学家用________________处理RS_AFP2基因和质粒以获得重组质粒，再将重组质粒置于________________处理的大肠杆菌细胞悬液中，该处理的作用是__________________________。
(2)检测发现，转入的RS_AFP2基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低。研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与RS_AFP2基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基）如图1所示，并按如图2方式依次进行4次PCR扩增，已得到新的RS_AFP2基因。这种定点的基因突变技术在图2所示的4次PCR应该分别如何选择下表所示的引物？请填写一下表格（若选用该引物画“Ο”，若不选用该引物则不做标记）。

	引物A	引物B	引物C	引物D
PCR1
PCR2
PCR4

(3)研究者进一步将含有新的RS_AFP2基因的重组质粒和含有RS_AFP2基因的重组质粒以及_____________分别导入大肠杆菌。提取培养液中的蛋白质，用____________方法检测并对结果进行比较，从而判断新的RS_AFP2基因表达效率是否提高；为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表的产物加入长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_____________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。以上两种方法是从______________水平上对转基因大肠杆菌进行检测和鉴定。
(4)作为微生物农药，与使用传统的化学农药相比，其优点是_____________________。

【推荐3】下图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒PO具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：
   
(1)EcoRV酶切位点为   EcoRV酶切出来的线性载体P1含__________末端。
(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸，载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为__________的脱氧核苷酸形成P2，P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重组质粒P3。PCR技术中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是__________。
(3)PCR技术可以临床用于诊断感染性疾病、肿瘤及遗传病等，它是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，其标准步骤为____________、退火、__________。
(4)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了___________________。若该目的基因是从cDNA文库中分离获取的蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，然后在__________为唯一含碳营养物质的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
(5)为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“-”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是__________类，另外两类菌落质粒导入情况分别是___________、___________。

菌落类型平板类型	A	B	C
无抗生素	+	+	+
氨苄青霉素	+	+	-
四环素	+	-	-
氨苄青霉素+四环素	+	-	-

(6)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。下图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是___________，某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是___________。
   

【推荐2】科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子LX医用蛋白，其技术路线如下图。

(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达，在构建基因表达载体A时，需要将目的基因和_______________等调控组件重组在一起。 将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是____。
(2)核移植的受体应选用处于________期的卵母细胞。
(3)移植应选择胚胎发育到______阶段时进行；胚胎移入受体子宫的生理学基础是________________

【推荐3】嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB酶）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下实验：
I．利用大肠杆菌表达BgIB酶
(1)PCR扩增bglB基因时，选用___________________的基因组DNA作模板。
(2)如图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶的识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入限制酶_________________的识别序列。

   
(3)先用Ca²⁺处理大肠杆菌后再将上述构建好的表达载体与之混合，原因是：_________________。请提出在个体生物学水平筛选出重组大肠杆菌的简要实验思路及依据：________________________________。
Ⅱ．温度对BgIB酶活性的影响
(4)温度会影响BglB酶活性及其稳定性，从而影响其对纤维素的分解效率，该实验为实际生产应用中对反应温度的控制提供理论依据。综合分析图1，2实验结果，可得出实验结论：____________________________。

      
注：酶的热稳定性是酶在一定温度下，保温一段时间后通过其活性的保持程度来反映的。
Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
(5)在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽孢杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中______________________（写出一点即可）。

【推荐1】下图为培育转基因抗虫棉的两种思路，请据图回答问题：

（1）与思路2相比，思路1的优点是筛选出的目的植株_____________。
（2）构建重组质粒时，需要使用的限制酶是_____________，还需要使用的工具酶是_____________。
（3）图中过程①获取的完整的重组质粒，除了图中标出的特殊DNA片段外，还应该有_____________等部分；过程②常用的方法是_____________；过程③常用的试剂为_____________；培育获取棉株2 或棉株4采用的生物学技术是_____________。
（4）为检测棉株3、棉株4的抗虫特性，常使用的方法是_____________。

【推荐2】某科学工作者首先从真核细胞细胞质的多聚核糖体中获得mRNA，再将获得的mRNA与单链DNA分子杂交，从而分离获得目的基因。该方法的操作过程如图所示，请回答下列相关问题：

（1）图中加热处理的目的是获得______________________。
（2）一个mRNA分子上可以相继结合多个核糖体（即多聚核糖体的存在），其意义是____________。
（3）mRNA与单链DNA分子杂交的原理是____________；分子杂交形成游离的凸环3、5、7的原因之一是DNA中含有____________，这些非编码DNA片段被转录后在mRNA加工过程中会被剪切掉。与DNA复制相比，DNA与mRNA分子杂交特有的碱基配对类型是____________。

【推荐3】下图1是可作为基因载体的质粒，图2是含有目的基因的外源DNA。

（1）若将图1中质粒和图2中含目的基因的外源DNA通过限制酶处理后进行拼接形成重组质粒，那么最好应选用___________限制酶。对符合设计要求的重组质粒用 SmaⅠ EcoRⅠ和HindⅢ三种酶同时进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，则可得到___________种DNA片段
（2）若选用EcoRⅠ处理后，形成重组质粒，经检测，部分含有重组质粒的受体细胞中目的基因不能正确表达，其最可能的原因是______________________。
（3）试管婴儿技术为许多不孕夫妇解决了不育问题，而设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准证书，以防该技术的滥用。设计试管婴儿所引发的伦理问题主要是将此技术用于设计婴儿性别及________。一般我们所说的试管婴儿技术与设计试管婴儿相比，不必经过___________这一步骤。
（4）人类要实现可持续发展，必走生态经济之路，生态经济所遵循的主要原则和实现的重要手段分别是___________和___________。在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧材以及收入等问题，其体现了生态工程的基本原理是_______（只填一个）。