肌营养不良症(MD)多由单基因突变引起,表现为进行性肌肉退化和萎缩。SGCA基因编码区157位G突变为A(c.157G>A)会导致MD。研究人员在体外将腺嘌呤碱基编辑蛋白(ABE)mRNA和sgRNA一起导入患者肌肉干细胞(MuSCs),可以将突变纠正过来。ABE包含两部分(Cas9和ABE脱氨酶),Cas9与sgRNA结合,找到基因组上编辑的位置,ABE脱氨酶将区域Ⅱ的碱基进行编辑,如图1所示。
(1)图1方框Ⅰ中,sgRNA的序列为___________ 。
(2)ABE mRNA和sgRNA需要在体外转录合成,需要___________ 。(编号选填)
①RNA聚合酶 ②RNA复制酶 ③NTP ④模板 ⑤引物
(3)研究人员使用细胞核转染的方法,将ABE mRNA和sgRNA高效地输送到MuSCs的细胞核中。以下说法正确的是 。
(4)关于MuSCs以下说法错误的是 。
图1方框Ⅱ中箭头所示的位置为c.157G>A,图2为患者体外培养的MuSCs SGCA基因编辑后的基因检测结果。
(5)SGCA基因检测需要先进行PCR,引物在___________ (变性/退火/聚合)步骤与单链DNA模板结合。
(6)研究人员认为,直接将这些基因编辑后的MuSCs移植到患者的体内不能达到最佳治疗效果。根据图2信息分析原因,并提出改进措施。___________________ 。
(1)图1方框Ⅰ中,sgRNA的序列为
(2)ABE mRNA和sgRNA需要在体外转录合成,需要
①RNA聚合酶 ②RNA复制酶 ③NTP ④模板 ⑤引物
(3)研究人员使用细胞核转染的方法,将ABE mRNA和sgRNA高效地输送到MuSCs的细胞核中。以下说法正确的是 。
A.sgRNA可以翻译出多肽起作用 |
B.ABE蛋白和sgRNA在细胞核中发挥作用 |
C.ABE mRNA可以直接在细胞核中翻译 |
D.细胞质膜可能在核转染过程出现瞬时小孔 |
(4)关于MuSCs以下说法错误的是 。
A.MuSCs属于成体干细胞 |
B.MuSCs可以增殖分化为肌肉细胞 |
C.MuSCs与神经干细胞表达基因完全不同 |
D.MuSCs体外培养需要适宜的培养条件 |
图1方框Ⅱ中箭头所示的位置为c.157G>A,图2为患者体外培养的MuSCs SGCA基因编辑后的基因检测结果。
(5)SGCA基因检测需要先进行PCR,引物在
(6)研究人员认为,直接将这些基因编辑后的MuSCs移植到患者的体内不能达到最佳治疗效果。根据图2信息分析原因,并提出改进措施。
更新时间:2024-01-16 20:14:36
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【推荐1】阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,是老年性痴呆的最常见类型。近年研究认为β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积会诱发细胞凋亡炎症反应,使细胞内钙稳态失衡等,并对神经元造成损伤。下图表示Aβ沉积诱发神经小胶质细胞(MC细胞)产生炎症反应的可能机制。请回答下列问题:
(1)上图中,Aβ沉积使K酶和IK依次磷酸化,引起NF与_________ 分离;NF进入细胞核后,可调控______ 。
(2)合成IL-1 mRNA时所需的酶是_____________________ ;IL-1在细胞质中的____________ 上合成后分泌到细胞外诱发炎症反应,导致神经系统功能障碍。
(3)为验证图中所示机制,研究者用体外培养的MC细胞进行了如下实验:将经AB处理过的MC细胞进行破裂处理,再进行差速离心,分离出细胞核,测定细胞核和细胞质中NF的量。与处理前的细胞相比,若经过处理的细胞细胞核中的NF量明显增加,细胞质中的NF量减少,则该结果为图中的________________________ (填图中序号)过程提供了实验证据。
(1)上图中,Aβ沉积使K酶和IK依次磷酸化,引起NF与
(2)合成IL-1 mRNA时所需的酶是
(3)为验证图中所示机制,研究者用体外培养的MC细胞进行了如下实验:将经AB处理过的MC细胞进行破裂处理,再进行差速离心,分离出细胞核,测定细胞核和细胞质中NF的量。与处理前的细胞相比,若经过处理的细胞细胞核中的NF量明显增加,细胞质中的NF量减少,则该结果为图中的
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【推荐2】下图为人染色体上DNA复制过程模式图,请根据图示过程,回答问题:
(1)酶A是__________ 酶,控制该酶合成的基因在一个细胞周期中复制____________ (选填“只能一次”或“可以多次”),转录___________ (选填“只能一次”或 “可以多次”)。
(2)酶B发挥作用__________ (选填“需要”或“不需要”)ATP。两条子链向________ (选填“3”或“5”)端方向延长。
(3)乙丙在减数第二次分裂后期,某个位点上出现了等位基因,原因是______________ 。
(4)用32P充分标记人的体细胞(染色体 46 条)的DNA,放入不含32P的培养基中培养。经过两次有丝分裂后,一个子细胞中含32P的染色体数目是____________ 。
(5)如果精原细胞的某基因一条链上碱基A替换为碱基G,由该精原细胞产生的4个精子中,含该突变基因的精子有_________ 个。
(1)酶A是
(2)酶B发挥作用
(3)乙丙在减数第二次分裂后期,某个位点上出现了等位基因,原因是
(4)用32P充分标记人的体细胞(染色体 46 条)的DNA,放入不含32P的培养基中培养。经过两次有丝分裂后,一个子细胞中含32P的染色体数目是
(5)如果精原细胞的某基因一条链上碱基A替换为碱基G,由该精原细胞产生的4个精子中,含该突变基因的精子有
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【推荐3】下图表示某DNA片段的遗传信息的传递过程,①~⑦表示物质或结构,a、b、c表示生理过程,据图回答下列问题:
(1)图中表示DNA复制的过程是________ (填字母),图中表示基因表达的过程是________ (填字母)。其中a、b过程在人体细胞中既可以发生在细胞核,也可以发生在_______________________ (填细胞结构)中。
(2)为研究a过程的物质合成情况,常使用3H-TdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)这一化合物,原因是:_____________________________________________________________________________ 。
(3)在b过程中,与DNA结合的酶是_______________________ 。已知该过程形成的RNA的模板链和非模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤分别占29%、19%,则与该RNA对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为_______________________ 。
(4)c过程通过______________________________________________ 与mRNA上的密码子识别,将氨基酸转移到肽链上。在人体的成熟红细胞、胰岛细胞、癌细胞中,能发生b、c过程但不能发生a过程的细胞有_______________________________________ 。
(5)若图中①所示为某个精原细胞中的一对同源染色体上的DNA(DNA两条链中N分别为15N和14N),将该细胞放在含有14N的培养基中连续进行两次有丝分裂,形成的4个细胞中含有15N的细胞个数可能是_______________________________ 。
(6)镰刀型细胞贫血症体现了基因控制性状的途径是:基因通过控制_____________________ 进而控制生物体的性状。
(7)油菜的中间代谢产物磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)运输到种子后有两条转变途径,如图所示。科研人员根据这一机制培育出的高油油菜,产油率由原来的35%提高到了58%。分析图可知,油菜含油量提高的原因是_______________ 的形成抑制了酶b合成过程中_______________ 的阶段。
(8)若下图是某植物花色由三对独立遗传的基因共同决定花中相关色素的合成途径,其体现了基因对生物体的性状的控制途径为:基因通过控制_________________________________ 进而控制生物体的性状。当基因型为AaBbDd的植株自交,理论上子代中紫花植株所占比例为________ ,子代紫花植株的基因型有________ 种。
(1)图中表示DNA复制的过程是
(2)为研究a过程的物质合成情况,常使用3H-TdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)这一化合物,原因是:
(3)在b过程中,与DNA结合的酶是
(4)c过程通过
(5)若图中①所示为某个精原细胞中的一对同源染色体上的DNA(DNA两条链中N分别为15N和14N),将该细胞放在含有14N的培养基中连续进行两次有丝分裂,形成的4个细胞中含有15N的细胞个数可能是
(6)镰刀型细胞贫血症体现了基因控制性状的途径是:基因通过控制
(7)油菜的中间代谢产物磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)运输到种子后有两条转变途径,如图所示。科研人员根据这一机制培育出的高油油菜,产油率由原来的35%提高到了58%。分析图可知,油菜含油量提高的原因是
(8)若下图是某植物花色由三对独立遗传的基因共同决定花中相关色素的合成途径,其体现了基因对生物体的性状的控制途径为:基因通过控制
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【推荐1】阅读下列材料,完成下面小题
材料:链霉素、卡那霉素、庆大霉素等都属于氨基糖苷类抗生素。细菌和多数线粒体的核糖体沉降系数为70S,可解离为50S和30S亚基,而真核细胞细胞所核糖体沉降系数为80S,可解离为60S和40S亚基。氨基糖苷类抗生素通过诱导细菌合成错误蛋白质或无法合成蛋白质等;导致细菌死亡。氨基糖苷类抗生素的杀菌机制主要有三种(如下图所示):①抑制30S核糖体亚基的组装;②抑制tRNA的5’端成熟,导致tRNA无法与mRNA结合;③导致非互补配对的tRNA也能够结合于mRNA上。链霉素、卡那霉素、庆大霉素等既可用于临床上细菌感染的治疗,也广泛应用于基因工程中微生物的选择培养。
1.结合上述材料回答以下问题:
(1)核糖体的组成成分为_____ ,真核细胞的细胞核内与核糖体形成有关的结构是_____ 。
(2)氨基糖苷类抗生素对新冠病毒不起作用的原因是_____ 。
(3)氨基糖苷类抗生素的三种杀菌机制中,能导致细菌无法合成蛋白质的有_____ 。
(4)非互补配对的tRNA也能够结合于mRNA上。请分析其对蛋白质结构与功能可能产生的影响_____ 。
2.质粒是基因工程中广泛使用的载体,为获得适宜的质粒,对大肠杆菌的质粒A和质粒B进行改造。下图为质粒A和质粒B的示意图,其中EcoR1和BamH1为限制酶识别部位;ori为复制原点;npt表示卡那霉素抗性基因,str表示链霉素抗性基因;gfp表示绿色荧光蛋白基因(质粒B中不含其启动子),其产物在紫外线照射下可发出绿色荧光;Pl是含有受乳糖诱导表达启动子的序列;P2是通用启动子序列。
(l)质粒中启动于的作用是_____ 。
(2)质粒B作为载体时可直接作为标记基因的是_____ 。
(3)已知三个或三个以上DNA片段发生连接的几率很小,可忽略;两个或两个以上质粒难以同时进入大肠杆菌;含有两个或两个以上ori的质粒无法在大肠杆菌内复制。为获得可发绿色荧光的大肠杆菌。进行以下操作:
①将含质粒A和质粒B的混合溶液中加入限制酶_____ ,充分反应后加入DNA连接酶,再将产物导入大肠杆菌;
②将这些大肠杆菌涂布在含有_____ 的固体培养基上在适宜条件下培养24h,能淘汰掉部分不含绿色荧光蛋白基因的大肠杆菌菌落;
③含有目标质粒的大肠杆菌需要在培养基中加入_____ 能在紫外线照射下发出绿色荧光。
材料:链霉素、卡那霉素、庆大霉素等都属于氨基糖苷类抗生素。细菌和多数线粒体的核糖体沉降系数为70S,可解离为50S和30S亚基,而真核细胞细胞所核糖体沉降系数为80S,可解离为60S和40S亚基。氨基糖苷类抗生素通过诱导细菌合成错误蛋白质或无法合成蛋白质等;导致细菌死亡。氨基糖苷类抗生素的杀菌机制主要有三种(如下图所示):①抑制30S核糖体亚基的组装;②抑制tRNA的5’端成熟,导致tRNA无法与mRNA结合;③导致非互补配对的tRNA也能够结合于mRNA上。链霉素、卡那霉素、庆大霉素等既可用于临床上细菌感染的治疗,也广泛应用于基因工程中微生物的选择培养。
1.结合上述材料回答以下问题:
(1)核糖体的组成成分为
(2)氨基糖苷类抗生素对新冠病毒不起作用的原因是
(3)氨基糖苷类抗生素的三种杀菌机制中,能导致细菌无法合成蛋白质的有
(4)非互补配对的tRNA也能够结合于mRNA上。请分析其对蛋白质结构与功能可能产生的影响
2.质粒是基因工程中广泛使用的载体,为获得适宜的质粒,对大肠杆菌的质粒A和质粒B进行改造。下图为质粒A和质粒B的示意图,其中EcoR1和BamH1为限制酶识别部位;ori为复制原点;npt表示卡那霉素抗性基因,str表示链霉素抗性基因;gfp表示绿色荧光蛋白基因(质粒B中不含其启动子),其产物在紫外线照射下可发出绿色荧光;Pl是含有受乳糖诱导表达启动子的序列;P2是通用启动子序列。
(l)质粒中启动于的作用是
(2)质粒B作为载体时可直接作为标记基因的是
(3)已知三个或三个以上DNA片段发生连接的几率很小,可忽略;两个或两个以上质粒难以同时进入大肠杆菌;含有两个或两个以上ori的质粒无法在大肠杆菌内复制。为获得可发绿色荧光的大肠杆菌。进行以下操作:
①将含质粒A和质粒B的混合溶液中加入限制酶
②将这些大肠杆菌涂布在含有
③含有目标质粒的大肠杆菌需要在培养基中加入
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【推荐2】生殖障碍:TUB基因突变可导致女性不育。甲家族系谱图(图1)及部分成员的TUB基因编码链(蛋白质编码区域)检测结果如图2.(1)据图1分析,可判断甲家族女性不育病的遗传方式是______ (常/X/Y)染色体上的______ (显/隐)性遗传病。
(2)若用A/a表示TUB基因,则图1中Ⅱ-3号个体的基因型为______ 。
(3)结合图2信息分析,III-1能正常生育的概率为______ 。
(4)已知TUB基因仅在女性生殖细胞内表达。图1中II-3和II-4欲再生一个具备生育能力的孩子,下列建议合理的是______ 。(编号选填)①对Ⅱ-3进行基因检测②怀孕后对胎儿进行基因检测③怀孕后对胎儿进行性别鉴定④怀孕后对胎儿进行染色体数目检查
(5)图1中Ⅲ-1患有红绿色盲,其他家族成员色觉均正常,Ⅲ-1的红绿色盲致病基因可能来自______。(多选)
(6)若III-1能正常生育但基因测序显示其携带有TUB突变基因,则其体内TUB突变基因和红绿色盲基因在细胞分裂过程中一定会______ 。(编号选填)①同时出现在卵细胞中②同时出现在体细胞中③分别在不同的卵细胞中④分别在不同的体细胞中
(7)据图2判断,TUB基因突变前后,突变位点对应的氨基酸由______ 变为______ 。(GGU甘氨酸;GUG缬氨酸;GCG丙氨酸;UGU半胱氨酸;CGU精氨酸)
(8)为研究TUB蛋白的作用机制,研究人员将TUB突变基因的mRNA注射到小鼠卵母细胞内表达,测定第一极体分离率,结果如图3.据图分析实验组和对照组的差异及其原因,合理的是______。(多选)
(9)研究发现TUB基因存在多种形式的突变,经逐代传递,突变基因在人群中频率很低却始终存在,对上述现象的合理解释是______ 。
(2)若用A/a表示TUB基因,则图1中Ⅱ-3号个体的基因型为
(3)结合图2信息分析,III-1能正常生育的概率为
(4)已知TUB基因仅在女性生殖细胞内表达。图1中II-3和II-4欲再生一个具备生育能力的孩子,下列建议合理的是
(5)图1中Ⅲ-1患有红绿色盲,其他家族成员色觉均正常,Ⅲ-1的红绿色盲致病基因可能来自______。(多选)
A.I-1经过II-3传递 |
B.I-2经过Ⅱ-3传递 |
C.Ⅱ-4生殖细胞发生突变 |
D.III-1自身细胞发生突变 |
(6)若III-1能正常生育但基因测序显示其携带有TUB突变基因,则其体内TUB突变基因和红绿色盲基因在细胞分裂过程中一定会
(7)据图2判断,TUB基因突变前后,突变位点对应的氨基酸由
(8)为研究TUB蛋白的作用机制,研究人员将TUB突变基因的mRNA注射到小鼠卵母细胞内表达,测定第一极体分离率,结果如图3.据图分析实验组和对照组的差异及其原因,合理的是______。(多选)
A.TUB蛋白可能影响DNA复制 |
B.TUB蛋白可能影响纺锤体组装 |
C.TUB蛋白延迟了第一极体出现的时间 |
D.TUB蛋白降低了生成第一极体的卵母细胞占比 |
(9)研究发现TUB基因存在多种形式的突变,经逐代传递,突变基因在人群中频率很低却始终存在,对上述现象的合理解释是
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【推荐3】有关遗传物质分子的研究中,常用32P来标记DNA和RNA分子。用α、β、γ表示ATP或dATP(d表示脱氧)上三个磷酸基团所处的位置(A—Pα~Pβ~Pγ或dA—Pα~Pβ~Pγ)。回答下列问题;
(1)_______ 分子的 _________ 位磷酸基团脱离,剩余部分可作为基因转录的原料,转录过程所需要的酶是 ____________________ 。
(2)dATP的A由__________ 组成。
(3)若用带有32P标记的dATP作为DNA生物合成的原料,将32P标记到新合成的DNA分子上,则带有32P的磷酸基团应在dATP的_________ (填“α”“β”或“γ”)位上。
(4)DNA分子经过诱变,某位点上的一个正常碱基(设为P)变成了尿嘧啶。该DNA连续复制两次,得到的4个子代DNA分子相应位点上的碱基对分别为U—A、A—T、G—C、C—G。推测“P”可能是__________________________________ 。
(1)
(2)dATP的A由
(3)若用带有32P标记的dATP作为DNA生物合成的原料,将32P标记到新合成的DNA分子上,则带有32P的磷酸基团应在dATP的
(4)DNA分子经过诱变,某位点上的一个正常碱基(设为P)变成了尿嘧啶。该DNA连续复制两次,得到的4个子代DNA分子相应位点上的碱基对分别为U—A、A—T、G—C、C—G。推测“P”可能是
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【推荐1】现有假单胞菌减毒活疫苗(Pp)和敲除了M基因的缺陷型假单胞菌减毒活疫苗(Pp-m),Pp只能预防白点病,研究者欲将外源抗原基因导入到Pp中表达,以构建能预防多种疾病的多联疫苗。已知含抗性基因的质粒存在安全性风险,现为获得无抗性基因但可通过其他方式达到筛选目的的质粒,并让该质粒携带抗原基因从而实现对多联疫苗的研制。(1)图中是操作中使用的PBBR1质粒(kan⁺为卡那霉素抗性基因,该质粒上只有BamHI和SacⅠ限制酶识别位点)和M基因(M基因为假单胞菌在不含氨基酸的普通培养基上合成谷氨酸的必需基因),其中P1-P8为设计的引物;利用PCR技术扩增M基因,应选择____ 引物,利用PCR技术扩增不含卡那霉素抗性基因的PBBR1质粒并使其线性化时应选用____ 引物。
(2)图中右下方为供选择使用的限制酶及识别序列(箭头为限制酶的切割位点)。由于PBBR1质粒和M基因两端都没有相同的限制酶识别序列,应在设计上述两对引物时增加两种不同的限制酶识别序列,可选择____ 识别序列分别加在引物的5’端。
(3)利用上述PCR产物经相同的两种限制酶酶切和连接,将连接产物导入____ (填Pp或Pp-m)中,将转化产物接种在____ 培养基上,挑选出能在培养基上生长的单菌落。
(4)提取上述菌落中的质粒,为防止抗原基因与质粒的反向连接,利用____ 限制酶处理质粒和抗原基因,将构建的重组质粒导入假单胞菌中以生产多联疫苗。
(2)图中右下方为供选择使用的限制酶及识别序列(箭头为限制酶的切割位点)。由于PBBR1质粒和M基因两端都没有相同的限制酶识别序列,应在设计上述两对引物时增加两种不同的限制酶识别序列,可选择
(3)利用上述PCR产物经相同的两种限制酶酶切和连接,将连接产物导入
(4)提取上述菌落中的质粒,为防止抗原基因与质粒的反向连接,利用
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【推荐2】酵母菌絮凝是指菌体细胞间通过细胞壁相互粘附、聚集成团的现象。适当提高酵母的絮凝能力,有助于发酵后细胞和产物的分离,节约生产成本。科研人员为研究R基因对酵母菌絮凝性能的影响,用基因工程技术获得了R基因被敲除的酵母菌菌株,主要步骤如图1(G418为一种氨基糖苷类抗生素)。请据图回答下列问题。
(1)过程①中,引物2和引物4分别添加了MluⅠ的识别序列,则引物1和引物3的5'端分别添加_____________ 的识别序列,PCR获取R基因左右两端的N和C片段过程中,除了图中条件外,还需提供_____________ 等条件(至少写三个)。
(2)过程②所需的工具酶有_____________ 。过程③将构建的重组质粒用_____________ 酶将其线性化后转化进受体酵母菌。
(3)利用含_____________ 的培养基筛选出重组酵母,再挑取单菌落进行PCR扩增,验证酵母细胞R基因是否被敲除,则扩增时选择引物组合是_____________ 。
(4)科研人员继续将野生酵母菌和R基因敲除酵母菌的菌液接种到装有麦芽汁的锥形瓶中,一定条件下静置发酵7天,测定酒精发酵能力和絮凝能力,结果如下表。
①酒精发酵期间,每个锥形瓶应注意保持_____________ 条件和定期排气。
②实验结果表明,R基因敲除酵母菌是否符合生产需求?请说出你的判断依据。_____________ 。
(5)科研人员进一步研究R基因影响絮凝能力的作用机制。
①将R基因敲除酵母菌和野生酵母菌分别用无菌水进行梯度稀释,再将不同浓度梯度的酵母菌液点样于含30g/mL钙荧光白(细胞壁抑制剂,破坏细胞壁的正常组装)的YPD培养基上,培养基中除了必需营养物质外还需添加_____________ ,培养适当时间后结果如图2。
(注:YPD培养基—酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基)
②综合上述实验结果,推测R基因敲除酵母菌絮凝能力变化的原因是_____________ 。
(1)过程①中,引物2和引物4分别添加了MluⅠ的识别序列,则引物1和引物3的5'端分别添加
(2)过程②所需的工具酶有
(3)利用含
(4)科研人员继续将野生酵母菌和R基因敲除酵母菌的菌液接种到装有麦芽汁的锥形瓶中,一定条件下静置发酵7天,测定酒精发酵能力和絮凝能力,结果如下表。
指标 种类 | 酒精发酵能力 | 絮凝能力 |
野生酵母菌 | 4.5% | 63.1% |
R基因敲除酵母菌 | 4.5% | 83.1% |
①酒精发酵期间,每个锥形瓶应注意保持
②实验结果表明,R基因敲除酵母菌是否符合生产需求?请说出你的判断依据。
(5)科研人员进一步研究R基因影响絮凝能力的作用机制。
①将R基因敲除酵母菌和野生酵母菌分别用无菌水进行梯度稀释,再将不同浓度梯度的酵母菌液点样于含30g/mL钙荧光白(细胞壁抑制剂,破坏细胞壁的正常组装)的YPD培养基上,培养基中除了必需营养物质外还需添加
(注:YPD培养基—酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基)
②综合上述实验结果,推测R基因敲除酵母菌絮凝能力变化的原因是
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(0.4)
【推荐3】维生素A在体内转化为11-顺式视黄醛后,与视网膜特定细胞中的视蛋白结合成视紫红质。视紫红质接受光信号后,11-顺式视黄醛转变为全反式视黄醛,视紫红质构象发生变化,激活细胞内的信号通路,最终产生视觉。全反式视黄醛与视蛋白脱离,经复杂的转运和酶促反应,再度转变为11-顺式视黄醛而被重复利用。最新研究表明,一种G蛋白偶联受体RGR可能参与了视觉产生的某些过程。为研究RGR的作用机理,某研究小组利用基因工程培育出含RGR反义基因(反义基因是通过原基因反向连接在载体的启动子和终止子之间,其转录出的mRNA与原基因转录出的mRNA互补配对)的转基因小鼠(rgr),研究该基因的功能。回答下列问题:
(1)为构建RGR反义基因重组载体,需先设计引物,通过PCR技术特异性扩增RGR反义基因。为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,即在引物A的___________ (填“3′端”或“5′端”)添加___________ 限制酶识别序列,在引物B添加___________ 限制酶识别序列。
(2)培养转基因小鼠过程中,将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是___________ ,常用的受体细胞是___________ ,选择培养基中除有动物细胞培养的必需成分,还需要添加___________ 起筛选作用。
(3)研究人员将正常小鼠(WT)和转基因小鼠(rgr)都平均分成两组,一组在黑暗中饲养12h,另一组在光照下饲养12h;随后测定小鼠眼睛中11-顺式视黄醛、全反式视黄醛和视紫红质的含量,结果如图所示。
据图分析,光照条件下RGR的作用机理可能是__________________ 。
(1)为构建RGR反义基因重组载体,需先设计引物,通过PCR技术特异性扩增RGR反义基因。为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,即在引物A的
(2)培养转基因小鼠过程中,将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是
(3)研究人员将正常小鼠(WT)和转基因小鼠(rgr)都平均分成两组,一组在黑暗中饲养12h,另一组在光照下饲养12h;随后测定小鼠眼睛中11-顺式视黄醛、全反式视黄醛和视紫红质的含量,结果如图所示。
据图分析,光照条件下RGR的作用机理可能是
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【推荐1】分娩是多种因素相互协调促成的过程。下图表示胎儿发动分娩的部分调节过程,其中A、B、C表示细胞。
(1)据图分析,胎儿的B细胞分泌的物质是__________ 。
(2)分娩过程中,催产素可使子宫收缩,而子宫收缩和胎儿外推刺激又进一步加强催产素分泌。这种调节方式为__________ (正反馈/负反馈)。
(3)胎盘干细胞是新生儿降生时通过胎盘组织采集获得的干细胞,胎盘干细胞可定向分化为胰岛B细胞治疗1型糖尿病。下列有关原理的说法不恰当 的是_______。(多选)
催产素可直接作用于子宫平滑肌,加强子宫收缩。图2示意相关机制。
(4)下列关于图2的分析正确的是__________。 (多选)
(5)结合图1和图2描述催产素引发的分娩过程__________ 。
(1)据图分析,胎儿的B细胞分泌的物质是
(2)分娩过程中,催产素可使子宫收缩,而子宫收缩和胎儿外推刺激又进一步加强催产素分泌。这种调节方式为
(3)胎盘干细胞是新生儿降生时通过胎盘组织采集获得的干细胞,胎盘干细胞可定向分化为胰岛B细胞治疗1型糖尿病。下列有关原理的说法
A.胎盘干细胞具有胰岛素mRNA | B.胎盘干细胞可分泌出胰岛素 |
C.胎盘干细胞可大量吸收葡萄糖 | D.胎盘干细胞可分化成胰岛A细胞 |
催产素可直接作用于子宫平滑肌,加强子宫收缩。图2示意相关机制。
(4)下列关于图2的分析正确的是__________。 (多选)
A.OTR能与催产素特异性结合 | B.肌肉收缩使细胞内积累Ca2+ |
C.Ca2+流入细胞内会引发膜电位变化 | D.催产素可促进生成DAG |
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【推荐2】回答下列(一)、(二)小题:
(一)下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答:
(1)过程①和②必需用到的酶有____________ 、______________ 。
(2)重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有_____________ 才能构成一个完整的基因表达载体(写出一点即可)。
(3)检测到_________________ 说明转基因克隆猪已经成功。水母的基因能够在小猪体内成功表达的原因是_____________________________________ 。
(4)绿色荧光蛋白基因所控制的遗传特性,能在转基因克隆猪亲子代中,稳定维持和表达最关键的是__________________________________ 。
(5)图示过程中运用到的生物工程技术有________________________________ (至少写出3个)。
(二)胚胎干细胞(ES细胞)介导法是转基因动物培育的途径之一,请据下图某转基因老鼠的培育流程回答相关问题:
(1)胚胎干细胞是由早期胚胎中分离出来的一类细胞,在形态上,表现为_________ (至少写出2点),在体外培养的条件下具有__________ 的特点。
(2)将修饰后的外源基因导入ES细胞常采用的方法是__________ ;培养过程中,ES细胞所需的气体主要有02和C02,其中02是__________ ,C02用来维持培养液的PH值。
(3)为检测ES细胞的染色体上是否含有外源基因,在分子水平上可采用的方法是__________ ;图中④过程中要将含外源基因的ES细胞导入囊胚的__________ 。将得到的重组胚胎导入⑤体内,其存活的基础是__________ 。
(一)下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答:
(1)过程①和②必需用到的酶有
(2)重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有
(3)检测到
(4)绿色荧光蛋白基因所控制的遗传特性,能在转基因克隆猪亲子代中,稳定维持和表达最关键的是
(5)图示过程中运用到的生物工程技术有
(二)胚胎干细胞(ES细胞)介导法是转基因动物培育的途径之一,请据下图某转基因老鼠的培育流程回答相关问题:
(1)胚胎干细胞是由早期胚胎中分离出来的一类细胞,在形态上,表现为
(2)将修饰后的外源基因导入ES细胞常采用的方法是
(3)为检测ES细胞的染色体上是否含有外源基因,在分子水平上可采用的方法是
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非选择题-解答题
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较难
(0.4)
【推荐3】胚胎干细胞必须从胚胎中获取,但这涉及伦理问题,因而限制了它在医学上的应用。科学家通过体外诱导成纤维细胞,获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞,称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎,而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞,因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图(c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因与细胞的脱分化有关)。回答下列问题:(1)在对成纤维细胞进行培养时,常用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞,这说明细胞间的物质为_____ ,_____ (填“能”或“不能”)用胃蛋白酶处理成纤维细胞,原因是_____ 。
(2)在培养iPS细胞的过程中,培养基中应含有细胞所需的各种营养物质,并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是_____ 。
(3)过程③④为iPS细胞提供的条件不同,分化得到的细胞不同,可知细胞分化是_____ 的结果。若iPS细胞来源于病人自身体细胞的诱导,再将其分化出的细胞移入患者体内的优势是_____ 。
(4)如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞,该技术可能的应用是_____ 。
(2)在培养iPS细胞的过程中,培养基中应含有细胞所需的各种营养物质,并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是
(3)过程③④为iPS细胞提供的条件不同,分化得到的细胞不同,可知细胞分化是
(4)如果诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞,该技术可能的应用是
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